Teknik av minimalinvasiv tvärgående aorta sammandragning i möss för induktion av vänsterkammarhypertrofi

Medicine

Your institution must subscribe to JoVE's Medicine section to access this content.

Fill out the form below to receive a free trial or learn more about access:

 

Summary

Syftet med detta protokoll är att beskriva steg för steg-tekniken med minimalinvasiv tvärgående aorta sammandragning (TAC) hos möss. Genom eliminering av intubation och ventilation som är obligatoriska för de vanligaste standardförfarandet, minimalinvasiv TAC förenklar operativa förfarandet och minskar påfrestningen på djuret.

Cite this Article

Copy Citation | Download Citations

Tavakoli, R., Nemska, S., Jamshidi, P., Gassmann, M., Frossard, N. Technique of Minimally Invasive Transverse Aortic Constriction in Mice for Induction of Left Ventricular Hypertrophy. J. Vis. Exp. (127), e56231, doi:10.3791/56231 (2017).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

Tvärgående aorta sammandragning (TAC) hos möss är en av de vanligaste kirurgiska teknikerna för experimentell undersökning av trycket överbelastning-inducerad vänster vänsterkammarhypertrofi (LVH) och dess progression till hjärtsvikt. I majoriteten av de rapportera undersökningarna utförs denna procedur med intubation och ventilation av djuret som återger det krävande och tidsödande och lägger till den kirurgiska bördan till djuret. Syftet med detta protokoll är att beskriva en förenklad teknik av minimalinvasiv TAC utan intubation och ventilation av möss. Kritiska steg av tekniken betonas för att uppnå låg mortalitet och hög effektivitet i inducerande LVH.

Manliga C57BL/6 möss (10-vecka-gammal, 25-30 g, n = 60) var bedövas med en intraperitoneal injektion av en blandning av ketamin och xylazin. I en andas spontant djur efter en 3-4 mm övre partiell sternotomi, ett segment av 6/0 silk suturen gängade genom ögat av en ligatur stöd var passerade under aortabågen och bunden över en avtrubbad 27 gauge nål. Simulerade manövrerade djur genomgick samma kirurgisk beredning men utan aorta sammandragning. Effekten av förfarandet i inducerande LVH intygas av en betydande ökning av hjärta/kropp viktförhållande. Detta förhållande framställs dagar 3, 7, 14 och 28 efter kirurgi (n = 6-10 i varje grupp och varje tidpunkt). Med vår teknik, observeras LVH i TAC jämfört med sham djur från dag 7 till dag 28. Operativa och sent (över 28 dagar) dödlighet är båda mycket låg på 1,7%.

Sammanfattningsvis, vår kostnadseffektiva teknik med minimalinvasiv TAC i möss bär mycket låg operativa och postoperativ mortalitet och är mycket effektiva i att förmå LVH. Det förenklar operativa förfarandet och minskar påfrestningen på djuret. Det kan enkelt utföras genom att följa de kritiska steg som beskrivs i detta protokoll.

Introduction

Under de senaste åren, studier av hjärtsvikt har bedrivits i livskraftiga djur modeller1. Jämfört med stora djurmodeller av hjärtsvikt, har små djurmodeller många potentiella fördelar. Bredvid lägre kostnader bostads-och underhåll är små djurmodeller tillgänglig för fler forskare på grund av den mindre komplexa anläggningar som behövs2.

Hjärtsvikt musmodeller erbjuder många av samma fördelar som råtta modellerna. Dessutom till minskad bostäder kostar3, musmodeller nytta av tillgången till relevanta genmanipulerad och knockout (KO) stammar. Möjligheten att cellen typspecifika, inducerbara KO eller transgena strategier gör musen ett ovärderligt verktyg att studera patogenesen vid hjärtsvikt och att försöka identifiera nya behandlingsregimer3.

Bland musen modeller av hjärtsvikt används för närvarande4, tvärgående aorta sammandragning (TAC) som beskrevs först av Rockman5 är den föredragna modellen att generera trycket överbelastning-inducerad vänsterkammarhypertrofi (LVH)1 , 3. den största fördelen med denna modell är möjligheten att tillåta stratifiering av LVH2, även om vänsterkammarsvikt remodeling svar på TAC är variabel bland olika mus stammar. I synnerhet utvecklar C57BL/6 möss snabb LV dilatation efter TAC som inte kan uppstå med andra stammar4,6,7.

Den plötslig debuten av hypertoni som uppnåtts med TAC orsakar en cirka 50% ökning av LV massan inom 2 veckor, gör det möjligt att snabbt undersöka aktiviteten av farmakologisk eller molekylär interventioner som syftar till att modulera utvecklingen av LVH4. Akut induktion av allvarlig hypertoni av TAC inte exakt återge den progressiva vänsterkammarhypertrofi och remodeling observerats i den kliniska inställningen av aortastenos eller arteriell hypertension. Ändå, denna modell används av många utredare att identifiera och ändra nya terapeutiska mål i hjärtsvikt4.

Utför TAC i möss kräver större kirurgisk kompetens än vad som krävs för andra tekniker som används för att framkalla LVH och efterföljande hjärtsvikt2. De flesta författarna utföra proceduren genom intubating och ventilerande djur2,8, vilket gör proceduren mer krävande och tidsödande och lägger till den kirurgiska bördan för djuret. Endast några utredare har använt minimalinvasiv TAC i sin studie med kort hänvisning till kirurgiskt ingrepp9,10,11.

Syftet med detta protokoll är att beskriva steg för steg en förenklad och användarvänlig teknik för minimalinvasiv tvärgående aorta förträngning i möss, belysa de kritiska skeden av förfarandet. Genom att följa dessa viktiga steg, kan man enkelt utföra denna teknik.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

manliga C57BL/6J möss (10 veckor, 25-30g, n = 60) används i detta protokoll. Djur får Human vård i enlighet med de riktlinjer som formulerats av det franska ministeriet för jordbruk och av högre utbildning och forskning, och alla procedurer utförs i enlighet med Europeiska gemenskapen rådets direktiv av den 24 November 1986 () 86/609/EEG) och de franska lagarna. Protokollet godkändes av den " Regional etikkommitté för djur experiment CREMEAS " (nr 2016092816207606).

1. förberedelse för kirurgi

  1. upprätthålla mössen i en vecka efter ankomsten i djuranläggningen på en 12h / 12h ljus/mörk cykel, i standard burar, med mat (för detaljer se tabell av material) och vatten tillgängliga ad libitum.
  2. På dagen för operation, placera möss i enskilda burar några minuter före induktion av anestesi, för att undvika ytterligare stress för djuret. Sterilisera alla kirurgiska instrument dagen innan operation.
  3. Injicera inom peritoneally en engångsdos av en blandning av ketamin (51,4 mg/kg) och xylazin (3,3 mg/kg) utspätt i saltlösning (0,9% NaCl).
  4. Kontrollera av djupet, anestesi av avsaknaden av tå-retreat reflexen.
  5. Raka halsen och bröstet av djuret med en kommersiellt tillgänglig rakhyvel och desinficera den rakade området med 70% alkohol.
  6. Placera djuret liggande på en ren kork arbetande pad och fixa tassarna med självhäftande tejp.

2. Operation

  1. steril operationsteknik används under hela förfarandet. I ett spontant andning djur, utföra en längsgående mittlinjen cervikal snitt över 10 mm med en 11-blade kniv från supra-sternala skåran i mitten av bröstet för att exponera bröstbenet ( figur 1).
  2. Återkalla sköldkörteln genom att passera en 4/0 monofilament polypropylen vistelse sutur med en Crile-trä nålförare och Tejpa fast den till arbetande pad.
  3. Separat rakt på sak före luftrör musklerna med mikrokirurgiska pincett att avslöja luftstrupen.
  4. Skjut försiktigt den slät spets böjda mikrokirurgiska pincett med stängda käkarna över luftstrupen och bakom bröstbenet.
  5. Av försiktigt öppna och stänga käftarna på slät-tippas böjda mikrokirurgisk tången utföra en trubbig dissektion under pre luftrör musklerna och bakom bröstbenet att flytta lungsäcken bort.
  6. Ta tag höger supra-nyckelben musklerna med slät spets rakt mikrokirurgiska tången och dra upp försiktigt bröstet djurets.
  7. Skjut sämre käken av den ben nipper under bröstbenet och utföra en 3-4 mm övre partiell sternotomi ( figur 2). Direkt den nedre delen av den mini-sternotomi något mot vänster.
  8. Passerar en 7/0 monofilament polypropylen vistelse sutur från inne till utanför genom de andra interkostalrummet på varje sida av de mini-sternotomi använder en mikrokirurgiska nålförare. Bo nära costo-sternala vinkel för att undvika skada till interkostal och interna bröstkorgens kärl eller pleura.
  9. Sprida sternala kanterna med 7/0 monofilament polypropylen vistelse suturer på varje sida och fixa dem till arbetande pad med självhäftande tejp.
  10. Försiktigt flytta undan före luftrör muskler, mediastinum fett och bräss med slät spets böjda mikrokirurgisk pincett för att visualisera aortabågen i lågenergi-förstoring (2-3 X) ( figur 3). Var försiktig att inte röra eller skadas de parietala pleura för att förhindra pneumotorax utveckling.
  11. Utsätta den mjuka vävnaden under aortabågen genom att knyta pincett ( figur 4 A) och sprida försiktigt käkarna. Förbereda en tunnel i den mjuka vävnaden under aortabågen med andra kopplingsförbehåll tången genom att försiktigt öppna och stänga käftarna i den mjuka vävnaden.
  12. Passera ett segment av 6/0 silk ligatur gängade genom ögat av en ligatur stöd ( figur 4 B) hålls i vänster hand under aortabågen och hämta det genom att knyta pincett hålls i höger hand mellan ursprung just innominate och vänster gemensamma halspulsåder ( figur 5).
  13. Skär en 27-gauge nål till en längd av 5 mm och trubbig båda ändar genom att trycka på dem med en Crile nålförare. Placera den trubbiga 27-gauge kanylen bredvid aortabågen ( figur 6) med slät spets rakt mikrokirurgiska pincett och knyta suturen tätt runt nålen och aorta mellan just innominate och vänster gemensamma halspulsådern artärer med två kopplingsförbehåll tången ( figur 7). För att knyta tätt suturen, utföra en inledande dubbel Knut följt av fyra extra knop. Kontrollera att alla knutar är flat.
  14. Efter ligering, ta bort snabbt men försiktigt nålen att uppnå en 0,4 mm diameter förträngning och en reproducerbar tvärgående 65-70% aorta förträngning.
  15. Kontrollera hemostas av den mjuka vävnaden runt aortabågen, sternala kanter och pre luftrör muskler. Sätta resorberbara hemostatiska gasväv varhelst sipprar blod observeras. Ta bort den 7/0 monofilament polypropylen bo suturer används för att sprida sternala kanterna.
  16. Passera en enkel 6/0 monofilament polypropylen sutur med en mikrokirurgiska nålförare från utanför till insidan av den vänstra andra interkostalrummet och sedan från inuti utanför den just andra interkostalrummet. Bo nära costo-sternala vinkel för att undvika skada till interkostal och interna bröstkorgens kärl eller pleura.
  17. Sammanföra sternala kanterna genom att knyta 6/0 monofilament polypropylen sutur med en Crile-trä nålförare.
  18. Nära huden med en 5/0 monofilament polypropylen med sutur i ett lager med en Crile-trä nålförare.
  19. Utför sham procedur identiska till sammandragning operation men utan att binda en sutur runt aorta.

3. Postoperativ återhämtning

  1. mycket noggrant övervaka djuren. flytta musen till en enskild bur och placera den i en liggande ställning.
  2. Tillåt musen för att återhämta sig under en värmande ljus tills fullt vaken (mindre än 1 h efter inducera anestesi).
  3. För postoperativ analgesi, injicera 0,1 mg/kg av buprenorfin intraperitonealt. Upprepa subkutana injektioner på 0,1 mg/kg av buprenorfin varje 8 h för de tre första dagarna som anges.
  4. Placera manövrerade möss i standard burar (maximalt 3 möss per bur) och minsta 2 möss per bur.

4. Hjärta skörd

  1. på dagen för analys, avliva musen med en lösning av ketamin 300 mg/kg och xylazin 20 mg/kg i saltlösning av intraperitoneal injektion.
  2. Först skörda blodet från den sämre vena cava och sedan genom samma linje injicera 5 mL lösning av 2.6 mM EDTA i saltlösning.
  3. Skörda hjärtat, ta bort förmaken och vikt hjärtat (vänster och höger ventriklar utan atria).
  4. Separat vänster från den högra ventrtredjedel enligt artikel med septum kvar till den vänstra ventrikeln delen. Väga både vävnadsprover och frysa dem i flytande kväve.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Operativa och sena överlevnad
Den operativa överlevnaden var mycket hög, 98,3% (59 av 60) för hela serien (TAC och sham manövrerade djur). Endast operativ död berodde på en blödning komplikation i en mus som hyvlat för bluff operation. Postoperativ överlevnad under observationsperioden på 28 dagar var också utmärkt, av 98,3% (58 av 59). Endast sena postoperativa dödsfallet inträffade i en TAC mus dag (D) 16, eventuellt av kardiell Genes.

Validering av tekniken
Presenterade tekniken är mycket tillförlitliga och reproducerbara. Korrekt placering av suturen mellan just innominate och vänster gemensamma halspulsåder bekräftades under vävnad skörd i alla djur som genomgår TAC.

Effekten av tekniken att inducera vänsterkammarhypertrofi validerades genom bestämning av hjärtat vikt/kroppen vikt nyckeltal (HW/BW, mg/g) vid 3, 7, 14 och 28 dagar efter operationen. HW är vikten på vänster och höger ventriklarna utan atria. HW/BW förhållandet ökat betydligt i den bandade jämfört med sham grupperna från postoperativ D7 (4.9±0.2 kontra 4.1±0.05 mg/g, P < 0,01) vidare, och betydligt högre återstod upp till D28 (5.8±0.3 kontra 4.1±0.1 mg/g, P < 0,0001) efter operationen (figur 8). Den observerade ökningen HW/BW kvoten var enbart på grund av en ökning av vänstra ventrikeln/body viktförhållande (figur 9A) sedan den högra ventrikel/body-viktförhållande förblev jämförbara mellan TAC och sham manövrerade djur under hela observationen period (figur 9B).

Dessutom har vi mätt i vänster kammare vävnaden mRNA uttryck för biomarkörer för hjärthypertrofi som tidigare beskrivits12. På D14, mRNA uttryck för hjärnan natriuretiska protein (BNP), förmaksflimmer natriuretiska protein (ANP), ACE-hämmare (ACE), kollagen 1a1 (Col1a1) och omvandla tillväxtfaktor ß (TGFß) var signifikant högre i aorta-banded jämfört simulerade manövrerade djur (figur 10). Därför validerar den observerade vänsterkammarhypertrofi effektiviteten i vår TAC-teknik.

Medelvärdet och standardavvikelsen för medelvärdet jämfördes mellan TAC och sham för med envägs ANOVA följt av Bonferroni's post hoc-test för jämförelse av Parade data.

Figure 1
Figur 1 : Snittet.
Huden är anskäras över 10 mm från supra-sternala notch till mitten av bröstbenet och sköldkörteln är indraget med en vistelse sutur. Klicka här för att se en större version av denna siffra.

Figure 2
Figur 2 : Ben nipper.
Detta instrument kan en kort och exakt snitt i benet för en 3-4 mm övre partiell överlägsen mini-sternotomi. Klicka här för att se en större version av denna siffra.

Figure 3
Figur 3 : Exponering.
Efter indragning av sternala kanterna med 7/0 bo suturer, aortabågen, rätt innominate och vänster gemensamma halspulsåder tillsammans med luftstrupen utsätts. Klicka här för att se en större version av denna siffra.

Figure 4
Figur 4 : A. kopplingsförbehåll pincett. Dessa pincetter är nödvändiga för att utföra en skonsam och trubbig dissektion bakom bröstbenet och runt aortabågen. B. ligatur stöd. Detta är det viktigaste instrumentet för att förverkliga en delikat och atraumatiska passage under aortabågen både TAC och sham manövrerade möss. Klicka här för att se en större version av denna siffra.

Figure 5
Figur 5 : Passage under den aorta arch.
Ett segment av 6/0 silk ligatur är passerade under aortabågen med ligering stödet och placeras mellan just innominate och vänster gemensamma halspulsåder. Klicka här för att se en större version av denna siffra.

Figure 6
Figur 6 : Förberedelse för ligering.
Ett kort segment 2-3 mm av en avtrubbad 27-gauge nål placeras över aortabågen. Klicka här för att se en större version av denna siffra.

Figure 7
Figur 7 : Tvärgående aorta sammandragning.
Silk suturen binds över nålen och aortabågen mellan just innominate och vänster gemensamma halspulsåder med hjälp av kopplingsförbehåll pincett. Silke i stället för polypropylen sutur är att föredra för den aorta ligering eftersom Knut håller bättre. Klicka här för att se en större version av denna siffra.

Figure 8
Figur 8 : Validering av tvärgående aorta sammandragning.
Induktion av hjärthypertrofi av vår minimalt invasiva tvärgående aorta sammandragning framgår av betydande ökning av hjärtat vikt/kroppen viktförhållande i Bandad (svarta staplar) jämfört med sham drivs (vita staplar) möss. Hjärthypertrofi finns redan på D7 efter operation och ökar successivt med tiden upp till D28 (n = 6-10 per grupp. ** P < 0,01, *** P < 0,001, *** P < 0,0001). Data presenteras som menar ± SEM (felstaplar). GrundenSe Klicka här för att visa en större version av denna siffra.

Figure 9
Figur 9 : Vänster (A) och höger (B) ventrikeln / kropp viktförhållande.
Under observationsperioden ökar den vänstra ventrikel/body viktförhållandet medan den högra ventrikel/body viktförhållandet återstår liknande TAC (svarta staplar) jämfört med sham-drivs (vita staplar) djur. Detta bekräftar vänsterkammarhypertrofi utan ändring i höger kammare, och stärker validering av vår teknik (n = 6-10 per grupp. ** P < 0,01, *** P < 0,001, *** P < 0,0001). Data presenteras som menar ± SEM (felstaplar). Klicka här för att se en större version av denna siffra.

Figure 10
Figur 10 : BNP-mRNA uttryck.
mRNA uttryck för hjärnan natriuretiska protein (BNP), förmaksflimmer natriuretiska protein (ANP), ACE-hämmare (ACE), kollagen 1a1 (Col1a1) och omvandla tillväxtfaktor ß (TGFß), positiva kontroller för hjärthypertrofi i aorta-banded (svart fält) vs placebo djur (vit stapel) (n = 6 per grupp) på D14. Uttrycket beräknas som 2(-ΔCt) där kalibratorn är mRNA nivå av Referensgenen Gapdh. Data presenteras som menar ± SEM (felstaplar). * P < 0,05, ** P < 0,01, *P < 0,001 jämfört med sham-gruppen (t-test). Klicka här för att se en större version av denna siffra.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Syftet med detta protokoll är att presentera en stegvisa illustration av den kirurgiska tekniken för minimalinvasiv tvärgående aorta sammandragning i möss. Detaljerad teknisk beskrivning av tvärgående aorta förträngning i möss har rapporterats av andra författare2,8. Dock dessa utredare utföra kirurgi efter intubation och ventilation av djur. Användning av ytterligare ett steg av intubation-ventilation ökar komplexiteten och hela förfarandets längd och globala stress djuren utsätts för. Av dessa skäl har begreppet minimalinvasiv tvärgående aorta sammandragning fått viss uppmärksamhet. Minimalt invasiva tvärgående aorta constrictionen hos möss används för att framkalla vänsterkammarhypertrofi och dess progression till hjärtsvikt9,10,11. Dessa studier fokuserar på vägarna som är inblandade i uppkomsten av vänsterkammarhypertrofi och hjärtsvikt, men inte på beskrivningen av kirurgisk teknik9,10,11.

I detta protokoll redovisar vi i detaljer en förenklad och reproducerbara teknik för minimalinvasiv TAC i möss. En skicklig kirurg kan göra åtgärden sammandragning i 20 minuter och sham operation (utan att suturen binda) 15 minuter. Under våra inledande tekniska bevis fann vi att införandet av ett nyckelinstrument, ligatur stödet, får en mycket låg operativ mortalitet 1,7%. Detta jämför positivt till operativ mortalitet på 4% rapporterats av Rockman et. al. 5, 3,7% av Liao et al. 13 och på 2,7% av Stansfield et al14. Ytterligare, observationsperioden upp till 28 dagar, visar också en mycket låg slutet postoperativ mortalitet 1,7%. Igen, detta kan jämföras med väl den sena mortaliteten rapporteras av Rockman et al (10%)5, Liao et al (19%)13 eller Stansfield et al (2,6%)14.

Passagen under aortabågen är det mest avgörande steget i hela förfarandet. Reproducerbarheten för detta steg var inte beskrivs av Hu och medarbetare som använt en hemgjord wire med en snara på dess avsluta för att passera under aorta mellan ursprunget av just innominate och vänster gemensamma halspulsåder9, inte heller av Tarnavski som placeras i böjd pincett från den mediala sidan under aorta ascendens att fånga 7/0 silke sutur på motsatt sida och flytta den under den stora kroppspulsådern2. Ligatur stödet används i vår teknik tillåter en standardiserad och reproducerbara manöver med låg risk för aorta tår.

En annan avgörande steg av förfarandet är spänningen appliceras slips över den 27-gauge kanylen att minska effektivt och likartad lumen av aortabågen. Först använder vi knyta pincetten, som bidra till att tillämpa en enhetlig och reproducerbara spänning på suturen runt aortabågen. Lämplig placering av suturen verifieras under skörden av hjärtat och aortabågen. Andersen och medarbetare verifierade lämplig placering av bandet genom utvärdering av Doppler signaler av halspulsåder både före och efter placering av aorta band11. I sin rapport accepterades adekvat banding när förhållandet Doppler velocity fördubblats från höger till vänster halspulsåder11. I vår teknik, vi valde att mäta effektiviteten av TAC av graden av inducerad vänsterkammarhypertrofi i banded jämfört med sham djur för att validera förfarandet, eftersom det nödvändiggör inte någon ökad varaktigheten av förfarandet eller kompletterande anestesi av djuren. I vår teknik, graden av vänsterkammarhypertrofi och lämplig placering av banding kontrolleras vid slutet av experimentet. Graden av vänsterkammarhypertrofi av vår teknik jämför positivt med de resultat som rapporterats av andra utredare på 3 veckor efter TAC i möss15. Dessutom intygar låg variationen av förhållandet av hjärta till kroppsvikt observerades i våra Bandad djur låg fluktuationen för spänningen tillämpas på slipsen.

Sammanfattningsvis, genom undvikande av intubation-ventilation ger som presenteras i detta protokoll, vår teknik med minimalinvasiv TAC i möss en tillförlitliga och reproducerbara modell. Denna modell minskar den globala belastningen på djuren och är tid - och kostnadsbesparingar jämfört med TAC med intubation-ventilation av djur. Operativa och sena dödlighet av detta förfarande är mycket låga och gör denna teknik en av metoderna för val för induktion av vänsterkammarhypertrofi i möss.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Författarna har ingen intressekonflikt att avslöja.

Acknowledgements

Detta arbete stöds av bidrag (nr 32016) av schweiziska hjärt-stiftelsen att RT.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Surgical microscope Olympus SZX2-TR30
Razor Rowenta Nomad TN3650FO
Sutures:
Polypropylene 7/0 Ethicon BV-1X
Polypropylene 6/0 BBraun C0862061
Silk 6/0 ligature  FST 18020-60
Polypropylene 4/0 Ethicon 8683
Polypropylene 5/0 Ethicon Z303
Drugs:
Ketamin Merial Imalgène 1000, LBM154AD
Xylazine Bayer Rompun 2%, KP09PPC
Buprenorphine Ceva Vetergesic, 072013
Instruments: 
Bone nippers Fine Surgical Tools 16101-10
Ligation aid Fine Surgical Tools 18062-12
Tying forceps Fine Surgical Tools 18026-10
Needle holder Crile-Wood Fine Surgical Tools 12003-15
Microsurgery forceps  Fine Surgical Tools 11003-12
Microsurgery forceps  Fine Surgical Tools 11002-12
Tissue forceps Fine Surgical Tools 11021-12
Microsurgery needle holder Fine Surgical Tools 12076-12
Microsurgery scissors Fine Surgical Tools 91501-09
Mayo scissors Fine Surgical Tools 14511-15
11-blade knife Fine Surgical Tools 10011-00
RNA extraction and qPCR:
TriReagent Euromedex TR-118-200
Rneasy Mini kit Qiagen 74704
Qubit Fluorimetric RNA assay Fisher Scientific 10034622
RNA 6000 Nano kit Agilent 5067-1511
High Capacity cDNA kit Fisher Scientific 10400745
Taqman Master Mix Fisher Scientific 10157154
Taqman BNP primers Fisher Scientific Mm01255770_g1
Taqman ANP primers Fisher Scientific Mm01255747_g1 
Taqman ACE primers Fisher Scientific Mm00802048_m1
Taqman Col1a1 primers  Fisher Scientific Mm00801666_g1
Taqman TGFb primers Fisher Scientific Mm01178820_m1
Taqman Gapdh primers Fisher Scientific Mm99999915_g1
ABIPrism  Thermocycler Applied Biosystems 7000
Software:
GraphPad Prism GraphPad Prism 7
Animal food
Complete diet for adult rats/mice Safe UB220610R

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Molinari, F., Malara, N., Mollace, V., Rosano, G., Ferraro, E. Animal models of cardiac cachexia. Int. J. Cardiol. 219, (15), 105-110 (2016).
  2. Tarnavski, O. Mouse surgical models in cardiovascular research. Methods. Mol. Biol. 573, 115-137 (2009).
  3. Verma, S. K., Krishnamurthy, P., Kishore, R., et al. Transverse aortic constriction: a model to study heart failure in small animals. Manual of Research Techniques in Cardiovascular Medicine. Ardehali, H. Wiley, J., & Sons. 164-169 (2014).
  4. Patten, R. D., Hall-Porter, M. R. Small animal models of heart failure. Development of novel therapies, past and present. Circ. Heart Fail. 2, (2), 138-144 (2009).
  5. Rockman, H. A., et al. Segregation of atrial-specific and inducible expression of an atrial natriuretic factor transgene in an in vivo murine model of cardiac hypertrophy. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 88, (18), Erratum in: Proc. Natl. Acad. Sci. USA Page 9907 8277-8281 (1991).
  6. Barrick, C. J., Rojas, M., Schoonhoven, R., Smyth, S. S., Threadgill, D. W. Cardiac response to pressure overload in 129S1/SvImJ and C57BL/6J mice: temporal- and background-dependent development of concentric left ventricular hypertrophy. Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 292, (5), 2119-2130 (2007).
  7. Deschepper, C. F., Olson, J. L., Otis, M., Gallo-Payet, N. Characterization of blood pressure and morphological traits in cardiovascular-related organs in 13 different inbred mouse strains. J. Appl. Physiol. 97, (1), 369-376 (2004).
  8. Almeida, A. C., van Oort, R. J., Wehrens, X. H. T. Transverse aortic constriction in mice. J. Vis. Exp. (38), April 21 (2010).
  9. Hu, P., Zhang, D., Swenson, L., Chakrabarti, G., Abel, E. D., Litwin, S. E. Minimally invasive aortic banding in mice: effects of altered cardiomyocyte insulin signaling during pressure overload. Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 285, (3), 1261-1269 (2003).
  10. Faerber, G., et al. Induction of heart failure by minimally invasive aortic constriction in mice: Reduced peroxisome proliferator-activated receptor ϒ coactivator levels and mitochondrial dysfunction. J. Thorac. Cardiovasc. Surg. 141, (2), 492-500 (2011).
  11. Andersen, N. M., Tang, R., Li, L., Javan, H., Zhang, X. Q., Selzman, C. H. IKK-β inhibition prevents adaptive left ventricular hypertrophy. J. Surg. Res. 178, (1), 105-109 (2012).
  12. Nemska, S., Monassier, L., Gassmann, M., Frossard, N., Tavakoli, R. Kinetic mRNA profiling in a rat model of left ventricular hypertrophy reveals early expression of chemokines and their receptors. PLoS ONE. 11, (8), 0161273 (2016).
  13. Liao, Y., et al. Echocardiographic assessment of LV hypertrophy and function in aortic-banded mice: necropsy validation. Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 282, (5), 1703-1708 (2002).
  14. Stansfield, W. E., et al. Characterization of a model to independently study regression of ventricular hypertrophy. J. Surg. Res. 142, (2), 387-393 (2007).
  15. Beetz, N., et al. Ablation of biglycan attenuates cardiac hypertrophy and fibrosis after left ventricular pressure overload. J. Mol. Cell. Cardiol. 101, December 145-155 (2016).

Comments

0 Comments


    Post a Question / Comment / Request

    You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

    Usage Statistics