Medicine
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Con una rodilla Arthrometer para evaluar las contribuciones específicas de tejido a contractura de flexión de rodilla en la rata
Chapters
Summary November 9th, 2018
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El objetivo del protocolo es medir la amplitud de extensión de movimiento de la rodilla de la rata. Los efectos de varias enfermedades que aumentan la rigidez de la articulación de la rodilla y la efectividad de los tratamientos pueden ser cuantificados.
Transcript
Este método puede ayudar a responder preguntas clave en el campo musculoesquelético, como el efecto de una intervención en el rango de movimiento de las articulaciones de la rodilla utilizando un modelo de rata. La principal ventaja de esta técnica es que proporciona un método preciso, reproducible e independiente del usuario para medir la extensión de la articulación de la rodilla de la rata. Comienza usando tijeras y fórceps para desamorar la extremidad inferior de la rata eutanizada y eliminar la piel de la facia subyacente.
A continuación, coloque el cuerpo de lado con la pierna experimental hacia arriba. Coloque el fémur en la abrazadera de metal ranurado que está integrada en la etapa de montaje del artrómetro. Asegure el fémur perforando agujeros a través del músculo con el destornillador de precisión para colocar la abrazadera distal al trocánter mayor.
A continuación, ajuste el cóndyle femoral lateral sobre el centro de rotación del artrómetro. Coloque el brazo móvil con dos postes verticales detrás de la pierna, sólo proximal al calcáneo para empujar la rodilla en extensión pasiva una vez que se activa el motor eléctrico. Utilice una llave hexagonal para apretar la abrazadera del fémur en su base hasta que esté asegurada.
Asegúrese de que la cámara esté correctamente montada en el artómetro con un destornillador. Compruebe que la cámara está en el enfoque manual y enfoque la cámara en el cóndylo femora. Establezca la dirección del artrómetro en el sentido de las agujas del reloj o en el sentido contrario a las agujas del reloj, dependiendo de la dirección del rango de movimiento de la rodilla que se está probando y de la posición de la rata.
Active el motor del arthrómetro pulsando simultáneamente los botones de encendido y arranque. El motor del arthrómetro se moverá a una velocidad de 6,6 rpm y luego se detendrá durante 2,1 segundos después de alcanzar el primer par preestablecido. Cuando se alcanza el primer par, el LED correspondiente se iluminará y la cámara digital tomará una foto de la rodilla automáticamente.
Una vez tomada la imagen, el arthrómetro continuará hasta el siguiente par preestablecido más alto. Una vez aplicados los cuatro pares, el artrómetro se detendrá. Una vez que la rata se coloca en el arthrómetro y se inicia la prueba, el tiempo total para probar una rodilla es de aproximadamente 18,8 segundos.
Para aislar el componente artrogénico o no muscular de una contractura, restablezca la secuencia de torsión para liberar la fuerza aplicada a la pierna, luego realice una miotomía los músculos transarticulares posteriores. Diseccionar el músculo lo suficientemente proximal a la articulación de la rodilla para asegurarse de que la cápsula no se corta. Después de probar ambas piernas antes y después de la miotomía, y diseccionar los tejidos necesarios, deseche la carcasa del animal y todos los materiales biopeligrosos siguiendo el protocolo institucional y limpie el arthrómetro.
Abra el archivo que contiene la imagen digital tomada por la cámara montada en el arthrómetro en Image J.La persona que realiza el análisis debe ser cegada a la agrupación experimental del animal. Seleccione la herramienta de ángulo de la barra de herramientas principal y trace el ángulo femoral-tibial dibujando una línea femoral desde el centro de la abrazadera del fémur hasta el cóndylo lateral, y la línea tibial desde el cóndylo femoral lateral hasta el maléolo lateral. Utilice la herramienta de medición haciendo clic en Analizar y luego en Medir para mostrar el ángulo calculado producido por las dos líneas dibujadas anteriormente.
Utilice la convención de cero grados para significar la extensión completa. Esta figura muestra la extensión máxima de la rodilla después de 16 semanas de inmovilización para siete ratas en comparación con la extremidad contralateral no inmovilizada. Para la rodilla inmovilizada, la capacidad de extensión máxima se redujo en comparación con la contralateral.
Después de la miotomía, la capacidad máxima de extensión para la rodilla experimental y contralateral aumentó, sin embargo, la rodilla experimental sigue demostrando una contractura de flexión. Al intentar este procedimiento, es importante asegurarse de que la abrazadera femoral está bien asegurada con el fin de evitar el movimiento de la rodilla durante la prueba. Después de este procedimiento, otros métodos como el análisis histológico de la rodilla, estructura articular se puede realizar para responder preguntas adicionales relacionadas con el tejido y los cambios celulares que se producen en la articulación de la rodilla para afectar su rango en movimiento.
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