Medicine
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Verwenden ein Knie Arthrometer auszuwertende gewebespezifischen Beiträge zum Knie Beugung Kontraktur in der Ratte
Chapters
Summary November 9th, 2018
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Das Ziel des Protokolls ist die Erweiterung Strecke der Bewegung des Knies Ratte zu messen. Die Auswirkungen von verschiedenen Krankheiten, die die Steifigkeit des Kniegelenks und die Wirksamkeit der Behandlungen erhöhen können quantifiziert werden.
Transcript
Diese Methode kann helfen, wichtige Fragen im Muskel-Skelett-Bereich zu beantworten, wie z. B. die Wirkung eines Eingriffs auf den Bewegungsbereich der Kniegelenke mit einem Rattenmodell. Der Hauptvorteil dieser Technik besteht darin, dass sie eine präzise, reproduzierbare, anwenderunabhängige Methode zur Messung der Kniegelenkverlängerung der Ratte bietet. Beginnen Sie mit Schere und Zange, um die untere Extremität der eingeschläferten Ratte zu degken und die Haut von der darunter liegenden Fassade zu entfernen.
Positionieren Sie dann den Körper auf seiner Seite mit dem experimentellen Bein nach oben. Legen Sie den Oberschenkelknochen in die gerillte Metallklemme, die in die Montagestufe des Arthrometers integriert ist. Sichern Sie den Oberschenkelknochen, indem Sie Löcher durch den Muskel mit dem Präzisionsschraubendreher durchstanzen, um die Klemme distal an den größeren Trochanter zu platzieren.
Passen Sie dann den seitlichen Femoral-Kondyle über die Drehmitte des Arthrometers an. Positionieren Sie den beweglichen Arm mit zwei aufrechten Pfosten hinter dem Bein, nur proximal zum Calcaneus, um das Knie in die passive Verlängerung zu schieben, sobald der Elektromotor aktiviert ist. Verwenden Sie einen Sechskantschlüssel, um die Oberschenkelknochenklemme an ihrer Basis festzuziehen, bis sie gesichert ist.
Stellen Sie sicher, dass die Kamera mit einem Schraubendreher korrekt am Arthometer montiert ist. Überprüfen Sie, ob die Kamera manuell fokussiert ist, und fokussieren Sie die Kamera auf den Femora-Condyle. Stellen Sie die Richtung des Arthrometers im Uhrzeigersinn oder gegen den Uhrzeigersinn ein, abhängig von der Richtung des getesteten Kniebereichs und der Position der Ratte.
Aktivieren Sie den Arthrometermotor, indem Sie gleichzeitig die Power- und Starttasten drücken. Der Arthrometermotor bewegt sich mit einer Geschwindigkeit von 6,6 Umdrehungen pro Minute und stoppt dann für 2,1 Sekunden, wenn er das erste voreingestellte Drehmoment erreicht. Wenn das erste Drehmoment erreicht ist, leuchtet die entsprechende LED auf und die Digitalkamera nimmt automatisch ein Bild des Knies auf.
Sobald das Bild aufgenommen wurde, wird das Arthrometer bis zum nächsthöheren voreingestellten Drehmoment fortgesetzt. Sobald die vier Drehmomente aufgetragen wurden, stoppt das Arthrometer. Sobald die Ratte auf dem Arthrometer positioniert ist und die Prüfung eingeleitet wird, beträgt die Gesamtzeit für die Prüfung eines Knies etwa 18,8 Sekunden.
Um die arthrogene oder nicht-muskuläre Komponente einer Kontraktur zu isolieren, setzen Sie die Drehmomentsequenz zurück, um die auf das Bein ausgeübte Kraft freizusetzen, und führen Sie dann eine Myotomie der hinteren transartikulären Muskeln durch. Sezieren Sie den Muskel proximal genug, um das Kniegelenk, um sicherzustellen, dass die Kapsel nicht geschnitten wird. Nach dem Testen beider Beine vor und nach der Myotomie und dem Aussezieren von erforderlichen Geweben entsorgen Sie den Tierkadaver und alle biogefährlichen Materialien nach dem institutionellen Protokoll und reinigen Sie das Arthrometer.
Öffnen Sie die Datei mit dem digitalen Bild, das von der kamera aufgenommen wurde, die auf dem Arthrometer in Bild J montiert ist. Die Person, die die Analyse durchführt, sollte für die experimentelle Gruppierung des Tieres geblendet werden. Wählen Sie das Winkelwerkzeug aus der Hauptsymbolleiste und verfolgen Sie den femoral-tibialen Winkel, indem Sie eine Femorallinie von der Mitte der Oberschenkelklemme zum seitlichen Kondyle und die tibiale Linie vom seitlichen Femoralkondyle zum seitlichen Malleolus zeichnen. Verwenden Sie das Messwerkzeug, indem Sie auf Analysieren und messen klicken, um den berechneten Winkel anzuzeigen, der durch die beiden oben gezeichneten Linien erzeugt wird.
Verwenden Sie die Konvention von null Grad, um die vollständige Erweiterung zu bedeuten. Diese Abbildung zeigt eine maximale Knieverlängerung nach 16 Wochen Immobilisierung für sieben Ratten im Vergleich zur nicht-immobilisierten kontralateralen Extremität. Für das immobilisierte Knie wurde die Fähigkeit zur maximalen Verlängerung im Vergleich zum Kontralateral reduziert.
Nach der Myotomie erhöhte sich die maximale Verlängerungsfähigkeit für das experimentelle und kontralaterale Knie, das experimentelle Knie zeigt jedoch weiterhin eine Flexionskontraktur. Beim Versuch dieses Verfahrens ist es wichtig, sicherzustellen, dass die Oberschenkelklemme gut gesichert ist, um eine Bewegung des Knies während des Tests zu vermeiden. Nach diesem Verfahren können andere Methoden wie die histologische Analyse des Knies, die Gelenkstruktur durchgeführt werden, um zusätzliche Fragen im Zusammenhang mit dem Gewebe und zellulären Veränderungen zu beantworten, die im Kniegelenk auftreten, um seinen Bereich in Bewegung zu beeinflussen.
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