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DOI: 10.3791/51496-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
一种技术实验室评估中的多氯联苯(PCB)同系物的净营养转换效率从他们的猎物肉食性鱼类呈现。最大化的实验室结果的适用性领域,食鱼鱼应喂是通常食用的字段猎物鱼。
以下实验的总体目标是估计 PCB 同系物从猎物到湖鳟鱼的净营养转移效率,然后确定 PCB 同系物的氯化程度或脂溶度是否对其净营养转移效率有影响。这是通过首先进行实验室实验来实现的,在该实验中,湖鳟鱼在至少四个月的时间里被喂食天然食物,例如 blo。作为第二步,提取和净化用于从湖鳟鱼和 blo 组织中提取 PCB,并为定量程序准备提取物。
接下来,使用使用负化学电离的气相色谱质谱法来确定鱼组织中 PCB 同系物的浓度。结果表明,PCB 同系物从猎物到湖鳟鱼的净营养转移效率不受 PCB 同系物氯化程度的显著影响。结果还表明,湖鳟鱼活动似乎对净营养转移效率没有显着影响。
与现有方法(例如将污染物直接注入 SIV 鱼或 SIV 鱼的食物)相比,该技术的主要优点是 SS 鱼以最能模拟污染物在自然环境中在野鱼中积累的过程的方式积累污染物。该方法的目视演示至关重要,因为浓缩和提取步骤需要非常小心才能正确执行。这些步骤最好通过目视观察来学习。
演示此程序的是我实验室的化学家 Jim O'Keefe。首先解冻之前储存在零下 30 摄氏度冰箱中的适量猎物鱼。用厨师刀将解冻的猎物鱼切成重约 1 至 5 克的块。
在此之后,称量要放入每个水箱中的猎物鱼的数量,然后将碎片放入每个水箱中。让捕食者鱼进食约 1 小时后,取出吃的食物并风干约 20 分钟。称量 une 食物后,记录每个罐中的食物量和每个罐子吃的食物量。
在牺牲和冷冻捕食者鱼后,选择一组捕食者、鱼和/或猎物鱼复合材料进行解冻,并使用适当大小的均质剂让复合材料部分解冻。每个复合体。对于每种复合物,将 50 至 100 克匀浆样品放入清洁、丙酮、冲洗和贴标签的罐子中。
盖上罐子盖后,将其存放在零下 30 摄氏度,直到处理提取时间。在 200 毫升烧杯中称取 20 克解冻的均质鱼组织,然后用大约 40 克硫酸钠称量,用刮刀充分混合。添加含有同系物 30、61、161 和 166 的替代加标溶液,其浓度为最终浓度为 20 ng/mL。
在摘录中。在样品达到干砂稠度后,每 20 分钟混合一次,让样品在室温下干燥。设置一个 soli 提取装置,配备一个 500 毫升烧瓶,里面装有特氟龙煮沸片、袜子、sl 和冷凝器。
然后将鱼干混合物加入带有粗烧结圆盘底部的玻璃顶针中。将 150 毫升 50% 己烷和 50% 氯甲烷的预混溶液加入用于样品的烧杯中,并在刮擦烧杯壁的同时搅拌。用刮刀将溶剂转移到单体顶部,使其循环穿过单体并进入培养瓶。
重复上一步后,将带有连接烧瓶的加热袋放在加热元件上,并连接冷凝器。接下来打开加热元件,使溶剂轻轻沸腾。然后提取溶剂至少 16 小时,确保向冷凝器供应冷水。
溶剂冷却后,检查样品瓶中是否含有水。对于盛水的培养瓶,加入硫酸钠并旋转直至水被吸收。然后,使用氮气样品浓缩器浓缩样品。
样品体积小于 2 mL 后,将样品转移至 5 mL 容量瓶中。然后,使用 5 到 7 次小规模的己烷洗涤,将残留样品从前一个玻璃器皿转移到容量瓶中,使最终体积达到 5 mL。此时,将样品转移到 10 mL 样品瓶中,并用样品信息标记。
在100 克活性硅胶中加入 44 克浓硫酸,制备酸化硅胶。然后将 10 克酸化硅胶加入底部装有一小块玻璃棉的小色谱柱中。用 10 mL 己烷预清洁色谱柱后,向其中加入 1 mL 样品提取物,用 20 mL己烷洗脱色谱柱,然后将样品收集在 20 mL锥形玻璃管中。
接下来,将玻璃管放在氮气蒸发器或 NVAP 装置上,在氮气流下,将其浸入热水中。样品浓缩至 1 mL以下后,将其转移至 1 mL容量瓶中。然后,使用 2 到 3 次小规模的己烷洗涤,将残留样品从试管转移到容量瓶中,使最终体积达到 1 毫升。
然后,将样品转移至标有样品信息的 1.8 mL 自动进样器样品瓶中。向小瓶中加入 4 微升适当的内标,在本例中为 deca 氯茴香。您可以使用适当的标准品来校准仪器。
然后以氢气为载气,以每分钟 1 毫升,甲烷为试剂气体,以负化学电离模式设置色谱质谱系统。使用涂有 0.25 DB XLB 的熔融石英毛细管柱。用于分离的微米薄膜厚度。
使用分流进样模式进样 1 至 2 μL 样品。此时,使用碳 13 标记的 DECA 氯 b 茴香,通过内标方法分析所有标准品和样品。通过运行第二个来源标准品和箭头 Chlor 1242 和 1260 对初始校准进行检查,然后将箭头 Chlor 同系物的预测值与此检查程序中观察到的量进行比较。
成功完成初始校准程序后,完成所有样品的分析。使用初始校准中的任何校准混合物每 10 个样品运行一次校准检查。特雷湖鳟鱼作为最初的湖鳟鱼显示出显着的增长。
平均重量从 694 到 907 克不等,而最终湖鳟鱼的平均重量在 853 到 1, 566 克之间。在实验期间,所有 PCB 同系物在湖鳟鱼中的平均 PCB 同系物浓度均增加。活跃湖鳟鱼的平均净营养转移效率与不活跃的湖鳟鱼没有显著差异。
活性湖鳟鱼从它们食用的食物中保留了 PCB 同系物,在 75 种 PCB 同系物中,有 66 种的效率几乎与非活性湖鳟鱼相同。其他 9 种 PCB 同系物中有 6 种的净营养转移效率平均估计的标准误差很小。关于净营养转移效率的平均估计值的标准误差相当低,因为氯化程度增加,净营养转移效率的估计值显示略有下降。
然而,净营养转移效率不随 PCB 同系物 AS log KOW 氯化程度的增加而发生显著变化,净营养转移效率呈指数下降。这个下降率与零显著不同,但等于每单位对数 KOW 的 7%。看完这个视频后,你应该对如何使用实验室实验来估计 CB 同系物从猎物到鱼的净营养转移效率有了很好的了解,在该实验中,鱼被喂食天然食物。
不要忘记,使用有机溶剂(如己烷和二氯甲烷)可能是危险的,因此在执行此程序时应始终采取预防措施,例如适当的通风。
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