Подготовка образцов в кварцевом кристалле Измерение микробаланса белковой адсорбции и полимерной механики

Микробаланс кварцевого кристалла полезен для зондирования малых концентраций другого соединения и может быть применен к вопросам, касающимся механики мягкой материи и биоматериальных систем. Основным преимуществом является то, что микробаланс кварцевого кристалла способен получать высокотоктякую информацию для небольших размеров выборки. При извлечении информации о механическом свойстве необходимо работать с пленками соответствующей толщины.

Исследователи должны быть осторожны, чтобы применить правильное моделирование для фильма во время анализа. Техника хорошо подходит для изучения широкого спектра материальных систем и для понимания того, как механические свойства полимерных материалов реагируют на окружающую среду. Включив все необходимое оборудование, снимите модуль потока с камерной платформы и отвинтите большие большие пальцы, чтобы открыть модуль.

Высушите O-кольцо на модуле потока потоком азотного газа и убедитесь, что O-кольцо лежит ровно. Установка датчика на O-кольцо путем размещения датчика с активной стороной поверхности вниз и якорной формы электрода, ориентированного на маркер в модуле потока. Найти начальные резонансные частоты датчика.

Поместите ввеся насос трубки в 1X PBS. Запустите поток внешнего насоса со 25 микролитров в минуту и визуально осмотрите трубы, чтобы убедиться, что жидкость течет через трубку. Дайте потоку жидкости правильно уравночные, по крайней мере 15 минут.

В программном обеспечении нажмите на начало измерения, чтобы начать измерение и начать сбор данных. Мониторинг значения частоты и рассеивания в течение по крайней мере пяти минут, чтобы обеспечить стабильный базовый уровень. Остановите насос и переместите входные трубки в буферный раствор коллагена ацетата и возобновите поток жидкости.

Обратите внимание на время этого события для более длительного анализа. Разрешить новые значения частоты и рассеивания, чтобы уравночные в течение восьми до 12 часов до стабильного значения, а затем остановить насос, переместить вход труб обратно в 1X PBS раствор и возобновить поток жидкости. Обратите внимание на время этого события для более длительного анализа.

Опять же, позвольте новым значениям частоты и рассеивания уравночные в течение 30 минут до стабильного значения. Завершите сбор данных измерения, а затем сохраните данные. Во-первых, распоять голый кварцевый кристаллический датчик в держателе образца, подключенном к анализатору сети векторов и компьютеру.

Включите анализатор, чтобы применить колеблющееся напряжение к датчику и собрать эталонный спектр проводимости для датчика в воздухе, а затем погрузить держатель образца в lipless 100 миллилитров стакан заполнен дистиллированной водой и собирать спектр эталонной проводимости для голого датчика в воде. Вставьте небольшую кремниевую пластину в раствор бромистого калия 0,5 моляра под углом, чтобы создать слайд для кварцевого датчика во время шага, чтобы предотвратить сползание пленки от датчика. Приготовьтесь добавить УИК к поверхности датчика.

Если комплекс УИК состоит из двух этапов, тщательно нарисуйте в пипетки около 0,5 миллилитров полимерной фазы. Поддерживая давление на трубную лампу, чтобы не позволить полимерно-бедной фазе войти в пипету, вынюйте пипетки из раствора. Протрите внешнюю часть пипетки с помощью химии салфетки.

Добавьте достаточное количество растворов на поверхность кварцевого датчика, чтобы полностью покрыть поверхность. Убедитесь, что на поверхности датчика нет видимых пузырьков в растворе. Спиновое покрытие образца УИК и немедленно погрузить датчик в 0,5 молярного бромистого раствора калия, чтобы предотвратить кристаллизацию соли на пленке.

Разрешить фильм аннеал, по крайней мере 12 часов. Перенесите датчик в стакан, наполненный дистиллированной водой, чтобы удалить избыток бромистого калия из пленки и задней стороны датчика. Оставьте датчик в растворе на 30-60 минут.

Сделайе измерение пленки, применяемой к поверхности датчика в воздухе со ссылкой на голый датчик в воздухе. Разрешить данные пленки, чтобы уравночные. Затем вставьте сушеный сульфат кальция в 100-миллилитровый стакан без губ и измерьте полностью сухую толщину пленки.

Удалить сульфат кальция из стакана и промыть стакан дистиллированной водой. Заполните 100 миллилитров стакан без губ с 30 миллилитров дистиллированной воды. Вставьте бар для перемешивания, чтобы убедиться, что вода циркулирует вокруг пленки.

Со ссылкой на голый датчик в воде, измерить пленку в воде в течение 30 до 45 минут или до тех пор, пока данные пленки равномерным. Приготовьте 15-миллилитровый раствор из трех бромистого молярного калия, измерив 5,35 грамма бромистого калия в цилиндр и заполните до 15 миллилитров дистиллированной водой. Вихрь до растворения.

Лицо пленки от того, где бромистого раствора калия добавляется в воду, так что пленка не растворяется. Добавьте раствор бромистого калия в стакан с дистиллированной водой в 0,1 молярных приращениях. Убедитесь, что система equilibrated перед добавлением еще одно дополнение бромистого раствора калия.

После того, как все данные были получены, удалите пленку из держателя и поместите в стакан дистиллированной воды. Разрешить соль оставить пленку на 30 до 60 минут и воздух сухой пленки. В этом исследовании, введение коллагенового раствора вызвало поглощение белка, чтобы начать, который наблюдался как устойчивое снижение частоты и увеличение рассеивания с течением времени, пока плотность придерживались коллагеновых плато на стабильном базовом уровне.

Изменения частоты коррелируют с массой пленки, а рассеивание коррелирует с рассеиванием энергии из пленки. Теоретическая модель необходима для количественного получения вискоэластичных свойств. Вязкоэластический анализ коллагена с использованием модели закона власти показывает воздушную массу, сложный модуль стрижки и вязко-ластический угол фазы соответственно.

Первые 10 часов указывают на основную стадию асорбции коллагена на поверхности датчика с периодом от 10 до 20 часов, показывающим стадию эквилибрации до того, как буферная стирка выполняется в 20 часов. Вот сюжет вязко-вязкого угла фазы и сложный модуль стрижки над общим диапазоном образцов, измеренных с помощью ККМ. Зеленая линия указывает на линейную связь между двумя свойствами.

Этот сюжет показывает, как УИК может продемонстрировать широкий спектр механических свойств на основе соотношения полимера, воды и соли в системе. Подготовка образца непосредственно влияет на результаты эксперимента ККМ. Понимание того, какие данные вы хотите узнать из выборки, говорит о том, насколько толстой должна быть выборка.

ККМ очень полезен для зондирования экологических и биологических процессов. Он также может исследовать реологическое поведение в высокочастотном режиме для характеристики вязкости материалов.