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DOI: 10.3791/55893-v
Naoki Ihara1, Yuji Ikegaya1,2, Haruki Takeuchi1,3
1Laboratory of Chemical Pharmacology, Graduate School of Pharmaceutical Sciences,The University of Tokyo, 2Center for Information and Neural Networks,National Institute of Information and Communications Technology, 3PRESTO,Japan Science and Technology Agency (JST)
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This protocol outlines an immunohistochemical staining method to visualize the expression of axon-sorting molecules at the axon termini of olfactory sensory neurons. This technique is crucial for understanding olfactory development processes such as axon guidance and synapse formation.
Olfaktorische sensorische Neuronen exprimieren eine Vielzahl von Axon-sortierenden Molekülen, um eine korrekte neuronale Schaltung zu etablieren. Dieses Protokoll beschreibt eine immunhistochemische Färbemethode, um kombinatorische Ausdrücke von Axon-sortierenden Molekülen an den Axon-Termini von olfaktorischen sensorischen Neuronen zu visualisieren.
Das übergeordnete Ziel dieser immunhistochemischen Färbemethode ist es, die kombinierte Expression von Axonsortiermolekülen an den Axonenden olfaktorischer sensorischer Neuronen sichtbar zu machen. Diese Methode kann dazu beitragen, Schlüsselprozesse im Bereich der olfaktorischen Entwicklung zu charakterisieren, wie z. B. die Axonführung, die Synapsenbildung und die Regeneration olfaktorischer sensorischer Neuronen. Der Hauptvorteil dieser Technik besteht darin, dass sie es den Wissenschaftlern ermöglicht, die Expressionsmuster von Axonsortiermolekülen im Riechkolben zu vergleichen und zu analysieren, ohne dass es zu Schwankungen zwischen den Abschnitten kommt.
visuelle Demonstration dieser Methode ist von entscheidender Bedeutung, da der Einbettungsschritt schwer zu erlernen ist, da die Position und der Winkel der olfaktorischen Gewebeprobe in der Form schwer mit Worten zu beschreiben sind. Beginnen Sie mit Köpfen von Mäusen im Alter von ein bis zwei Wochen, die durch intrakardiale Perfusion von 4 % Paraformaldehyd fixiert wurden. Führen Sie eine Scherenklinge in den Raum zwischen den oberen und unteren Zähnen ein und schneiden Sie horizontal, um den Unterkieferknochen zu entfernen.
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