茶叶样品中吡咯里西啶类生物碱污染的来源及途径

开发杂草、土壤、鲜茶叶和干茶样品中15种吡咯里西啶生物碱的检测方法，可为探索茶叶中吡咯里西啶生物碱污染源提供技术支持。与固相萃取相比，土壤样品吸附法对吡咯里西啶生物碱分析可以节省时间、降低成本和更好的回收率。要开始提取预热的干茶产品，新鲜茶叶或杂草，在50毫升离心管中称取1克样品，并向管中加入10毫升每升0.1摩尔的硫酸溶液。

接下来，如果要使用固相萃取分析样品，则涡旋样品两分钟，如果要使用吸附剂净化进行分析，则涡旋一分钟。然后将样品超声提取15分钟，然后在室温下以9， 390 G离心10分钟。然后使用塑料尖端滴管，将上清液转移到50毫升离心管中。

进行两次提取后，将上清液合并管中。要在准备好的土壤上开始提取，请在50毫升离心管中称取一克样品。加入0.1毫升每升0.1摩尔的柠檬酸三钠溶液，将土壤pH值调节至6.0，并让样品静置两分钟。

然后将10毫升每升0.1摩尔的硫酸甲醇溶液加入管中，将样品涡旋两分钟，然后摇动30分钟。接下来，如前所述进行30分钟的超声提取。然后将样品以9， 390 G离心10分钟。

并使用塑料滴管将上清液转移到50毫升离心管中。进行两次提取后，合并上清液。用五毫升甲醇激活固相萃取或SPE滤芯，然后用五毫升去离子水激活。

活化后，将样品提取中的10毫升上清液加入到预活化的柱中。样品溶液液位达到上层柱后，用5毫升1%甲酸溶液洗脱样品基质，然后加入5毫升甲醇，弃去淋洗液。接下来，用含有0.5%氨水的5毫升甲醇洗脱分析物。

通过0.22微米膜过滤器过滤淋洗液，通过UPLC-MS/MS进行分析。要使用吸附剂进行样品净化，请准备一个 10 毫升离心管，吸附剂以 10 至 20 至 15 毫克的比例影响 GCB、PSA 和 C18。然后加入两毫升样品处理后得到的上清液。

接下来，将样品和吸附剂混合物涡旋一分钟，并在室温下以9， 390 G离心8分钟。通过0.22微米膜过滤器将1毫升所得上清液过滤到样品瓶中，然后通过UPLC-MS / MS进行分析。在研究中，与SPE滤芯法相比，使用吸附剂纯化技术从新鲜茶叶，干茶样品和杂草中获得了更高的15种吡咯里西啶生物碱的回收率。

吸附剂纯化土壤中生物碱的回收率为79%-111%在5个采样点采集的鲜茶叶中，检测到的中间N-氧化物含量高于塞尼西奥宁。在一号和二号采样点的成熟叶中未检测到Senecionine。在11种吡咯里西啶生物碱中，土壤中仅检测到中间体N-氧化物，而在茶树的不同部位检测到塞尼西奥宁和中间素N-氧化物。

此外，发现两片叶子的一个芽中中间N-氧化物的含量最高。在第一次尝试时，最重要的是添加0.1毫升每升0.1摩尔的柠檬酸三钠溶液，以将土壤pH值调节到6.0。该方法可应用于其他食用植物中生物碱的分析，也为探索其中生物碱的来源提供了天然技术。