Generation of Defined Genomic Modifications Using CRISPR-CAS9 in Human Pluripotent Stem Cells

Fabian  L. Cardenas-Diaz; Jean  Ann Maguire; Paul Gadue; Deborah L. French

doi:10.3791/60085

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Genetics

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Generation of Defined Genomic Modifications Using CRISPR-CAS9 in Human Pluripotent Stem Cells

在人类多能干细胞中使用CRISPR-CAS9生成定义的基因组修饰

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09:04 min

September 25, 2019

DOI: 10.3791/60085-v

Fabian L. Cardenas-Diaz*¹, Jean Ann Maguire*¹, Paul Gadue^1,2,3, Deborah L. French^1,2,3

¹Center for Cellular and Molecular Therapeutics,The Children's Hospital of Philadelphia, ²Department of Pathology and Laboratory Medicine,The Children's Hospital of Philadelphia, ³Department of Pathology and Laboratory Medicine,University of Pennsylvania

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

该协议提供了一种方法，促进在人类多能干细胞中使用CRISPR-CAS9生成定义的异质核苷酸或同源核苷酸变化。

基因功能和疾病的研究受到人类近亲繁殖性质的阻碍。患者特异性和控制 iPS 细胞系的不同遗传背景会影响给定功能测定中的分化效率和表型。使用基因相同或等基因线，其中唯一的区别是特定的兴趣突变是克服这些问题的关键。

许多人类疾病是由异质突变引起的，这些突变很难用CRISPR-Cas9系统产生。这是因为非靶向等位基因的内德尔突变的产生，这种突变可能以非常高的频率发生。我们的技术克服了这个问题，使用两个修复模板，其中只有一个包含感兴趣的突变。

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