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DOI: 10.3791/52643-v
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This article describes a method for the quick, efficient, and inexpensive preparation of polyacrylamide gels in a multiwell plate format. The technique is accessible to any research laboratory and is particularly beneficial for studies on stiffness-dependent cell responses.
Hier wird eine Methode beschrieben, die eine schnelle, effiziente und kostengünstige Herstellung von Polyacrylamid-Gelen in einem Multiwell-Plattenformat ermöglicht. Die Methode erfordert keine spezielle Ausrüstung und kann von jedem Forschungslabor leicht übernommen werden. Es wäre besonders nützlich in der Forschung, die sich auf das Verständnis steifigkeitsabhängiger Zellreaktionen konzentriert.
Das übergeordnete Ziel dieses Verfahrens ist es, eine schnelle, effiziente und kostengünstige Herstellung von Polyacrylamid-Gelen in einem Multi-Well-Plattenformat zu ermöglichen. Dies wird erreicht, indem zunächst die Gelvorläuferlösung zwischen einer hydrophoben beschichteten Glasplatte und einem flexiblen Kunststoffträger mit Acrylamidklebstoff eingeklemmt wird. Der zweite Schritt besteht darin, das Gel von der Glasplatte, das sich bei der Polymerisation kovalent an den flexiblen Kunststoffträger gebunden hat, abzuziehen und trocknen zu lassen.
Als nächstes werden das trockene Gel und der darunter liegende flexible Kunststoffträger in die gewünschte Form geschnitten und mit der Kunststoffseite nach unten auf den Well-Boden einer Multi-Well-Platte oder eines anderen Zellkulturgefäßes geklebt. Der letzte Schritt besteht darin, die mit der Multiwell-Platte zusammengesetzten Polyacrylamid-Gele mit einer Zelladhäsivbeschichtung zu beschichten, z. B. einer Monoschicht aus Kollagen Typ eins. Letztendlich werden Mikroskopie sowie andere Zellcharakterisierungstechniken verwendet, um die Wirkung des darunter liegenden Polyacrylamid-Substrats zu beobachten.
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