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JoVE Journal Neuroscience
Time-Lapse Imaging of Migrating Neurons and Glial Progenitors in Embryonic Mouse Brain Slices

Imágenes de lapso de tiempo de neuronas migratorias y progenitores gliales en cortes de cerebro de ratón embrionario

Full Text
1,507 Views
04:17 min
March 8, 2024

DOI: 10.3791/66631-v

Hidenori Tabata1,2, Koh-ichi Nagata2, Kazunori Nakajima1

1Department of Anatomy,Keio University School of Medicine, 2Department of Molecular Neurobiology, Institute for Developmental Research,Aichi Developmental Disability Center

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This study focuses on the development of the cerebral cortex, highlighting the migration of neurons and glial progenitors from the ventricular zone to the brain surface. By employing time-lapse imaging techniques alongside in utero electroporation for cell labeling, the research investigates the migration modes of astrocyte progenitors and the genes influencing neurodevelopmental and psychiatric disorders.

Key Study Components

Area of Science

  • Neurodevelopment
  • Cell migration
  • Neurobiology

Background

  • The study explores the origin of neurons and glial cells during cortical development.
  • It addresses the role of specific genes in neurodevelopmental and psychiatric disorders.
  • Astrocyte progenitors exhibit distinct migration modes relevant to cortical formation.
  • In vivo gene transfer techniques facilitate the observation of these migration patterns.

Purpose of Study

  • To visualize and analyze the behaviors of migrating neurons and glial cells.
  • To elucidate the functional roles of genes involved in neurodevelopment.
  • To investigate cell behavior and interactions between neurons, glia, and blood vessels.

Methods Used

  • Utilized in utero electroporation for gene transfer and cell labeling.
  • Focused on mouse models to examine neuronal and glial progenitor migration.
  • Involved time-lapse imaging of EGFP- and RFP-positive cells.
  • The protocol outlined specific surgical and imaging techniques for accurate observations.
  • Included the creation of brain sections for analysis via a vibrating microtome.

Main Results

  • Identified two distinct astrocyte progenitor migration modes: erratic and blood vessel-guided.
  • Presented data showed defined trajectories of migrating cells over time.
  • Findings contribute to the understanding of neurodevelopmental disorder mechanisms.
  • Demonstrated the effectiveness of electroporation for visualizing individual cells.

Conclusions

  • This study provides insights into the mechanisms of neuronal migration during cortical development.
  • Findings may enhance our understanding of neurodevelopmental and psychiatric disorders.
  • The results underscore the complex interplay between glial and vascular components in brain development.

Frequently Asked Questions

What are the advantages of using in utero electroporation?
In utero electroporation allows for precise gene transfer and labeling of specific cells in vivo, providing high signal-to-noise ratios essential for imaging individual cells.
How does the experimental model contribute to the understanding of CNS development?
The use of mouse models enables the observation of real-time neuronal migration and the effects of genetic variations, offering insights into brain development processes.
What types of data can be obtained from this time-lapse imaging method?
The method provides quantitative data on migrating cell trajectories, enabling the analysis of different migration modes and their dynamics over time.
Can this method be adapted for other cell types or conditions?
Yes, the protocol can be modified to study various cell types or conditions, making it a versatile tool for examining different aspects of cell behavior in vivo.
What are some limitations of the approach used in this study?
Potential limitations include the complexity of in utero manipulation and the specificity of gene delivery, which may affect reproducibility across different experiments.
What cellular behaviors were focused on in this research?
The study concentrated on the migration patterns of neurons and glial cells, specifically investigating how astrocyte progenitors navigate during cortical development.

Durante el desarrollo de la corteza cerebral, las neuronas y las células gliales se originan en la zona ventricular que recubre el ventrículo y migran hacia la superficie cerebral. Muchos genes están involucrados en este proceso. Este protocolo introduce la técnica para la obtención de imágenes en time-lapse de las neuronas migratorias y los progenitores gliales.

Durante el desarrollo de la corteza cerebral, las neuronas y los glóbulos grises se derivan de la zona ventricular y migran a otra parte de la superficie cerebral. Muchos genes están involucrados en este proceso, incluidos los responsables de los trastornos psiquiátricos y del desarrollo neurológico. Estamos abordando sus funciones en los tres comportamientos de este proceso.

Recientemente, hemos reportado que los progenitores de astrocitos asumen dos modos de migración distintos: migración errática y guiada por vasos sanguíneos. Estas observaciones se realizaron utilizando una combinación de etiquetado específico del serotipo y métodos de observación del tiempo presentados en este video. Para nivelar las células, utilizamos el sistema de electroporación en el útero, que desarrollamos para visualizar células individuales con una alta relación señal-ruido.

Este sistema de transferencia de genes in vivo también nos permite realizar fácilmente experimentos de ganancia o pérdida de función en los genes dados mediante electroporación de su expresión o vectores de neutrones. Utilizando este sistema experimental, nuestro objetivo es observar los comportamientos celulares de las neuronas, la glía y los vasos sanguíneos, y dilucidar la diafonía entre ellos. Los hallazgos de estos estudios contribuirán a comprender la patogénesis de los trastornos del neurodesarrollo.

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Palabras clave: Imágenes de lapso de tiempo migración de neuronas migración de progenitores gliales cortes de cerebro de ratón embrionario desarrollo de la corteza cerebral zona ventricular superficie cerebral trastornos del neurodesarrollo trastornos psiquiátricos electroporación en el útero etiquetado de proteínas fluorescentes manipulación de genes comportamiento migratorio velocidad de migración imágenes de células vivas

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