Behavior
A subscription to JoVE is required to view this content.
You will only be able to see the first 2 minutes.
The JoVE video player is compatible with HTML5 and Adobe Flash. Older browsers that do not support HTML5 and the H.264 video codec will still use a Flash-based video player. We recommend downloading the newest version of Flash here, but we support all versions 10 and above.
If that doesn't help, please let us know.
גרימת אפילפסיה פוסט טראומטית במודל עכבר של פגיעה במוח החוזר ומפוזר טראומטי
Chapters
Summary February 10th, 2020
Please note that all translations are automatically generated.
Click here for the English version.
פרוטוקול שיטתי זה מתאר מודל חדש לבעלי חיים של אפילפסיה פוסט-טראומטית לאחר פגיעה קלה במוח הטראומטי. החלק הראשון לפרטים צעדים לפגיעה מוחית טראומטית אינדוקציה באמצעות מודל שונה ירידה במשקל. החלק השני מספק הנחיות לגבי הגישה הכירורגית עבור מערכות מידע חד-ערוצית לרכישת נתונים אלקטרונצלוגרפיה.
Transcript
הפרוטוקול שלנו הוא הראשון לפרט מודל עכבר של אפילפסיה פוסט טראומטית הנגרמת על ידי פגיעה מוחית טראומטית קלה. השימוש במודל קל של פגיעה מוחית טראומטית מפוזרת מחקה היבט חשוב של הפתולוגיה של פגיעה מוחית טראומטית אנושית שכמעט תמיד יש לה מרכיב מפוזר. על מנת לפתח סמנים ביולוגיים וטיפולים, יש צורך במחקר באמצעות מודלים המשכפלים כראוי היבטים של הפתולוגיה האנושית.
המודל שלנו לפגיעה מוחית טראומטית יש גם פוטנציאל לספק תובנה למנגנונים הגורמים לפגיעה בתפקוד המוח לאחר פגיעה מוחית טראומטית קלה או זעזוע מוח. לאחר אישור חוסר תגובה רפלקס כאב, מניחים את העכבר על כרית קצף ולמקם את הראש של העכבר מתחת לצינור טיפת משקל. מניחים שטוח 1.3 ס"מ קוטר אחד מילימטר עבה 880 מיליגרם משקל דיסק נירוסטה במרכז הראש של החיה בין העיניים והאוזניים.
הסר את הסיכה בצינור טיפת המשקל כדי לשחרר את מוט משקל 100 גרם מגובה של 50 ס"מ. כדי לגרום לפציעה מזויפת בעכברי הבקרה, הסר את מוט המשקל מהצינור כדי למנוע שחרור מקרי של הסיכה במהלך ירידה במשקל. לאחר אינדוקציה ירידה במשקל, מניחים את החיה על גבה על משטח חימום מכוסה מגבת סופגת מרופדת פולי סטרילית עם ניטור עד ירידה מלאה.
לאחר מכן מניחים את העכבר בכלוב נקי כי כבר התחמם על כרית חימום עם ג'ל התאוששות וכמה חתיכות צ'או לח במשך 45 דקות. כדי להכין את השדה הכירורגי להשתלת אלקטרודה EEG, מניחים חיישן טמפרטורה על כרית ומ מניחים את העכבר נפגע המוח מחדש על וילון סטרילי על גבי כרית החימום על המנגנון הסטריאוטקטי. לאחר תיקון הראש במקום עם חטיפי אוזניים, להחיל משחה סיכה על העיניים של החיה ולהשתמש קרם depilatory כדי להסיר את השיער מן הקרקפת.
לחטא את העור החשוף עם שלוש 20 שניות לסירוגין ספוגיות של פתרון חיטוי כירורגי יוד povidone ו 70% אתנול בתנועה מעגלית. לאחר הסרת הקרקפת, יש למרוח המוסטטים קטנים על גבולות העור שנפתחו כדי להרחיב את האזור החשוף. לאחר מכן, השתמש באזמל כדי להסיר בעדינות את periosteum ולנגב את הגולגולת עם מי חמצן.
כאשר הגולגולת מנוקה מרקמות ומציג מראה לבנבנה, יבש את העצם עם גזה סטרילית או ספוגית. להשתלת אלקטרודה, השתמש במקדחה במהירות גבוהה עם קצת פלדה עגולה של 0.5 מילימטר ב- 5, 000 עד 6, 000 סיבובים לדקה כדי ליצור שישה חורי בר עבור אלקטרודות הבורג. כאשר כל החורים נקדחו, מניחים את שש אלקטרודות הבורג לתוך חורי בר ומערבבים חצי כף מדידה של אבקת מלט דנטלית עם כמה טיפות של ממס.
השתמש מרית לבחוש עד תערובת מלט שיניים הוא דביק אבל חמרן ונוקשה מספיק כדי להיות מרוכז כראוי כאשר הניח על הגולגולת של החיה. החל את המלט על כל פני השטח החשופים של הגולגולת וכל אלקטרודה בורג. לאחר שעה עד שתי דקות, הפעל את ברזל הלחמה והצב את שלושה ראש EEG הר לזרוע מחזיק סטראוטקטי.
מקם את הר הראש מעל הגולגולת כך שש עמדות עופרת חוט להתאים את המיקום של עופרת החוט של כל אלקטרודה בורג. מנמיך את המכשיר כך שחלק הגחון שלו מונח על גבי מלט השיניים. סובב את החוט של כל עופרת מכל אחד מאלקטרודות הבורג עם עופרת החוט המתאימה של הר הראש, הלחמה כל זוג חוט מעוות להוליכון אות תקין ולהשתמש במספריים כדי לקצץ כל חוט עודף.
לכופף כל זוג מוליד של מוביל חוט סביב הר הראש. כאשר כל הזוגות היו כפופים, לכסות את כל החוט עם מלט שיניים טרי משאיר רק את החלק השחור של הר הראש חשוף. שחרר את ההמוסטטים המחזיקים את מדפים העור ולהחיל חיטוי chlorhexidine על האזור סביב השתל, כדי למנוע זיהום.
לאחר מכן להעביר את החיה מן המנגנון לאיזון כדי למדוד את המשקל של החיה כהתייחסות ניטור עתידי לפני הצבת החיה בכלוב נקי על כרית חימום חם עם ניטור, ג'ל התאוששות, וכמה חתיכות צ'או לח. בנתון זה, התקף ספונטני בעכבר 97 ימים לאחר ירידה חוזרת ונשנית במשקל פגיעה מוחית טראומטית נרשמה באמצעות שלושה הר ראש EEG מוגדר כפי שהוכח בפרוטוקול וידאו זה מוצג. כאן, התקף אלקטרוגרפי לא עוויתות ספונטני נרשם בעכבר 65 ימים לאחר ירידה במשקל חוזרת פגיעה מוחית טראומטית מוצגת.
בנתון זה, התקף ספונטני בעכבר 23 ימים לאחר ירידה חוזרת ונשנית במשקל פגיעה מוחית טראומטית נרשמה באמצעות הר ראש EEG אחד. העוצמה הספקטרלית של התקף טיפוסי מצביעה על הצפיפות הגבוהה ביותר בטווח של 10 עד 40 הרץ עם שיא של 15 הרץ. פרוטוקול זה מדגים את לוחות הזמנים של הופעת התקפים בבעלי חיים לאחר פגיעה מוחית טראומטית במשקל שחוזרת על עצמה, הממחיש את שכיחות הצבירת ההתקפים בבעלי חיים מסוימים ומדגיש את החשיבות של רכישת הקלטות רציפות ולא לסירוגין.
מיקום נכון של דיסק הפלדה, השתלה זהירה של אלקטרודות הבורג והלחמה זהירה של מוליכי החוט הם כולם חיוניים לניסוי מוצלח לטווח ארוך. לאחר ניטור EEG, בעלי חיים עם פגיעה מוחית המפתחים התקפים יכולים להיות ריבוד מאלה שאינם לניתוח עוקב של ההבדלים התאיים, המולקולריים והפיזיולוגיים שלהם. כדי לשכבות בעלי חיים עם אפילפסיה פוסט טראומטית מאלה לגרום לפגיעה מוחית טראומטית אבל לא לפתח התקפים הוא קריטי להתפתחות של התערבויות וסמנים ביולוגיים.
Related Videos
You might already have access to this content!
Please enter your Institution or Company email below to check.
has access to
Please create a free JoVE account to get access
Login to access JoVE
Please login to your JoVE account to get access
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Please enter your email address so we may send you a link to reset your password.
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Your JoVE Unlimited Free Trial
Fill the form to request your free trial.
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Thank You!
A JoVE representative will be in touch with you shortly.
Thank You!
You have already requested a trial and a JoVE representative will be in touch with you shortly. If you need immediate assistance, please email us at subscriptions@jove.com.
Thank You!
Please enjoy a free 2-hour trial. In order to begin, please login.
Thank You!
You have unlocked a 2-hour free trial now. All JoVE videos and articles can be accessed for free.
To get started, a verification email has been sent to email@institution.com. Please follow the link in the email to activate your free trial account. If you do not see the message in your inbox, please check your "Spam" folder.
