March 2nd, 2022
Aquí, presentamos un protocolo que describe el cultivo de organoides intestinales caninos en un sistema de soporte permeable de doble cámara. Se describe la siembra de organoides en los soportes permeables, el mantenimiento de la monocapa y los experimentos posteriores de permeabilidad al fármaco.
La combinación de la tecnología de organoides caninos y un sistema de soporte permeable de doble cámara supera las limitaciones de las líneas celulares experimentales en 2D utilizadas tradicionalmente en modelos de investigación biomédica. La tecnología puede aumentar la fiabilidad de las predicciones de la permeabilidad oral aparente de los candidatos a fármacos terapéuticos tanto en pacientes caninos como humanos. El sistema se puede aplicar a otros campos de la investigación biomédica, incluida la investigación microbiológica, los estudios de absorción viral, las interacciones entre medicamentos y los mecanismos de transporte de medicamentos. La estandarización, la documentación detallada de los procedimientos experimentales y el monitoreo constante de las monocapas celulares son prácticas cruciales necesarias para los ensayos de soporte permeable. Coloque la matriz de membrana extracelular en hielo para comenzar a descongelar. Sumérjalo en hielo para protegerlo contra la descongelación rápida y evitar la solidificación. Enfrie previamente una centrífuga refrigerada a 4
Este artículo presenta un protocolo para el cultivo de organoides intestinales caninos utilizando un sistema de soporte poroso de doble cámara. El enfoque mejora la fiabilidad de las predicciones de permeabilidad de fármacos en modelos caninos y humanos.