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DOI: 10.3791/3453-v
Xiaoting Meng*1, Wenfei Li*2,3, Fraser Young1, Runchi Gao3, Laura Chalmers3, Min Zhao3, Bing Song1
1School of Dentistry, Cardiff Institute of Tissue Engineering & Repair,Cardiff University , 2Shandong Qianfoshan Hospital,Shandong University School of Medicine, 3Dermatology and Ophthalmology Research, Institute for Regenerative Cures,University of California at Davis
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Dieses Protokoll zeigt Methoden verwendet werden, um 2D-und 3D-Umgebungen in speziell angefertigten electrotactic Kammern einzurichten, die Zellen verfolgen können
Das übergeordnete Ziel dieses Verfahrens ist es, die Wirkung der angelegten elektrischen Felder auf die Migration von neuronalen Vorläuferzellen in 2D-Kultur- und 3D-ex vivo-Modellen zu erfassen. Dies wird erreicht, indem zunächst neuronale Vorläuferzellen in vitro isoliert und expandiert werden. Der zweite Schritt besteht darin, eine Einzelzellsuspension von neuralen Vorläuferzellen herzustellen.
Als nächstes werden für die Vorbereitung der 2D-Kultur die neuralen Vorläuferzellen in speziell entwickelten elektrotaktischen Kammern plattiert. Alternativ werden für die 3D-Ex-vivo-Modellvorbereitung neuronale Vorläuferzellen mit den Haken 3, 3, 3, 4, 2 markiert und in ein organotypisches Modell des Rückenmarksschnitts injiziert. Letztendlich wird ein elektrisches Feld an die Elektrokammern angelegt und eine Zeitrafferaufnahme durchgeführt, um zu zeigen, dass Vorläuferzellen sowohl in 2D- als auch in 3D-Umgebungen zur Kathode des elektrischen Feldes wandern.
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