Name: Dynamische Multiparameter-Bewertung der Thrombozytenfunktion mit einem kapazitiven Biosensor (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-05-02T12:40:00.000+00:00
Duration: 6 min 32 s
Description: Erfahren Sie die dynamische Multiparameter-Bewertung der Thrombozytenfunktion mit einem kapazitiven Biosensor in einem semi-starren Mikroumfeld. Diese Methode ermöglicht die gleichzeitige Messung von Thrombozytenzahl, Stimulationsstärke und Aktivierungswegen für eine verbesserte physiologische Relevanz.

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<li>Zhurauski, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sensitive+and+selective+affimer-functionalized+interdigitated+electrode-based+capacitive+biosensor+for+her4+protein+tumor+biomarker+detection%5BTitle%5D)+AND+%22Biosens+Bioelectron%22%5BJournal%5D)">Sensitive and selective affimer-functionalized interdigitated electrode-based capacitive biosensor for her4 protein tumor biomarker detection.</a> Biosens Bioelectron. 108, 1-8 (2018).</li>
<li>Pourang, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+fibrinolytic+status+in+whole+blood+using+a+dielectric+coagulometry+microsensor%5BTitle%5D)+AND+%22Biosens+Bioelectron%22%5BJournal%5D)">Assessment of fibrinolytic status in whole blood using a dielectric coagulometry microsensor.</a> Biosens Bioelectron. 210, 114299(2022).</li>
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</ol>

<table><tbody><tr><td>1-Dodecanthiol</td><td>Sigma-Aldrich, MO, U.S.A</td><td>471364-100ML</td><td>1 mM</td></tr><tr><td>200-proof Ethanol</td><td>Sigma-Aldrich, MO, U.S.A</td><td>EX0276-1</td><td></td></tr><tr><td>3D-Drucker</td><td>Shenzhen Creality 3D Technology Co, Ltd.</td><td>Ender-3 V3</td><td></td></tr><tr><td>3D-Druckmaterial</td><td>HATCHBOX 3D, CA, U.S.A</td><td>3D PLA-1KG-1.75</td><td></td></tr><tr><td>Adenosin 5&prime;-diphosphat</td><td>Sigma Aldrich, U.S.A</td><td>01905-250MG-F</td><td>ADP</td></tr><tr><td>Aspirin&nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich, MO, U.S.A</td><td>A2093-100G</td><td></td></tr><tr><td>Tiefes reaktives Ionenätzen</td><td>Omega Engineering, Inc.</td><td>SPTS Rapier DRIE</td><td></td></tr><tr><td>Dimethylsulfoxid</td><td>Sigma-Aldrich, MO, U.S.A</td><td>D8418-50ML</td><td>DMSO</td></tr><tr><td>Hochvakuum-Abscheidungssysteme</td><td>CHA &nbsp;</td><td>SEC-600</td><td></td></tr><tr><td>Humanes Fibronektin</td><td>Sigma-Aldrich, MO, U.S.A</td><td>CLS356008-1EA</td><td>Fn</td></tr><tr><td>KOH</td><td>Sigma-Aldrich, MO, U.S.A</td><td>P1767-250G</td><td></td></tr><tr><td>LCR-Messgerät &nbsp;</td><td>Keithley Instruments, Inc., OH, U.S.A</td><td>Keithley EL 4980AL</td><td></td></tr><tr><td>LCR-Messgerätehalter</td><td>Signatone Corporation, CA, U.S.A</td><td>SCA-50-4</td><td></td></tr><tr><td>Mask Aligner System</td><td>ABM, U.S.A, Inc.</td><td>ABM/6/350/NUV/DCCD/SA</td><td></td></tr><tr><td>Mikropositionierer</td><td>Signatone, CA, U.S.A</td><td>S-725</td><td></td></tr><tr><td>Nadelsonde</td><td>Signatone Corporation, CA, U.S.A</td><td>SCAT5T-4</td><td>12,5 &mu; m</td></tr><tr><td>radius Phosphatgepufferte Kochsalzlösung</td><td>Sigma-Aldrich, MO, U.S.A</td><td>P4474-1L</td><td>PBS, pH 7,4</td></tr><tr><td>Reaktives Ionenätzen</td><td>Plasma-Therm, U.S.A</td><td>RIE Vision 320</td><td></td></tr><tr><td>Siliziumsubstrat</td><td>Wafer World Inc</td><td>SKU# 1766</td><td></td></tr><tr><td>Standard 3,2% Citratröhrchen</td><td>Tiger Medical, NJ, U.S.A.</td><td>Covidien / Cardinal Health 8881340478 Monoject</td><td></td></tr><tr><td>Thrombin</td><td>Enzyme Research Laboratories, USA</td><td>HT 1002a</td><td></td></tr><tr><td>Ticagrelor</td><td>Sigma-Aldrich, MO, U.S.A</td><td>PHR2788-400MG</td><td></td></tr><tr><td>Tyrode' s Puffer</td><td>Boston Bioproducts, U.S.A</td><td>BSS-375</td><td></td></tr><tr><td>UV-Fotolack</td><td>AZ electronic materials, NC, U.S.A.</td><td>AZ 9260</td><td>15um</td></tr></tbody></table>

dynamische multiparameter-bewertung der thrombozytenfunktion mit einem kapazitiven biosensor

Dynamic Multiparameter Platelet Function Assessment Using a Capacitive Biosensor

Ziel dieser Studie ist es, eine dynamische Bewertung der Thrombozytenfunktion durchzuführen. Gemäß dem oben beschriebenen Protokoll wurde die c-PRP-Lösung hergestellt und die Thrombozyten auf die Fn-beschichtete Elektrode in T-MCC ausgesät. Die frei schwebenden Blutplättchen wurden durch den Waschschritt ausgewaschen und mit einem Agonisten versetzt, um die angehängten Blutplättchen zu aktivieren. Detaillierte Ergebnisse und Diskussionen finden Sie in unserem vorherigen Bericht28.
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Dynamische Multiparameter-Bewertung der Thrombozytenfunktion mit einem kapazitiven Biosensor

Platelets play a fundamental role in blood clotting through a series of regulated responses, including adhesion, spreading, granular secretion, ...

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Dieses Video zeigt die Methode zur Bewertung der Auswirkungen von Scherspannungen auf Blutplättchen. Die Antikörperbehandlung induziert Dissoziation und Konformationsänderungen in Mechanorezeptorkomplexen, aktiviert die Blutplättchen und exprimiert Marker auf der Oberfläche. Diese Marker werden mittels Immunfärbung und Durchflusszytometrie beobachtet.

Die Auswirkungen von Scherstress auf Blutplättchen, die mit Antikörpern gegen mechanosensorische Rezeptoren behandelt wurden

Die Thrombozytentransfusion und Hämostase wurde unter Verwendung von Blutrekonstitution und mikrofluidischen Flusskammern modelliert, um die Funktion von Blutbankplättchen zu untersuchen. Die Daten zeigen die Auswirkungen einer Thrombozytenspeicherung auf die Blutstillung in vitro.

Mikrofluidik-Strömungskammern Mit Rekonstituierte Blut Hämostaseologie und Transfusions Platelet zu Modell<em&gt; In Vitro</em

Dieses Dokument beschreibt ein experimentelles Modell der Hämostase, die Thrombozytenfunktion und Koagulation gleichzeitig misst. Blutplättchen- und Fibrin- Fluoreszenz wird in Echtzeit gemessen und die Plättchenadhäsion Rate, Gerinnungsrate und Einsetzen der Gerinnung bestimmt. Das Modell wird verwendet, um die Thrombozyten Prokoagulanz-Eigenschaften unter Strömung in Konzentraten für Transfusions bestimmen.

Ein Mikrofluidik-Flow-Kammer-Modell für Platelet Transfusions und Hämostase Maßnahmen Platelet Deposition und Fibrinbildung in Echtzeit

Hier präsentieren wir ein Protokoll für die Erkennung und Quantifizierung von niedrigen reichlich Moleküle in komplexe Lösungen mit molekularen Prägung in Kombination mit einer Kapazität Biosensor.

Gromer Nachweis von Biomarkern mithilfe einer molekularen Prägung basierte kapazitive Biosensor

Es wird ein detailliertes Protokoll für die Abbildung einzelner migrierender Thrombozyten unter Verwendung von RGD-funktionalisierten Avidin-Biotin-Ethern mit einstellbarer Dichte bereitgestellt, das zeigt, dass Thrombozyten genügend Kraft erzeugen, um die Avidin-Biotin-Bindung zu brechen.

Ein in vitro Assay zur Untersuchung der Thrombozytenmigration mit RGD-funktionalisierten Avidin-Biotin-Ethern

Die Bildung von prokoagulanzien Blutplättchen wurde mit einem erhöhten Thromboserisiko korreliert. Hier wird ein präzises Protokoll zur Isolierung von gewaschenen Blutplättchen aus menschlichem Blut vorgestellt, das dazu bestimmt ist, die Exposition von Phosphatidylserin und Mikrovesikelfreisetzung zu quantifizieren, die charakteristische Merkmale von Prokoagulanzienthrombozyten sind.

Charakterisierung von Prokoagulanzien-Thrombozyten durch Messung der Phosphatidylserin-Exposition und der Mikrovesikelfreisetzung aus humanen gereinigten Blutplättchen

Die Thrombozytenfunktion unter Fluss kann beurteilt und eine simulierte hämostatische Wiederbelebung mit einem mikrofluidischen Gerät modelliert werden, das in der Trauma- und Transfusionsmedizin Anwendung findet.

Mikrofluidik zur Beurteilung der Thrombozytenfunktion

Die Mehrfarben-Durchflusszytometrie für Blutplättchen kann neue Thrombozyten-Subtypen innerhalb klassischer Thrombozyten-Subpopulationen identifizieren, wie z. B. ruhende, aggregierte, prokoagulanzielle und apoptotische Thrombozyten. Dies ermöglicht den Vergleich verschiedener Subpopulationsmuster, die durch verschiedene Thrombozytenagonisten induziert werden. Hier wird ein Verfahren zur Etablierung eines mehrfarbigen Durchflusszytometrie-Panels ausführlich beschrieben.

Analyse von Thrombozyten-Subpopulationen durch Mehrfarben-Durchflusszytometrie

Das vorliegende Protokoll bietet eine umfassende Reihe von Verfahren, die zur Analyse von gerinnungsfördernden Thrombozyten erforderlich sind, die überlappende Merkmale von Nekrose, Apoptose und Thrombozytenaktivierung aufweisen.

Umfassende Analyse von prokoagulanzien Thrombozyten, die Merkmale von Nekrose, Apoptose und Thrombozytenaktivierung aufweisen

Diese Arbeit beschreibt einen mikrofluidischen Assay, der Scherspannung nutzt, um die Thrombusbildung im Blut auszulösen, und charakterisiert den Thrombus anhand mehrerer Auswertungsdimensionen. Der Test kann die prothrombotische Tendenz von Blutproben messen und ist daher nützlich für die Krankheitsdiagnose, Arzneimittelentwicklung sowie grundlegende mechanistische Studien im Zusammenhang mit Thrombose.

Thrombusprofiling-Assay: Eine auf Mikrofluidik basierende Plattform zur umfassenden Charakterisierung biomechanischer Thrombogenese

Erfahren Sie die dynamische Multiparameter-Bewertung der Thrombozytenfunktion mit einem kapazitiven Biosensor in einem semi-starren Mikroumfeld. Diese Methode ermöglicht die gleichzeitige Messung von Thrombozytenzahl, Stimulationsstärke und Aktivierungswegen für eine verbesserte physiologische Relevanz.

Dynamische Multiparameter-Bewertung der Thrombozytenfunktion mit einem kapazitiven Biosensor

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