Super-Resolución De Imágenes De Células Vivas De Estructuras Subcelulares

Nuestro protocolo utiliza sondas de fluoróforo regulares y técnicas simples de preparación de muestras que mantienen la célula fotoda en condiciones fisiológicas para estudiar el proceso celular altamente dinámico y las estructuras subcelulares detalladas. Esta técnica nos permite investigar los procesos celulares a una súper resolución y en condiciones fisiológicas durante un período prolongado sin sacrificar la resolución especial o temporal. Comience cortando una membrana de diálisis de corte de peso molecular de 12 a 14 kilodalton en trozos pequeños y empapando los pedazos con 100 microlitros de medio celular vivo durante aproximadamente cinco minutos.

Mientras las membranas están empapadas, corte el anillo exterior de un tubo de 50 mililitros en trozos pequeños y esterilice los trozos en etanol al 70%. Para la disección y el montaje de los testículos, transfiera diez moscas macho anestesiadas de dos a tres días de edad a un plato de disección bajo un microscopio de disección y use pórceps finos para eliminar los testículos. Cuando se hayan recogido todos los testículos, lave los testículos dos veces en medio de células vivas y use una punta de pipeta para extender de 100 a 150 microlitros de medio de células vivas al plato de fondo de vidrio preparado.