Kronisk stress Skift Ansträngning-Relaterade Choice Beteende i en Y-Maze Barrier Uppgift hos möss

Detta protokoll gör det möjligt för forskare att undersöka effekterna av kronisk stress på effortful svara i både manliga och kvinnliga möss. En fördel med denna teknik är att både manliga och kvinnliga möss samtidigt kan genomgå ett validerat kroniskt socialt nederlag paradigm tillåter belöning beteenden att direkt jämföras. Historiskt sett har preklinisk forskning om humörstörningar utnyttjat beteendemässiga uppgifter som involverar undvikande av hotfulla miljöer.

Belönings- och motivationsuppgifter, som ansträngningsrelaterade valmöjligheter, kan dock erbjuda mer translationell relevans. För att förbereda fordonslösningen, lös 3,375 gram beta-cyklodextrin i 750 milliliter kranvatten i en en liters skruvskiva glasbehållare. För att förbereda kortikosteronlösningen, lös 3.375 gram beta-cyclodextrin i 750 milliliter kranvatten, följt av tillsats av 26,25 milligram kortikosteron.

Lös kortikosteron i lösning i ett ultraljud renare vattenbad i cirka 30 minuter vid 40 kilohertz tills vätskan visar ett tydligt utseende, fyll sedan vattenflaskor i fordonet och kortikosteron mus grupp med lämpliga lösningar och registrera volymen av vätska som konsumeras två gånger i veckan. Att habituera mössen till Y-labyrinten, dagen efter mat deprivation, placera ett stort antal 20 milligram grain-baserade mat pellets i locken på två 50 milliliter centrifugering rör och placera en mössa i slutet av varje arm av Y-labyrint, sedan placera en mus i startboxen av Y-labyrint med start rutan avdelare på plats i några sekunder innan du tar bort avdelaren och låta musen för att utforska Y-labyrinten för 15 Minuter. Efter två dagar av Y-labyrint tillvänjning, plats för pellets i ett lock för hög belöning arm och placera två pellets i en mössa för låg belöning arm.

För en hög belöning tvingade val rättegång, blockera tillgång till låg belöning arm och placera musen i startrutan för ett par sekunder innan du tar bort avdelaren, så att musen 60 sekunder för att komma in i hög belöning arm att konsumera de tillgängliga pellets. För en låg belöning tvingade val rättegång, blockera tillgång till hög belöning arm. För fritt val utbildning, börja varje session med en hög och en låg arm tvingade val prov innan du slutför 10 fritt val prövningar.

Låt musen för att välja antingen labyrint arm. När musen har rest till slutet av armen till locket på pellets, placera en arm avdelare bakom musen, låsning i djuret tills den har förbrukat pellets. Spela in vilken arm som väljs för alla 10 fria val försök dagligen.

När en mus har valt den höga belöningsarmen för 7 av 10 försök i ett fritt val träningsdag, placera en 10 centimeter barriär halvvägs ner hög belöning arm i Y-labyrinten och utföra minst två höga och låg arm påtvingade val försök med barriären på plats. Efter att ha avslutat alla fyra försök, placera musen i startrutan och låta musen för att välja en arm för 10 fritt val försök med 10 centimeter barriär till hög belöning arm på plats. På följande dag, habituate och testa musen som visat, men använda en 15 centimeter barriär i hög belöning arm.

Nästa dag, testa musen med en 20 centimeter barriär som visats. För kronisk nondiscriminatory social nederlag stresstestning, anpassa burarna av CD1 hanar med C57BL/6J hanar och honor med CD1 burar i fronten och C57BL/6J burar intill CD1 hanmöss i det sociala nederlag rummet. För att starta rättegången, placera en vuxen man och en vuxen kvinnlig experimentell C57BL/6J mus i hemburen på varje CD1-angripare för en fem minuters social nederlag session och spela in attack latens och frekvens av attack för både manliga och kvinnliga försöksdjur.

I slutet av sessionen, överföra hane C57BL/6J mus i buren av co-inrymt CD1 hanar åtskilda av en tydlig perforerad plexiglas barriär. Separera de attackerande CD1- och honmössen C57BL/6 med en liknande klar perforerad plexiglasbarriär. För en kontroll session, placera en kontroll kvinnliga musen i hemmet buren av en kontroll manliga C57BL/6 mus.

Efter fem minuter, placera en klar perforerad plexiglas avdelare mellan djuren. I slutet av det första experimentet roterar du mössen för de återstående nio nederlagssessionerna, så att varje C57BL/6-par roteras en bur till vänster för att ge en ny interaktion med nya CD1-möss för varje session. Kronisk kortikosteron och kronisk nondiscriminatory social nederlag stress möss både uppvisar en minskad genomsnittlig kroppsvikt jämfört med fordon och kontroll djur.

Dessa möss konsumeras också mindre menar hem bur lab chow. Fordons- och kortikosteronadministrerade möss förbrukar en liknande vätskevolym under fyra veckors behandling och tre veckors beteendetestning. Kronisk nondiscriminatory social nederlag stress producerar en maladaptiv fenotyp i mottagliga möss jämfört med antingen motståndskraftiga eller kontroll möss som inte utsätts för kronisk noncriminatory socialt nederlag stress visar en minskning av tiden i interaktionszonen som innehåller en ny CD1 mus.

Både kronisk kortikosteron och kronisk nondiscriminatory sociala nederlag stress möss producera en förändring i effortful svara när barriären höjd ökar till 15 och 20 centimeter. Hög och låg belöning arm latens med 15 centimeter barriären inte påverkas av kortikosteron administration och är liknande för båda grupperna med både låg och hög belöning armar. Viktigt, om kronisk kortikosteron eller kronisk nondiscriminatory social nederlag stress försämrar inlärning av Y-labyrint barriäruppgift, dessa möss kan misslyckas med att nå kriteriet i fritt val träningspass, påverkar efterföljande barriärresultat tolkning.

Dessutom kan den sociala interaktionsuppgiften användas för att stratifiera mössen till motståndskraftiga och mottagliga populationer, liksom efter kön. När du utför Y-labyrintbarriären uppgift, är det viktigt att spela in både den valda armen och latensen för att nå mat pellet belöning i varje enskild rättegång. Andra viktiga och translationallly relevanta belöning-relaterade beteenden, såsom resultatet devalvering eller progressiv förhållandet, kan utföras efter den kroniska kortikosteron sociala nederlag eller kronisk nondiscriminatory sociala nederlag protokoll.