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Eine empfindliche und spezifische Quantifizierung Methode zur Bestimmung der Serum Cardiac Myosin...
Eine empfindliche und spezifische Quantifizierung Methode zur Bestimmung der Serum Cardiac Myosin...
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JoVE Journal Biology
A Sensitive and Specific Quantitation Method for Determination of Serum Cardiac Myosin Binding Protein-C by Electrochemiluminescence Immunoassay

Eine empfindliche und spezifische Quantifizierung Methode zur Bestimmung der Serum Cardiac Myosin Binding Protein-C durch Elektrochemilumineszenz Immunoassay

Full Text
17,129 Views
10:12 min
August 8, 2013

DOI: 10.3791/50786-v

Diederik W.D. Kuster1, David Barefield1, Suresh Govindan1, Sakthivel Sadayappan1

1Department of Cell and Molecular Physiology,Loyola University Chicago

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Messung von Biomarkern in komplexen biologischen Proben wird zunehmend Führung klinische Entscheidungsfindung. Wir beschreiben eine sehr empfindliche Methode, um gleichzeitig die Herzmyosin bindendes Protein-C, Creatin-Kinase-MB und Troponin I im Serum von Patienten mit Myokardinfarkt und gesunden Kontrollpersonen.

Das übergeordnete Ziel dieses Verfahrens ist es, gleichzeitig das kardiale Myosin-bindende Protein C und das kardiale Troponin I in Serumproben zu quantifizieren. Dies wird erreicht, indem zunächst eine 96-Well-Platte mit einem kardialen Myosin-bindenden Protein-C-Antikörper für einen Plex-Assay beschichtet wird, oder indem ein vorkodierter Threeplex-Assay verwendet wird. Im zweiten Schritt werden die beschichteten Platten mit Kalibratoren und Serumproben inkubiert.

Als nächstes werden markierte Detektionsantikörper zugegeben, im letzten Schritt wird ein Chemilumineszenzsignal erzeugt, das vom Plattenleser detektiert wird. Letztendlich können die in Serumproben vorhandenen Spiegel der interessierenden kardialen Proteine durch Einzel- oder Multiplex-Immunoassays bestimmt werden. Pipettieren Sie am Tag vor dem Experiment 30 Mikroliter gelatinefreies monoklonales Maus-Anti-Herz-Myosin-bindendes Protein C-Antikörper in die untere Ecke jeder Vertiefung einer 96-Well-Miso-Skala-Entdeckungs-nackten Standardplatte.

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