Experimentelles Mausmodell für metastasiertes Melanom: Eine Plattform zur Untersuchung des metastasierenden Potenzials von Melanomzellen in der Lunge

- Experimentelle Metastasenmodelle helfen bei der Bewertung des Potenzials der Tumorzellen, nach intravaskulärer Injektion an bestimmten Stellen zu extravasieren und zu proliferieren. Zu Beginn wird eine einzellige Suspension von Melanomzellen in der gewünschten Konzentration unter Verwendung eines geeigneten Mediums hergestellt. Laden Sie die Suspension in eine Spritze.

Als nächstes hältst du eine Maus in einer Kammer fest und befestigst sie so, dass ihr Schwanz zugänglich ist. Drehen Sie die Maus um 90 Grad, um ihre seitliche Ader zu visualisieren. Verwende eine Wärmelampe, um die Umgebungstemperatur zu erhöhen, um die Schwanzvene zu erweitern. Führen Sie nun die Nadel in Richtung des distalen Endes des Schwanzes ein und injizieren Sie die vorbereitete Melanomzellsuspension in die erweiterte Vene.

Die injizierten metastasierten Tumorzellen wandern durch das Kreislaufsystem. Schließlich extravasieren einige dieser Zellen aus dem Kreislauf in entfernte Organe wie die Lunge. Diese Tumorzellen passen sich an ihre neue Mikroumgebung an, um sich zu vermehren und experimentelle Metastasierungsherde zu etablieren.

Im folgenden Protokoll werden wir die Schwanzveneninjektion von B16-BL6-Melanomzellen in ein Mausmodell demonstrieren, um ihr Metastasierungspotenzial zu untersuchen.

- Nachdem alle B16-BL6-Zellsuspensionen vorbereitet wurden, wählen Sie eine Maus aus. Halten Sie es am Schwanz fest und führen Sie das Tier mit dem Hinterteil voran in einen Rückhalteapparat. Wenn sich der Oberkörper der Maus in der Hauptkammer und ihr Schwanz außerhalb des Geräts befindet, ziehen Sie das Tier zum Ende des Fixiergeräts.

Setzen Sie dann den Stößel ein und drücken Sie weiter auf den Kolben, bis die Maus fest sitzt. Sobald das Tier an Ort und Stelle ist, drehen Sie die Maus um 90 Grad, so dass eine der seitlichen Schwanzvenen nach oben zeigt. Verwenden Sie dann ein Alkoholtupfer, um die Seite des Mausschwanzes, an der die Vene am sichtbarsten ist, kräftig zu reinigen.

Zur Vorbereitung der Injektion werden zunächst 300 Mikroliter der 0,5 Millionen Zellen pro Milliliter Suspension in eine Spritze gegeben. Werfen Sie anschließend Blasen aus der Spritze aus, indem Sie sie umdrehen, mit der Seite schnippen und den Kolben drücken. Sobald die Blasen entfernt wurden, werfen Sie die Zellkultur aus, um ein endgültiges Volumen von 250 Mikrolitern in der Spritze zu erhalten.

Fahren Sie fort, den Mausschwanz mit der nicht-dominanten Hand zu verlängern. Halten Sie ihn so, dass der Zeigefinger das proximale Ende des Schwanzes anhebt und der Daumen den distalen Teil drückt. Führen Sie die Nadel mit der dominanten Hand in einem winzigen Winkel nach unten in die Vene in Richtung des distalen Endes des Schwanzes ein. Führen Sie dann die Nadel weiter ein und stellen Sie sie so ein, dass sie dem Winkel der Schwanzvene entspricht.

Nachdem die Nadel etwa 1 Zentimeter in die Schwanzvene eingeführt wurde, beginnen Sie, den Kolben zu drücken, während Sie die Spritze ruhig halten. Stoppen Sie Blutungen, indem Sie Gaze gegen die Eintrittsstelle halten. Sobald die Zellsuspension ausgestoßen wurde, entfernen Sie die Nadel aus der Vene und entsorgen Sie sie. Entfernen Sie als Nächstes den Kolben aus dem Rückhaltesystem und legen Sie die Maus in einen Empfängerkäfig.

• Experimental metastasis models - Tools to evaluate tumor cells' propensity to extravasate and proliferate following intravascular injection.
• Melanoma - A potent type of skin cancer that can spread to other organs like the lungs.
• B16-BL6 melanoma cells - Specific melanoma cells used in research for their metastatic potential.
• Tail vein injection - Technique to introduce substances directly into the bloodstream for experimental purposes.
• Metastatic foci - The sites where cancer cells adapt, proliferate and establish after traveling from the original tumor site.

• Melanoma metastasis - This describes how melanoma cells spread from the primary site to other parts of the body (e.g., lungs).
• Basics of tail vein injection - This procedure is a method of administering substances directly into the bloodstream (e.g., B16-BL6 melanoma cells).
• Metastatic foci formation process - This describes how injected cancer cells adapt to new environments, leading to metastasis.
• Link to mouse model - B16-BL6 melanoma cells are injected into a mouse model to study their metastatic potential.

• What is melanoma and how does it metastasize to the lungs?
• What is the purpose of tail vein injection in the metastatic model?
• How do melanoma cells form metastatic foci in distant organs?

• Targeted cancer treatments - Understanding metastasis could guide development of targeted therapies (e.g., for melanoma).
• Cancer research - The B16 mouse model aids in understanding cancer spread (e.g., melanoma metastasis).
• Medical advancements - Learning about metastasis contributes to treating other metastatic cancers (e.g., lung metastasis).
• Innovations in metastasis study - The study of metastasis helps in improving cancer diagnosis and prognosis methods.