Entwicklung eines auf Seidenkollagen basierenden 3D-Modells von polarisiertem Nervengewebe

Legen Sie donutförmige, mit Poly-D-Lysin beschichtete, poröse Seidengerüste in eine Multi-Well-Platte.

Fügen Sie Nährmedien hinzu, um die Gerüste mit Feuchtigkeit zu versorgen und die Zelladhäsion zu erleichtern.

Überschüssiges Medium ansaugen. Besäen Sie die Gerüste mit einer neuronalen Zellsuspension und inkubieren Sie.

Die beschichtete Oberfläche und die Gerüstporen bieten eine große Oberfläche für die Anhaftung von Zellen mit hoher Dichte und ermöglichen eine effiziente Nährstoff- und Abfalldiffusion

.

Entfernen Sie die nicht anhaftenden Zellen und fügen Sie Kollagen, ein Protein der extrazellulären Matrix, hinzu.

Inkubieren für die Kollagenpolymerisation. Dieser Prozess bettet die Zellen in eine gelartige 3D-Matrix auf dem porösen Gerüst ein.

Medien hinzufügen. Kultivieren Sie und tauschen Sie regelmäßig die Hälfte des Nährmediums aus, um die Nährstoffe wieder aufzufüllen, ohne die Zellen zu stören.

Innerhalb der Kultur bleiben die neuronalen Zellkörper am Seidengerüst verankert, während die Axone durch die Kollagenmatrix wachsen und 3D-Axonnetzwerke bilden.

Diese kompartimentierte Zellkörper- und axonale Lokalisierung führt zur Bildung eines 3D-Gehirn-ähnlichen polarisierten N