التشغيل الآلي لانبعاث البوزيترون الطبقي (PET) Radiotracer التوليف بروتوكول للإنتاج السريرية

* These authors contributed equally
Chemistry
 

Summary

انبعاث البوزيترون الطبقي (PET) مواقع التصوير التي تشارك في عدة محاكمات البحوث السريرية المبكرة بحاجة إلى قدرات التصنيع راديوتراسير قوية وتنوعاً. استخدام radiotracer [18و] كلوفارابيني كمثال على ذلك، نحن لتوضيح كيفية أتمتة توليف راديوتراسير استخدام راديوسينثيسيزير مرنة، والمستندة إلى كاسيت والتحقق من صحة التقرير التوليفي للاستخدام السريري.

Cite this Article

Copy Citation | Download Citations | Reprints and Permissions

Schopf, E., Waldmann, C. M., Collins, J., Drake, C., Slavik, R., van Dam, R. M. Automation of a Positron-emission Tomography (PET) Radiotracer Synthesis Protocol for Clinical Production. J. Vis. Exp. (140), e58428, doi:10.3791/58428 (2018).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

تنمية جديدة انبعاث البوزيترون الطبقي (PET) تتبع هو تمكين الباحثين والأطباء لصورة مجموعة كبيرة ومتزايدة من الأهداف البيولوجية، والعمليات. ومع ذلك، ينشئ العدد المتزايد لتتبع مختلف التحديات لإنتاجها في راديوفارماسيس. بينما تاريخيا كان عمليا تكريس تكوين مخصص راديوسينثيسيزير والخلايا الساخنة لإنتاج كل التتبع الفردية المتكررة، أصبح من الضروري تغيير سير العمل هذا. راديوسينثيسيزيرس التجارية الأخيرة استناداً إلى الأشرطة/مجموعات المتاح لكل متتبع تبسيط إنتاج تتبع متعددة مع مجموعة واحدة من المعدات من خلال القضاء على الحاجة إلى التعديلات الخاصة بالتتبع المخصصة. وعلاوة على ذلك، بعض من هذه راديوسينثيسيزيرس تمكين المشغل لتطوير وتحسين البروتوكولات التوليف الخاصة بهم بالإضافة إلى شراء مجموعات المتاحة تجارياً. في هذا البروتوكول، وصف الإجراء العام لكيف يمكن التوليف اليدوي للحيوانات الأليفة جديدة التتبع الآلي على واحد من هذه راديوسينثيسيزيرس، والتحقق من صحتها لإنتاج تتبع السريرية الصف. على سبيل مثال، نحن نستخدم راديوسينثيسيزير أليكسيس، أداة مرنة تستند إلى كاسيت الكيمياء الإشعاعية التي يمكن أن تدعم كل جهود التنمية الراسم الحيوانات الأليفة، فضلا عن تصنيع التحقيق السريرية الروتينية على نفس النظام، لإنتاج [18و] كلوفارابيني ([ 18 و [فرنكات الجماعة المالية الأفريقية)، الراسم الحيوانات الأليفة قياس نشاط إنزيم في فيفو ديوكسيسيتيديني كيناز (dCK). ترجمة توليف يدوي ينطوي على كسر البروتوكول الاصطناعية في عمليات الكيمياء الإشعاعية الأساسية ثم يتم ترجمتها إلى بديهية الكيمياء "وحدة عمليات" بدعم من البرنامج المزج. هذه العمليات يمكن ثم سرعة تحويلها إلى برنامج تجميع الآلي عن طريق تجميع باستخدام واجهة السحب والإفلات. بعد اختبار الأساسية، قد تتطلب عملية التوليف وتنقية الأمثل لتحقيق المردود المنشود والنقاء. حالما يتحقق الأداء المطلوب، يتم التحقق من صحة من التوليف لتحديد صلاحيتها لإنتاج راديوتراسير للاستخدام السريري.

Introduction

يمكن تصور مجموعة متزايدة من الأهداف البيولوجية بشكل حيوي في المعيشة لمواضيع عن طريق أسلوب التصوير الجزيئي التنسيقي توفر الحيوانات الأليفة في فيفو فحوصات محددة من العمليات البيولوجية والكيميائية الحيوية والدوائية باستخدام راديوتراسيرس محددة (جزيئات المسمى مع بوزيترون انبعاث النويدات المشعة) التي يتم ضخها في هذا الموضوع قبل التصوير1. زيادة استخدام الحيوانات الأليفة لدراسة طائفة واسعة من هذه العمليات في العلوم الأساسية والبحوث السريرية2،،من34، وفي اكتشاف وتنمية، والاستخدام السريري للمخدرات في رعاية المرضى5، 6، يؤدي إلى تزايد طلب على مختلف راديوتراسيرس7،8. لتجنب التعرض للإشعاع راديوتشيميست ولضمان إنتاج استنساخه من تتبع هذه لم تدم طويلاً، عادة ما يتم تصنيعها باستخدام راديوسينثيسيزير الآلي داخل خلية "ساخنة". راديوسينثيسيزيرس الأخيرة استخدام بنية التخلص منها-كاسيت/طقم لتبسيط مهمة الامتثال لتصنيع السريرية الصف مع توفير المرونة اللازمة لإعداد أنواع متعددة من راديوتراسيرس ببساطة بمبادلة خارج أشرطة9 . ومع ذلك، في المراحل الإكلينيكية الأولى، عادة ما تكون هناك لا أشرطة الكاسيت/مجموعات المتاحة تجارياً لأداء راديوسينثيسيس الآلي؛ ونتيجة لذلك، مرافق تصنيع المخدرات الحيوانات الأليفة النضال من أجل تخصيص أنظمة لتنفيذ قدرات الإنتاج الراسم المركب-الصف في إطار زمني مناسب وبتكلفة معقولة. وهكذا، تم وضع راديوسينثيسيزيرس التي تجمع بين العمارة كاسيت/طقم مع ميزات لتسهيل التنمية والاستغلال الأمثل لتتبع.

فليكس/شيم أليكسيس (أليكسيس) مثال راديوسينثيسيزير المستندة إلى كاسيت مرنة مع واسعة الكاشف، والمذيبات، ورد فعل درجة حرارة توافق10. ثلاثة أوعية التفاعل ويستخدم إليه روبوتية لتكوين بشكل حيوي في مسار السائل حسبما تقتضيه أي بروتوكول خاص توليف11. يسمح برنامج المزج بإنشاء برامج توليف (تسلسل) لتتبع مختلف عن طريق سحب وإسقاط وحدة عمليات مثل فخ النظائر، و النظائر الوت، إضافة كاشف، تتفاعل، و تتبخر12. وقد كل عملية وحدة مجموعة متنوعة من المعلمات القابلة للبرمجة المتاحة للمشغل، مثل المدةأو درجة الحرارةأو غاز خامل يقود الضغط (الضغط). عن طريق فهم طبيعة كل عملية الوحدة، يمكن يسهل ترجمتها إلى سلسلة عمليات وحدة توليف يدوي وعندئذ تعديلها أثناء الاستفادة المثلى من البروتوكول13. في تركيبة مع وحدة أليكسيس الصرفة/النموذج، يمكن أيضا تنفيذ النظام المتكامل تنقية الآلي ووضع التتبع الحيوانات الأليفة. باستخدام هذا راديوسينثيسيزير، سابقا أبلغنا التجميع الآلي 24 مختلفة 18المسمى و تتبع ومجموعات الاصطناعية11،14،،من1516، كما كذلك راديوفلورينيشن الانزيمية الآلي للجزيئات الحيوية17، بمجرد تغيير الكواشف وعدم تكوين النظام. الآخرين قد أظهرت التجميع الآلي [18و] RO6958948 لتصوير تاو neurofibrillary التشابك18، التجميع الآلي مجموعة الاصطناعية [18و] و-Py-عوامل الإنتاج مع العلامات اللاحقة من الببتيدات19 ، وتوليف الآلي [18و] AM580 لتصوير فوسفوديستريس 10a (PDE10A)20. وعلاوة على ذلك، العديد من المجموعات قد أظهرت إنتاج مواد استشفاف مناسبة للاستخدام السريري، بما في ذلك 4-[18و] فلوروبينزيل-تريفينيلفوسفونيوم ([18و] فبنتب) لتصوير غشاء الميتوكوندريا المحتملة21، [ 18 دكفبيل و] للتصوير من غشاء البروستات محددة مستضد (بسمة)22، و [18و] THK-5351 لتصوير تاو23.

في هذه الورقة، ونحن نستخدم تجربتنا مع [18و] فرنكات الجماعة المالية الأفريقية لتوضيح كيفية إجراء راديوسينثيتيك يدوي يمكن مستقيم وسرعة ترجمتها إلى توليف الآلي مناسبة للإنتاج الروتينية المركب المبادئ التوجيهية التالية. التتبع [18و] فرنكات الجماعة المالية الأفريقية تم تصميمه من أجل تصوير نشاط dCK. راديوسينثيسيس دليل من [18و] ووصف فرنكات الجماعة المالية الأفريقية أصلاً شو et al. 24 كإجراء باستخدام سفينتين تابعتين لرد الفعل وتنقية خرطوشة المتوسطة والسليكا وتنقية [هبلك] نهائي خطوة (انظر المواد التكميلية، القسم 1 لمزيد من التفاصيل). الأخيرة في المختبر ، والدراسات السريرية أظهرت خصوصية استثنائية من هذا التتبع إلى dCK، وقد أظهرت الدراسات الأولى في الإنسان مواتية بيوديستريبوتيون25. وهناك مصلحة مباشرة في نطاق أوسع الدراسات السريرية لتأكيد الحساسية [18و] "الحيوانات الأليفة فرنكات الجماعة المالية الأفريقية" للتغيرات في نشاط dCK ومصلحة طويلة الأجل في مجال التطبيقات السريرية المحتملة لهذا التتبع26. وقد يكون العلامات البيولوجية مفيدة للعلاجات التي تؤدي إلى تنشيط خلايا تي، والحث على ضرر الحمض النووي، أو الاعتماد على برودروجس النظير نوكليوزيد dCK-تعتمد على. [18و] وخاصة فرنكات الجماعة المالية الأفريقية قد تمكين التكوين الطبقي للمرضى لاستجابة محتملة للعلاج مع كلوفارابيني. [18و] فرنك الاتحاد المالي الأفريقي قد تيسر أيضا في دراسة وتطوير مثبطات dCK التي تتقدم نحو التجارب السريرية. منذ تقليديا تم توليفها هذا التتبع يدوياً، النهوض بكل من هذه الدراسات يتطلب توليفة موثوقة، الآلي [18و] فرنكات الجماعة المالية الأفريقية مناسبة للاستخدام السريري.

على الرغم من أننا ذكرت سابقا توليف الآلي [18و] فرنكات الجماعة المالية الأفريقية للدراسات الإكلينيكية16، هذا البروتوكول يبني المزيد من هذه الجهود، ويصف التعديلات الإضافية اللازمة لإنتاج السريرية لهذا التتبع، بما في ذلك إدماج مؤتمتة بالكامل--تنقية وصياغة، وبروتوكول التحقق من الصحة، واختبارات مراقبة الجودة. الإجراءات العامة الموضحة هنا لا تقتصر على وضع توليف الآلي ومناسبة سريرياً [18و] فرنكات الجماعة المالية الأفريقية ولكن يمكن أن يعمم بطريقة مباشرة لتطوير الآلي التوليفات مناسبة للاستخدام السريري للآخر راديوتراسيرس المسمى بالفلور-18.

Protocol

1-الإجراء العامة للتشغيل الآلي والمصادقة على بروتوكول راديوسينثيسيس لتصنيع السريرية

  1. تحليل أهلية نظام توليف يدوي لتصنيع السريرية
    1. القيام بتحليل مخاطر التلوث الناتج مع أي المواد الكيميائية المتبقية غير مرغوب فيها.
      1. تجنب 1 فئة المذيبات مثل البنزين واستبدالها بالمذيبات البديلة المناسبة (الفئة 2 أو الفئة 3).
      2. تجنب المواد الكيميائية التي سيكون من الصعب الكشف عن في الصياغة النهائية كشوائب المتبقية المحتملة.
      3. اختيار المواد الكيميائية الوحيدة المتوفرة تجارياً بدرجة نقاء عالية (جامعة جنوب المحيط الهادئ أو Ph.Eur. الصف المطلوب) وهي مزودة بشهادة التحليل.
    2. تحسين نظام توليف إذا أي المواد الكيميائية غير المرغوب فيها أو المذيبات يتم الكشف عنها بتحليل المخاطر وتكرار المقطع 1.1 حتى لا تبقى.
  2. أتمتة البروتوكول التوليف
    1. إذا تم إنشاء بروتوكولا الآلي للتتبع باستخدام مركب نفس الفعل وتحميلها إلى مستودع على إنترنت، تحميل نسخة من البرنامج التجميعي.
    2. إذا كان برنامج تجميع الآلي غير موجود مسبقاً، إنشاء واحد.
      1. باستخدام الورق والقلم، تقسيم التوليف اليدوي إلى خطوات رفيعة المستوى (مثل التجفيف/تفعيل فلوريد [18و]، تدفئة لتسهيل فعل الكيمياء الإشعاعية، القيام خطوة التنقية، إلخ.). كذلك كسر الخطوات رفيع المستوى إلى منفصلة، العمليات الأساسية المطلوبة. على سبيل مثال، مخطط توليف [18و] فرنكات الجماعة المالية الأفريقية ويرد في الشكل 1، وتحديد الخطوات رفيع المستوى هو مبين في الشكل 2 ألف، والانهيار في عمليات ويبين الشكل 2.
      2. باستخدام الورق والقلم، تعيين كل عملية على عمليات الوحدة الفردية المقدمة من البرنامج المزج. على سبيل مثال، تحليلاً لرسم خرائط للعمليات الأساسية في تركيب [18و] فرنكات الجماعة المالية الأفريقية لعمليات وحدة مناسبة في البرمجيات المزج13 هو مبين في الشكل 2.
      3. استخدام واجهة برمجة راديوسينثيسيزير، إنشاء برنامج فارغ وإلحاق كل عملية من عمليات الوحدة التي تم تحديدها في تسلسل بالنقر على زر القائمة (أعلى اليسار) وتحديد تسلسل، ثم النقر الجديدة تسلسل زر. لكل عملية الوحدة المحددة في الخطوة 1.2.2.2، اسحب العملية وحدة من العمليات المتاحة إلى عرض شريط مصور وانقر فوق أو اكتب ملء القيمة المطلوبة لكل معلمة للعملية وحدة. ويبين الشكل 3 مثال على الواجهة عند جميع عمليات توليف [18و] قد تم ملؤها فرنكات الجماعة المالية الأفريقية، وقام المستخدم بتحديده أول وحدة الرد عملية لتحرير قيم المعلمة. البرنامج التجميعي النهائي ل [18و] ويرد فرنكات الجماعة المالية الأفريقية في المواد التكميليةو الجداول S1 S2.
    3. التحقق من البرنامج التجميعي.
      1. إجراء تشغيل الجاف. إنشاء وتشغيل البرنامج كما هو الحال في الخطوات 2، 1-2-3، باستخدام جميع الكواشف والمواد المذيبة خلاف النويدات المشعة (مثلاً [18و] فلوريد) للتحقق من السلوك المتوقع.
      2. إذا لزم الأمر، قم بضبط القيم المعلمة العملية وحدة في البرنامج (مثلاً، الوقت أو الضغوط الدافعة تماما نقل كاشف، الوقت/درجة الحرارة إلى تتبخر المذيبات إلى المستوى المطلوب، إلخ)، والاختبار. لضبط قيم المعلمة، أولاً، العودة إلى وضع التحرير باختيار تسلسل من القائمة الرئيسية (أعلى اليسار) وحدد البرنامج الذي تم إنشاؤه حديثا. بعد ذلك، انقر فوق تشغيل الوحدة المنشودة في عرض شريط مصور (أسفل الشاشة)، انتقل إلى المعلمة المطلوبة، وحدد أو اكتب القيمة الجديدة.
    4. أداء منخفض-نشاط (370 < مبق) تشغيل اختبار لتقييم البرنامج.
      1. تحسين التجميع الآلي عن طريق ضبط القيم المعلمة لتحسين العائد والوقت التوليف والتكرار وأي نتيجة أخرى قابلة للقياس المطلوب.
  3. تطوير مراقبة الجودة (QC) إجراءات الاختبار
    1. استخدام مرجع غير مشعة للمنتج النهائي، وعينات من الشوائب الكيميائية المحتملة، وضع إذاعة تحليلية-[هبلك] و/أو راديو رقيقة الطبقة اللوني (راديو-TLC) أسلوب مع فصل كافية من الأنواع لتحديد نقاء الكيميائية والنشاط المولى ونقاء الكيمياء الإشعاعية وهوية الكيمياء الإشعاعية. التحقق من صحة أساليب تحليلية للتكرار والخطي وتحديد حدود الكشف والتحديد الكمي.
    2. وبالمثل، تطوير والتحقق من صحة طريقة الفصل لوني للغاز لتحليل الشوائب المتطايرة (مثلاً، المبالغ المتبقية من المذيبات المستخدمة أثناء التوليف).
    3. تطوير والتحقق من صحة الاختبارات التحليلية التي تسمح بالكشف والتحديد الكمي للشوائب المحتملة الأخرى (مثلاً، كريبتاند 222 عن طريق اختبار بقعة الألوان القياسية).
    4. استخدام إجراءات معيارية لتحديد العقم والأس الهيدروجيني وهوية راديونوكليديك، ونقاء راديونوكليديك، تركيز النشاط الإشعاعي، حجم المنتج ومستويات الذيفان.
  4. إجراء التحقق من صحة التوليف
    1. وضع إجراءات تشغيل موحدة (الموحدة) للتوليف وإجراءات الاختبار ومراقبة الجودة ودمج مواد وتصنيع معدات تتبع نظام متوافق مع حسن الحالي متطلبات الممارسة (المركب).
    2. التحقق من صحة الإجراءات التوليف عبر ثلاثة مستقلة ومتتابعة إنتاج يعمل بنفس مستويات النشاط الإشعاعي كما مخصصة للتصنيع السريرية بعد في إجراءات التشغيل الموحدة. الوثيقة توليف أداء ونتائج الاختبار ومراقبة الجودة.
    3. تشغيل التحقق من الصحة على التوالي جميع يجب أن تجتاز حدود مراقبة الجودة المحددة مسبقاً. إذا كان تشغيل التحقق من صحة فشل، تكرار عملية التحقق من الصحة كله بعد الأنسب معالجة السبب الجذري لعدم.

2. على سبيل المثال: الآلي التوليف من فرنكات الجماعة المالية الأفريقية [18و] للاستخدام السريري

  1. تعد راديوسينثيسيزير
    1. السلطة على راديوسينثيسيزير.
    2. ضمان الإمداد بالغاز الخامل يتم تشغيله مع الضغط كافياً وأن الصمامات اللازمة تكون مفتوحة حيث راديوسينثيسيزير متصل بإمدادات الغاز.
    3. تثبيت جديد من أشرطة الكاسيت المتاح في مفاعل #1 و #2 مواقف وإدراج رد فعل الأوعية التي تحتوي على أشرطة مغناطيسية ضجة. التأكد من أن كل أنبوب تراجع نقل كاسيت يشير إلى أسفل.
    4. إعداد كاشف القنينات وتثبيتها في الأشرطة وفقا للمخطط في الشكل 4.
    5. تثبيت فارغة [18س] ح2س الانتعاش القنينة في موقف كاسيت #1 W1 .
    6. تنشيط خرطوشة ميثيلامونيوم رباعي (قما) بأول تمرير 12 مل حل 1 م3 كهكو من خلال ذلك، تليها 12 مل مياه. شرط خرطوشة والسليكا سبتمبر-باك بتمرير 5 مل خلات الإيثيل من خلال ذلك.
    7. الاتصال الخراطيش وجعل كافة اتصالات أنابيب كاسيت كما هو موضح في الشكل 5 ألف. تحقق من أن لا أنابيب كاسيت (بما في ذلك أنابيب غير مستخدمة) معلقة في الداخلية، حيث أنها قد تتداخل مع حركات الروبوتية.
    8. قم بتوصيل خط مصدر الفلوريد [18و] من سيكلوترون فلوريد [18و] خط الإدخال في كاسيت #1.
    9. تأكد من حاوية النفايات فارغة. خطوط مكان النفايات من النظام الفرعي لتنقية/الصياغة إلى حاوية النفايات (أي، عينة حلقة 1 خط النفايات، [هبلك] نظام فرعي النفايات الخط، والمحاقن مضخة النفايات الخط).
    10. توصيل خطوط الإدخال [هبلك]. المرحلة المحمول [هبلك] مكان إدخال سطر "A" في حاوية من خلات الأمونيوم 25 مم و [هبلك] المرحلة المتنقلة سطر الإدخال "B" في حاوية EtOH.
    11. حجته بتنقية/صياغة النظام الفرعي والعمود [هبلك].
      1. افتح صفحة التحكم لوحدة تنقية/صياغة في البرنامج عن طريق تحديد [هبلك] من القائمة الرئيسية (أعلى اليسار). بشكل افتراضي، علامة التبويب تنقية سيتم تحديدها بالفعل. (هذه الصفحة يظهر في الشكل 6).
      2. تعيين معدل التدفق إلى 5.0 مل/دقيقة في تشكيل المذيبات المحددة واختر موضع العمود الذي يتم تثبيت العمود تنقية في. قم بتشغيل المضخة [هبلك] في وضع إيسوكراتيك لمالا يقل عن 10 دقيقة.
      3. شطف خط الإنتاج وجميع خطوط جمع الكسر مع المرحلة المتنقلة، كل منهما لمدة 1 دقيقة.
      4. شطف كل حلقة [هبلك] عينة وعينه [هبلك] حلقة نقل الأنابيب مع 10 مل المرحلة المتنقلة باستخدام المحاقن.
    12. توصيل حقنه مضخة تنقية/صياغة النظام الفرعي إدخال خطوط. يتركز استخدام كلوريد الصوديوم (90 ملغ/مل) لخط الوتي والمالحة 0.9% لبند إعادة تشكيل .
    13. رئيس الوزراء صياغة النظام الفرعي.
      1. انتقل إلى علامة التبويب إعداد الصفحة مراقبة تنقية/الصياغة.
      2. لرئيس الوزراء كلوريد الصوديوم المركزة (90 ملغ/مل)، حدد علامة التبويب الوتي الصحافة تهيئة لتهيئة المضخة حقنه. الاستغناء عن 5 مل.
      3. لرئيس الوزراء المياه المالحة 0.9%، حدد مل 5 الاستغناء عن علامة التبويب إعادة تشكيل .
    14. توصيل خطوط المنتج ، و المنتج النهائي من الجزء الأمامي من النظام الفرعي لتنقية/الصياغة في اتصال T. قم بتوصيل الناتج من T-الاتصال عامل تصفية عقيمة (0.22 ميكرومتر) الذي، بدوره، متصلاً بالقنينة المنتج النهائي العقيمة. أدخل إبرة تنفيس مع عامل تصفية عقيمة في headspace القنينة المنتج النهائي. ويبين الشكل 5Bصورة فوتوغرافية لتركيب النظام النهائي.
    15. إضافة الثلج الجاف و EtOH أو ميوه إلى فخ الباردة.
  2. قم بتشغيل برنامج توليف
    1. انتقل إلى قائمة البرامج بتحديد تسلسلات من زر القائمة الرئيسية (أعلى اليسار). حدد البرنامج فرنكات الجماعة المالية الأفريقية [18و] وبدء تشغيل البرنامج عن طريق الضغط على الزر " تشغيل ".
    2. عناية تذهب من خلال كل عنصر في قائمة ما قبل التشغيل والتحقق منها كما استكمالها. ويرد جزء من الشاشة قائمة التشغيل مسبقاً في الشكل 7.
    3. اضغط متابعة للتأكد من اكتمال الإعداد ويسبب التجميع الآلي للبدء.
      1. إذا رغبت في ذلك، رصد التقرير التوليفي في الوقت الحقيقي عن طريق الملاحظات المرئية (كاميرات مفاعل) وقراءات جهاز الاستشعار (مثلاً، درجة الحرارة، والضغط، والفراغ، القراءة الإشعاع، إلخ) وأجهزة ضبط وقت العد التنازلي. ويبين الشكل 8لقطة تمثيلية.
      2. أثناء تشغيل وحدة تنقية ، حدد المنتج عند ذروة المنتج وقد بدأت تظهر في chromatogram للكشف عن الإشعاع. لقطة ممثل أثناء هذه العملية وحدة (إخراج يتضمن chromatogram كاشف الأشعة فوق البنفسجية والكشف عن الإشعاع) ويرد في الشكل 9.
      3. مرة واحدة قد عاد ذروة chromatogram للكشف عن الإشعاع لخط الأساس، حدد النفايات إلى تحويل مسار تدفق النظام الفرعي [هبلك] إلى حاوية النفايات.
  3. إعداد وتشغيل برنامج إعداد
    1. من قائمة البرامج (تسلسل الشاشة)، فتح [18و] "صياغة فرنك" البرنامج.
    2. قم بتعديل معالم عملية صياغة وحدة.
      1. حساب حجم الكسر المنتج التي تم جمعها (Vالكسر) استناداً إلى معدل تدفق المضخة [هبلك] ومدة جمع الكسر.
      2. حساب حجم إضافي كلوريد الصوديوم (90 ملغ/مل) المطلوبة لتحقيق isotonicity وحساب كمية المياه المالحة الإضافية المطلوبة لتخفيف تركيز EtOH أقل من 10%.
      3. قم بتعديل البرنامج مع هذه القيم. يتم إدخال حجم كلوريد الصوديوم (90 ملغ/مل) للخطوة الوت ويتم إدخال حجم المياه المالحة لخطوة إعادة تشكيل . (الحسابات موصوفة في المواد التكميلية، S2 الشكل).
      4. حفظ البرنامج.
    3. قم بتشغيل البرنامج. سوف يضعف النظام الكسر المنتج المنقي جمعها مع كلوريد الصوديوم والمياه المالحة ضمان isotonicity الصياغة وتسليم من خلال عامل تصفية تعقيم إلى القنينة المنتج عقيمة.
  4. جمع صيغ [18و] فرنكات الجماعة المالية الأفريقية لمراقبة الجودة والشحن
    1. إزالة المنتج وضعت [18و] فرنكات الجماعة المالية الأفريقية من الخلية الساخنة.
    2. باستخدام تقنيات العمل العقيمة، سحب عينتين (300 ميليلتر) إجراء اختبارات مراقبة الجودة.
    3. استخدام النموذج الأول لاختبار عقم الصياغة النهائية بتطعيم السوائل ثيوجليكولاتي وسائل الإعلام ومرق الصويا تريبتيك ل 14 (د) دون التقيد بأي نمو.
    4. استخدام النموذج الثاني لإجراء مراقبة الجودة وفقا للإجراءات التي وضعت في الخطوة 1، 3. يرد أدناه وصف الإجراءات المقررة في "جامعة كاليفورنيا أهمانسون مرفق سيكلوترون الطبية" وفقا "دستور الولايات المتحدة".
      1. تقييم المظهر عن طريق التفتيش البصري.
      2. تقدير درجة الحموضة مع ورقة مؤشر.
      3. تقييم محتوى الذيفان الجرثومي استخدام الحركية اللونية البكتيرية الذيفان الاختبار (رهان).
      4. تقييم الهوية الكيمياء الإشعاعية مع راديو التحليلية-[هبلك] عن طريق التحقق من شطف المشارك العينة المشعة وغير مشعة إشارة مجمع.
      5. تقييم نقاوة الكيمياء الإشعاعية مع راديو التحليلية-[هبلك] بمقارنة المنطقة تحت المنحنى (AUC) من الشوائب المشعة في chromatogram غاما-كاشف مع/أوك/المقابلة للمنتج المطلوب.
      6. تقييم نقاء الكيميائية مع تحليلية [هبلك] بواسطة تحديد أوك في chromatogram الأشعة فوق البنفسجية-كشف جميع الأشعة فوق البنفسجية-نشطة الشوائب.
      7. تقييم نشاط المولى وكتلة الناقل مع راديو التحليلية-[هبلك] بواسطة تحديد أوك المقابلة للمنتج المطلوب في chromatogram كشف الأشعة فوق البنفسجية.
      8. تقييم فترة نصف العمر للمسبار بقياس نشاطها في اثنين تيميبوينتس مختلفة وتركيب منحنى اضمحلال.
      9. تقييم محتوى المذيبات المتبقية من الصياغة الفصل اللوني للغاز.
      10. تقييم الطاقة النويدات المشعة باستخدام مطياف أشعة غاما.
      11. تقييم المحتوى كريبتاند 222 باستخدام اختبار بقعة على أساس "tlc".
    5. في حالة نجاح كافة الاختبارات، الإفراج عن وضع مسبار لشحنها إلى موقع التصوير السريري.
  5. بعد تشغيل النظام وإيقاف التشغيل
    1. شطف العمود تنقية [هبلك] وجميع الأنابيب المستخدمة لجمع المنتج مع 70% (v/v) EtOH في المياه. ينبغي أن يتم هذا بالصفحة الصرفة/نموذج "مراقبة"، مماثلة لخطوة 2-1-12.
    2. إيقاف راديوسينثيسيزير عن طريق زر الطاقة على البرمجيات. وسوف تشير إلى نافذة منبثقة عندما يمكن إيقاف تشغيل الطاقة للنظام.
    3. إيقاف إمدادات الهواء المضغوط وغاز خامل بإغلاق الصمامات منع تسرب المناسبة.
    4. السماح بوقت للنشاط الإشعاعي المتبقي في الخلية الساخنة إلى الاضمحلال (عادة ما بين عشية وضحاها).
  6. تنظيف في راديوسينثيسيزير
    1. إزالة والتخلص من جميع الأشرطة وخراطيش وقارورة من المفاعل وكاشف القوارير المستخدمة خلال التوليف.
    2. إفراغ محتويات فخ الباردة.
    3. تنظيف مسارات النظام الفرعي لتنقية السوائل.
      1. فتح برنامج تنظيف موجود أو إنشاء برنامج جديد الذي يحتوي على تنقية وحدة عملية واحدة في تنظيف الوضع (أي، مع تحديد خانة الاختيار Clean ). انظر المواد التكميلية، S9 الشكل على سبيل مثال.
      2. على صفحة تكوين معلمة، حدد العمود الذي تم استخدامه للتنقية وخط الإدخال [هبلك] المرحلة المحمول متصل بزجاجة تحتوي على 70% EtOH في المياه. برنامج معدل تدفق 2 مل/دقيقة ومدة شطف لكل حلقة الحقن لمدة 5 دقائق، ومدة شطف لكل ناتج المنتج وجزء بسيط من 30 س. حدد الخطوط الجافة وبرنامج مدته 30 ثانية.
      3. ضع جميع النواتج خط الكسر في حاوية نفايات كبيرة.
      4. قم بتشغيل البرنامج.
      5. بعد الانتهاء، قم بإفراغ حاوية النفايات.
    4. تنظيف مسارات السوائل صياغة النظام الفرعي.
      1. فتح برنامج موجود أو إنشاء برنامج جديد الذي يحتوي على صياغة وحدة عملية واحدة في تنظيف الوضع (أي، مع تنظيف خانة الاختيار المحدد ضمن علامة التبويب تنظيف ). انظر المواد التكميلية، الرقم S10 على سبيل مثال.
      2. ملء خزان تمييع نظيفة (في الجزء الأمامي من النظام الفرعي لتنقية/صياغة) مع 100 مل EtOH.
      3. وضع النظام الفرعي تنقية/صياغة خط الإدخال الوت في خزان EtOH (التي تحتوي على > 50 مل EtOH).
      4. ضع الأسطر الإدخال الشطف و إعادة تشكيل في حاوية نفايات جنبا إلى جنب مع خط إنتاج المنتج النهائي.
      5. قم بتشغيل البرنامج.
      6. بعد الانتهاء، قم بإفراغ حاوية النفايات.

Representative Results

طريقة لأتمتة الإنتاج [18و] ووضعت فرنكات الجماعة المالية الأفريقية وتم توليفها ثلاث دفعات التحقق من الصحة. التوليف وتنقيتها، وصياغة [18و] فرنكات الجماعة المالية الأفريقية قد تحقق في 90 ± دقيقة 5 (n = 3) وكان العائد الكيمياء الإشعاعية غير تسوس تصحيح 8.0 ± 1.4% (n = 3). وكانت عائدات النشاط تشغيل ثلاثة 3.24 جبق و 2.83 جبق و 3.12 جبق، بدءاً من 34.3 جبق وجبق 41.8 41.1 جبق، على التوالي. الصيغ التي تم الحصول عليها [18و] فرنكات الجماعة المالية الأفريقية مرت جميع اختبارات مراقبة الجودة (الجدول 1). البروتوكول الآلي يستخدم حاليا لإنتاج السريرية الصف [18و] فرنكات الجماعة المالية الأفريقية لدعم التجارب السريرية.

بيانات مراقبة الجودة التحقق من صحة تشغيل 1 التحقق من صحة تشغيل 2 التحقق من صحة تشغيل 3
[شرط "تمرير"]
المظهر تمرير تمرير تمرير
[واضحة، عديم اللون، وخالية من الجسيمات]
تركيز النشاط الإشعاعي في ايوس مبق 213/mL مبق 210/mL مبق 180/mL
[≤ 740 مليلتر مبق @ ايوس]
الأس الهيدروجيني 6 5.8 6
[5.0-8.0]
فترة نصف العمر 115 دقيقة 108 دقيقة 112 دقيقة
[105-115 دقيقة]
نقاء الكيمياء الإشعاعية 99 ٪ 99 ٪ 99 ٪
[> 95%]
الهوية الكيمياء الإشعاعية بالوقت الاستبقاء النسبي (RRT) 1.01 1.01 1.01
[1.00 < محكمة مراجعة شؤون اللاجئين < 1.10]
النشاط المولى جبق 314/µmol > 370 جبق/µmol > 370 جبق/µmol
[≥ 3.7 جبق/µmol]
الكتلة الإجمالية الناقل في المنتج النهائي 3.1 ميكروغرام < 1 ميكروغرام < 1 ميكروغرام
[≤ 50 ميكروغرام/الجرعة]
كتلة مجموع الشوائب في المنتج النهائي وفيات المواليد وفيات المواليد وفيات المواليد
[≤ 1 ميكروغرام/جرعة]
الحجم الأقصى المسموح به حقن استناداً إلى الناقل الكلي الشامل ≤ 50 ميكروغرام/الجرعة شوائب المجموع الشامل ≤ 1 ميكروغرام/الجرعة الدفعي بالكامل الدفعي بالكامل الدفعي بالكامل
المتبقية EtOH المحتوى بواسطة GC 8.90% 9.50% 9.60%
[≤ 10%]
المتبقية EtOAc المحتوى بواسطة GC < 1 جزء في المليون < 1 جزء في المليون < 1 جزء في المليون
[≤ 5000 جزء في المليون]
المحتوى ميكن المتبقية بواسطة GC < 1 جزء في المليون < 1 جزء في المليون < 1 جزء في المليون
[≤ 410 ppm]
K222 المتبقية من اختبار الألوان الموضعية تمرير تمرير تمرير
[< 50 ميكروغرام/مل]
اختبار سلامة غشاء التصفية تمرير تمرير تمرير
[فقاعة psi 50 ≥ نقطة]
اندوتوكسينس البكتيرية تمرير تمرير تمرير
[≤ 175 دفعة/الاتحاد الأوروبي]
نقاء راديونوكليديك طريق مطيافية أشعة غاما تمرير تمرير تمرير
[> 99.5%]
العقم تمرير تمرير تمرير
[تلبية متطلبات جامعة جنوب المحيط الهادئ < 71 >]

الجدول 1: ملخص لثلاث دفعات من التحقق من صحة بيانات اختبار مراقبة الجودة (QC). توسعة = نهاية القصف؛ ايوس = نهاية التوليف؛ ND = غير المكتشفة.

Figure 1
رقم 1: مخطط راديوسينثيسيس فرنكات الجماعة المالية الأفريقية [18و]. MMT = مونوميثوكسيتريتيل. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

Figure 2
رقم 2: ترجمة توليف يدوي إلى تسلسل الآلي لعمليات الوحدة. (أ) هذا الفريق يعطي لمحة عامة عن الخطوات رفيعة المستوى في التوليف اليدوي [18و] فرنكات الجماعة المالية الأفريقية. (ب) هذا الفريق يوضح الإجراءات الأساسية اللازمة لأداء كل خطوة من الخطوات رفيعة المستوى. (ج) يتم عرض عمليات الوحدة الخاصة راديوسينثيسيزير المستخدمة لتنفيذ الإجراءات الأساسية كبطاقات. كل عملية وحدة لديها المجموعة قيم المعلمة (تظهر كما أكد) التي تم تكوينها من خلال البرنامج. التدوين "R1" و "R2" تشير إلى أوعية التفاعل #1 و #2، على التوالي. يتم تعريف الكواشف تناظر الأرقام الكاشف في الشكل 4. يتم حفظ تسلسل سلسلة عمليات وحدة وينفذها البرنامج القيام بالتجميع الآلي. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

Figure 3
الشكل 3: لقطة واجهة البرنامج راديوسينثيسيزير (أليكسيس) إنشاء برنامج توليف. يتم وضع وحدة العمليات بالترتيب المرغوب في شريط مصور باستخدام واجهة السحب والإفلات. في هذه الصورة، يتم تحديد عملية وحدة الرد ، وتظهر قيم المعلمة للتحرير في الجزء الرئيسي من الشاشة. في هذا المثال، ستنفذ رد فعل الفلورة في وعاء التفاعل #1 (مختومة) عند 120 درجة مئوية لمدة 10 دقائق مع التحريك النشط. تبريد السفينة إلى 35 درجة مئوية في بعد انقضاء وقت رد الفعل. وترد تفاصيل من قيم المعلمات التي يمكن برمجتها لعمليات أخرى للوحدة في المواد التكميلية، الباب 3. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

Figure 4
الشكل 4: لقطة للشاشة تكوين كاشف. للتسلسل توليف [18و] فرنكات الجماعة المالية الأفريقية، يتم تحميلها جميع الكواشف في الكاسيت المتاح #1، الذي يظهر مميزاً في مجال اختيار العنصر. لتوليف فرنكات الجماعة المالية الأفريقية [18و] الموصوفة هنا، الوينت mg 1.0 ك2CO3 + 5.0 ملغ K222 في 0.4 مل ح2O/0.5 مل من ميكن، السلائف 6 مغ سلائف فرنكات الجماعة المالية الأفريقية في 0.6 مل ميكن، و المرحلة المحمول [هبلك] 85:15 v خلات الأمونيوم 25 مم/v: الإيثانول. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

Figure 5
الشكل 5: إنشاء راديوسينثيسيزير لتركيب [18و] فرنكات الجماعة المالية الأفريقية. (أ) هذا تخطيطي إظهار مسارات السوائل كاسيت واتصالات لخراطيش والاتصال لنقل المنتج النهائي الخام من الوحدة النمطية راديوسينثيسيس إلى وحدة تنقية/الصياغة. (يتم التحكم كلتا الوحدتين مع واجهة واحدة على جهاز الكمبيوتر والبرمجيات). (ب) هذا صورة فوتوغرافية راديوسينثيسيزير داخل خلية ساخنة بعد إعداد لتوليف فرنكات الجماعة المالية الأفريقية [18و]. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

Figure 6
رقم 6: لقطة واجهة التحكم وحدة تنقية/وضع- يتم الوصول إلى هذه الشاشة بالمشغل للتحكم يدوياً في النظم الفرعية [هبلك] وصياغة أثناء الإعداد التوليف. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

Figure 7
رقم 7: شاشة قائمة ما قبل التشغيل- المشغل بإدخال الرقم التسلسلي للأشرطة المثبتة في النظام ويجب التحقق من كل عنصر لضمان تم تكوين النظام بشكل صحيح وإعداده للتقرير التوليفي. وبالإضافة إلى هذه الأقسام، يتم مطالبة المشغل أيضا اسماً ووصفاً للتوليف (القسم 1) تشغيل والكثير أرقام لكل الكواشف المستخدمة (القسم 2) وهو طلب للتحقق من جميع المفاعلات تغذيات الفيديو تعمل بشكل صحيح (المادة 6). الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

Figure 8
الشكل 8: لقطة شاشة لبرنامج راديوسينثيسيزير أثناء تشغيل تسلسل توليف فرنكات الجماعة المالية الأفريقية [18و]. يعرض البرنامج بالترتيب لعمليات الوحدة في منطقة شريط الصور. العمليات المنجزة اللون الرمادي وأبرزت في الأبيض وهو أبرز العملية الحالية في الرمادي، والعمليات القادمة تظهر باللون الرمادي الداكن. منطقة وسط الشاشة يظهر حالة العملية وحدة نشطة، بما في ذلك يتم تنفيذ الأمر الفرعي فيها، فضلا عن حالة النظام الحالي (مفاعل تغذيات الفيديو وبيانات الاستشعار). هذا الرد خاص العملية وحدة هو رد فعل الفلورة. في مجال درجة الحرارة ، درجة حرارة المفاعل الحالي يظهر بجوار درجة الحرارة المستهدفة (المبرمجة). أدناه، وهذا مجال النشاط يعرض القيم استشعار الإشعاعات من ثلاثة أجهزة الاستشعار المقترن بالخطوة رد فعل. وأخيراً، أظهر شريط فيديو آر على اليسار عرض لايف القنينة المفاعل. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

Figure 9
الشكل 9: لقطة واجهة المستخدم راديوسينثيسيزير أثناء تشغيل تشغيل وحدة تنقية خلال التوليف [18و] فرنكات الجماعة المالية الأفريقية. كشف "الأشعة فوق البنفسجية" والإشعاع للكشف عن النواتج لوحدة تنقية/صياغة يتم عرضها في الرسم البياني المركزية في الوقت الحقيقي. وترد تعليقات إضافية من أجهزة الكشف ومضخة [هبلك] على الجانب الأيمن من الشاشة. يجمع المشغل ذروة المنتج عن طريق تحديد المنتج مؤقتاً عندما تبدأ الذروة لتظهر وثم التبديل إلى النفايات بعد أن شهدت ذروة كاملة. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

Discussion

ويحدد هذا البروتوكول الخطوات الأساسية التي ينبغي اتخاذها عند أتمتة بروتوكول توليف يدوي لتحقيق إنتاج صياغة الراسم الصف السريرية. ويتمثل في دورة التنمية برمتها، بما في ذلك تطوير مراقبة الجودة، راديوتراسير [18و] فرنكات الجماعة المالية الأفريقية (لتصوير نشاط dCK). تم إيلاء اهتمام خاص لتعديل التجميع الآلي لضمان ملاءمتها للتتبع للاستخدام السريري. التوليف ويستتبع العمليات الأساسية مثل التنشيط [18و] فلوريد، راديوفلورينيشن جزيء السلائف وتنقية خرطوشة المتوسطة، وإزالة حماية المجموعة، وشبه محضرة تنقية [هبلك] وصياغة للحقن. وتشمل هذه العمليات الأساسية مرجع قياسي غير كافية لتوليف للغالبية العظمى من تتبع 18المسمى و الحيوانات الأليفة.

أثناء تصميم التقرير التوليفي، اختيار الكواشف وضمان الجودة أهمية خاصة للاستخدام السريري. ضمان البرمجة الصحيح والسليم اتصالات عن طريق إجراء توليف صورية (المذيبات فقط) لا بد من القضاء على أخطاء غير متوقعة عند إجراء عملية التوليف مع النشاط الإشعاعي. أمثلية الأداء التوليف اللاحقة (المذيبات ووحدات التخزين، والمبالغ، ودرجات الحرارة، أوقات رد الفعل وظروف تنقية) يعتمد على التتبع الحيوانات الأليفة محددة في مجال التنمية. خلال هذه التجارب، أن أشرق التركيز بصفة خاصة على نقاء المنتج النهائي الذي يمكن أن يتحقق، الكيميائية والكيمياء الإشعاعية كهذه يجب أن تلبي المتطلبات الصارمة للاستخدام السريري. توليفة موثوق بها وتنتج منتج نقي في مردود نشاط أقل ولكنها كافية يفضل عادة خلال عملية أعلى غلة أن ينطوي على خطر أن تفشل بشكل متقطع. بمجرد تم التوليف الأمثل على نحو كاف، يحتاج العملية النهائية للخضوع لاختبارات التحقق من الصحة (متطلبات تنظيمية) لضمان ملاءمة السريرية. ثم يمكن استخدام أسلوب التوليف المصادق عليها لإنتاج الحيوانات الأليفة التتبع للاستخدام السريري. عند تجميع الراسم الحيوانات الأليفة وفقا لأسلوب تم التحقق من صحتها، ينبغي اتباع إجراءات التشغيل الموحدة جيدا. لضمان الامتثال، تمت برمجة البرنامج أن يكون المشغل تأكيد الانتهاء من الخطوات الرئيسية عن طريق قائمة تشغيل مسبقاً بعد النقر فوق تشغيل لبدء التوليف. بينما سوف تؤدي النظام التوليف بطريقة إليه، خطوة التنقية تتطلب تدخل يدوي. المشغل يجب، لذلك، عن كثب مراقبة الشاشة الكروماتوغرافي أثناء الخطوة تنقية [هبلك]، وإدخال يدوياً في الوقت الحقيقي عندما لبدء وإيقاف جمع الكسر الناتج.

ضمن جهودنا الأتمتة والتحسين لتوليف فرنكات الجماعة المالية الأفريقية [18و]، يمكننا تبسيط طريقة تنقية [هبلك] شبه محضرة من خليط المنتج باستخدام نظام المذيبات حقن يتألف من حل خلات الأمونيوم و EtOH ; لدينا الطريقة السابقة يتطلب خطوة إضافية لتبادل المذيب بعد تنقية16. عملية صياغة اللاحقة، وبالتالي، يحتاج فقط إلى خفض محتوى EtOH الكسر التي تم جمعها المستويات المسموح بها، وضمان لها isotonicity، اللذين يمكن أن ينجزه تمييع. الخطوة صياغة أجرى باستخدام برنامج ثان يتألف من عملية صياغة وحدة واحدة للسماح إضافات حجم متغير من كلوريد الصوديوم-حلول للمنتج المنقي الكسر عن طريق وضع الوحدة النمطية لحساب المتغير وحدة التخزين التي تم الحصول عليها بعد تنقية [هبلك]. إذا تم تعيين حجم الكسر المنتج التي تم جمعها تكون ثابتة بدلاً من ذلك، يمكن إدراج عملية صياغة وحدة في برنامج توليف الرئيسية، وتجنب الحاجة إلى برنامج مستقل. سيكون نهج بديل لتجنب التدخل اليدوي استخدام الوظائف الكاملة لوضع الوحدة النمطية (مثلاً، يضعف الراسم تنقية المياه، اعتراض على كارتريدج استخراج الصلبة-المرحلة C18، غسله، الوتي أنه مع وجود حجم ثابت من EtOH ، وأخيراً، تمييع بحجم ثابت من المياه المالحة).

هذه التقنية المقدمة هنا لأتمتة والتحقق من صحة بروتوكول توليف للاستخدام السريري المقصود أن تكون عامة جداً. عن طريق اختيار راديوسينثيسيزير (أليكسيس)، يمكن الآلي طائفة واسعة من التوليفات والتحقق من صحتها. وهذا يشمل معقدة 3-وعاء التوليفات، أو التوليفات التي تنطوي على درجات حرارة عالية للمذيبات المتطايرة. ويمكن تحقيق الاستفادة المثلى من توليفة بتغيير المعلمات للبرنامج. المزج سمات لرصد تأثير التغييرات، مثل أوعية التفاعل لإزالة عينات لتحليل TLC إذاعة أو راديو-[هبلك] لتحديد المواقع. ومع ذلك، دون تعديلات النظام، النظام لا تسمح حاليا للتعامل مع وحدات التخزين كاشف منخفضة جداً (~ 5-20 ميليلتر) أو تقطير المنتجات الوسيطة أو المعالجة [18و] ألف، 68Ga، أو راديوميتالس أخرى. إذا كان التجميع اليدوي الآلي يحتوي على مثل هذه الخطوات، وأنها لا يمكن التحايل عليها، التشغيل الآلي للمكاتب والتحقق من صحة مع منصة راديوسينثيسيزير أخرى قد تكون مناسبة.

على الرغم من أن هذا العمل قد ركز على تطوير بروتوكول للإنتاج الآلي [18و] فرنكات الجماعة المالية الأفريقية للاستخدام السريري، توليف كثيرة تتبع الحيوانات الأليفة الأخرى يمكن الآلي بطريقة مناسبة لإنتاج السريرية، عقب نفس المنطق و أساليب. وباتباع الطريقة المعروضة هنا، نحن تكيفت أيضا توليف الآلي 9-(4-[18و] مخفضات-3-[هيدروكسيميثيل] بوتيل) جوانين ([18و] فهبج) والتحقق من أنها للاستخدام السريري. بروتوكولات إنشاء المستخدم يمكن تحميلها وتنزيلها من "الشبكة التحقيق صوفي"، وإنشاء بوابة على الإنترنت لتبادل البرامج التوليف والمرتبطة بها الوثائق بين مواقع مختلفة راديوفارماسي27. هذا يمكن تفادي ازدواجية الجهود في المجتمع وتيسير متعدد مركز الدراسات السريرية التي تشمل تصوير الحيوانات الأليفة.

Disclosures

الحكام من جامعة كاليفورنيا قد ترخيص التكنولوجيا إلى صوفي التي اخترعها جيفري كولينز ومايكل "ر." فإن دام واتخذت الإنصاف في صوفي كجزء من الصفقة الترخيص. وعلاوة على ذلك، "ر." مايكل فإن دام هو مؤسس واستشاري لصوفي. تم استعراض شروط هذا الترتيب وأقرتها جامعة كاليفورنيا، لوس أنجلوس وفقا لسياساته تضارب في المصالح. شوبف إريك كريستوفر دريك والموظفين والمساهمين في صوفي.

Acknowledgments

دعمت هذا العمل تم في الجزء من المعهد الوطني للسرطان (R44 CA216539) ومؤسسة جامعة كاليفورنيا من منحة قدمتها رالف ودمدم مارجوري للمعهد دمدم جامعة كاليفورنيا "التصوير الجزيئي".

Materials

Name Company Catalog Number Comments
ELIXYS FLEX/CHEM Sofie (Culver City, CA, USA) 1010001 Radiosynthesizer
Radiosynthesizer cassette Sofie (Culver City, CA, USA) 1861030400 Cassette for ELIXYS FLEX/CHEM
ELIXYS PURE/FORM Sofie (Culver City, CA, USA) 1510001 Radiosynthesizer purification module
[O-18]H2O IBA RadioPharma Solutions (Reston, VA, USA) IBA.SP.065 >90% isotopic purity
[F-18]fluoride in [O-18]H2O UCLA N/A Produced in a cyclotron (RDS-112; Siemens; Knoxville, TN, USA) by the (p,n) reaction of [O-18]H2O. Bombardment at 11 MeV using a 1 mL tantalum target with havar foil.
Deionized water UCLA N/A Purified to 18 MΩ and passed through 0.1 µm filter
Acetonitrile (MeCN) Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA) 271004 Anhydrous, 99.8%
Ethanol (EtOH) Decon Laboratories, Inc. (King of Prussia, PA, USA) 2701 Anhydrous, 200 proof
Sodium hydroxide (NaOH) solution Merck (Burlington, MA, USA) 1.09137.1000 1M solution
Hydrochloric acid (HCl) solution Fisher Chemical (Hampton, NH, USA) SA48-500 1M solution
Ethyl acetate (EtAc) Fisher Chemical (Hampton, NH, USA) E195SK-4 HPLC grade
Sodium chloride (NaCl) Fisher Chemical (Hampton, NH, USA) S-640-500 USP grade
Ammonium acetate Fisher Chemical (Hampton, NH, USA) A639-500 HPLC grade
Potassium carbonate (K2CO3) Fisher Chemical (Hampton, NH, USA) P-208-500 Certified ACS
CFA precursor CalChem Synthesis (San Diego, CA, USA) N/A Custom synthesis
Cryptand 222 (K222; Kryptofix 2.2.2) ABX Advanced Biochemical Compounds (Radeberg, Germany) 800.1000 >99%
Sodium chloride (NaCl) solution (saline) Hospira (Lake Forest, IL, USA) 0409-4888-02 0.9%, for injection, USP grade
Silica cartridge Waters (Milford, MA, USA) WAT051900 Sep-pak Classic
Quaternary methylammonium (QMA) cartridge Waters (Milford, MA, USA) WAT023525 Sep-pak Light Plus
Sterile syringe filter (0.22 µm) Millipore Sigma (Burlington, MA, USA) SLGSV255F Millex-GV
Glass V-vial (5 mL) Wheaton (Millville, NJ) W986259NG Used for reaction vessels
Septa Wheaton (Millville, NJ) 224100-072 Used for reagent vials
Crimp cap Wheaton (Millville, NJ) 224177-01 Used for reagent vials
Amber serum vial (2 mL) Voigt (Lawrence, KS, USA) 62413P-2 Used for reagent vials
Magnetic stir bar Fisher Scientific (Hampton, NH, USA) 14-513-65 Used for reaction vessels

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Phelps, M. E. Positron emission tomography provides molecular imaging of biological processes. Proceedings of the National Academy of Sciences. 97, (16), 9226-9233 (2000).
  2. Kitson, S., Cuccurullo, V., Ciarmiello, A., Salvo, D., Mansi, L. Clinical Applications of Positron Emission Tomography (PET) Imaging in Medicine: Oncology, Brain Diseases and Cardiology. Current Radiopharmaceuticalse. 2, (4), 224-253 (2009).
  3. Sengupta, D., Pratx, G. Imaging metabolic heterogeneity in cancer. Molecular Cancer. 15, 4 (2016).
  4. Rabinovich, B. A., Radu, C. G. Imaging Adoptive Cell Transfer Based Cancer Immunotherapy. Current Pharmaceutical Biotechnology. 11, (6), 672-684 (2010).
  5. Matthews, P. M., Rabiner, E. A., Passchier, J., Gunn, R. N. Positron emission tomography molecular imaging for drug development. British Journal of Clinical Pharmacology. 73, (2), 175-186 (2012).
  6. Hargreaves, R. The Role of Molecular Imaging in Drug Discovery and Development. Clinical Pharmacology & Therapeutics. 83, (2), 349-353 (2008).
  7. Radiosynthesis Database of PET Probes (RaDaP). Available from: http://www.nirs.qst.go.jp/research/division/mic/db2/ (2017).
  8. 18F-Database of Imaging Radiolabelled Compounds (DIRAC). Centre National de la Recherche Scientifique. Available from: http://www.iphc.cnrs.fr/dirac/ (2013).
  9. Keng, P. Y., Esterby, M., van Dam, R. M. Emerging Technologies for Decentralized Production of PET Tracers. Positron Emission Tomography - Current Clinical and Research Aspects. Hsieh, C. -H. InTechOpen. London, UK. 153-182 (2012).
  10. Lazari, M., Irribarren, J., Zhang, S., van Dam, R. M. Understanding temperatures and pressures during short radiochemical reactions. Applied Radiation and Isotopes. 82-91 (2016).
  11. Lazari, M., et al. ELIXYS - a fully automated, three-reactor high-pressure radiosynthesizer for development and routine production of diverse PET tracers. European Journal of Nuclear Medicine and Molecular Imaging (EJNMMI) Research. 3, (1), 52 (2013).
  12. Claggett, S. B., Quinn, K., Lazari, M., Esterby, J., Esterby, M., van Dam, R. M. A new paradigm for programming and controlling automated radiosynthesizer. Journal of Nuclear Medicine. 53, (suppl. 1), 1471-1471 (2012).
  13. Claggett, S. B., Quinn, K. M., Lazari, M., Moore, M. D., van Dam, R. M. Simplified programming and control of automated radiosynthesizers through unit operations. European Journal of Nuclear Medicine and Molecular Imaging (EJNMMI) Research. 3, 53 (2013).
  14. Lazari, M., et al. Fully Automated Production of Diverse 18F-Labeled PET Tracers on the ELIXYS Multireactor Radiosynthesizer Without Hardware Modification. Journal of Nuclear Medicine Technology. 42, (3), 203-210 (2014).
  15. Lazari, M., et al. Fully-automated synthesis of 16β-18F-fluoro-5α-dihydrotestosterone (FDHT) on the ELIXYS radiosynthesizer. Applied Radiation and Isotopes. 103, 9-14 (2015).
  16. Collins, J., et al. Production of diverse PET probes with limited resources: 24 18F-labeled compounds prepared with a single radiosynthesizer. Proceedings of the National Academy of Sciences. 114, (43), 11309-11314 (2017).
  17. Drake, C., et al. Enzymatic Radiofluorination of Biomolecules: Development and Automation of Second Generation Prosthetic on ELIXYS Radiosynthesizer. Journal of Nuclear Medicine. 58, (supplement 1), 1 (2017).
  18. Gobbi, L. C., et al. Identification of Three Novel Radiotracers for Imaging Aggregated Tau in Alzheimer's Disease with Positron Emission Tomography. Journal of Medicinal Chemistry. 60, (17), 7350-7370 (2017).
  19. Ippisch, R., Maraglia, B., Sutcliffe, J. Automated production of [18F]-F-Py-peptides. Journal of Nuclear Medicine. 57, 275 (2016).
  20. Chen, H., et al. AMG 580: A Novel Small Molecule Phosphodiesterase 10A (PDE10A) Positron Emission Tomography Tracer. Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics. 352, (2), 327-337 (2015).
  21. Waldmann, C. M., et al. An Automated Multidose Synthesis of the Potentiometric PET Probe 4-[18F]Fluorobenzyl-Triphenylphosphonium ([18F]FBnTP). Molecular Imaging and Biology. 20, (2), 205-212 (2018).
  22. Ravert, H. T., et al. An improved synthesis of the radiolabeled prostate-specific membrane antigen inhibitor, [18F]DCFPyL. Journal of Labelled Compounds and Radiopharmaceuticals. 59, (11), 439-450 (2016).
  23. Betthauser, T. J., et al. Characterization of the radiosynthesis and purification of [18F]THK-5351, a PET ligand for neurofibrillary tau. Applied Radiation and Isotopes. 130, 230-237 (2017).
  24. Shu, C. J., et al. Novel PET probes specific for deoxycytidine kinase. Journal of Nuclear Medicine. 51, (7), 1092-1098 (2010).
  25. Kim, W., et al. [18F]CFA as a clinically translatable probe for PET imaging of deoxycytidine kinase activity. Proceedings of the National Academy of Sciences. 113, (15), 4027-4032 (2016).
  26. Barrio, M. J., et al. Human Biodistribution and Radiation Dosimetry of 18F-Clofarabine, a PET Probe Targeting the Deoxyribonucleoside Salvage Pathway. Journal of Nuclear Medicine. 58, (3), 374-378 (2017).
  27. SOFIE. Sofie Probe Network. Available from: http://www.sofienetwork.com/ (2018).

Comments

0 Comments


    Post a Question / Comment / Request

    You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

    Usage Statistics