Presenteras här är ett protokoll för att utföra Single-molekyl Förster resonans energiöverföring för att studera HJ upplösning. Tvåfärgad omväxlande excitation används för att bestämma dissociationskonstanter. Enfärgad tidsfördröjning smFRET tillämpas sedan i realtid klyvning analyser för att få Dwell tid fördelning före HJ upplösning.