Imágenes de inmunofluorescencia múltiple basadas en códigos de barras de ADN para analizar muestras de FFPE de melanoma murino reprogramado genéticamente

Presentamos un protocolo para desarrollar y validar un panel de inmunofluorescencia multiplex para estudiar tejidos FFPE de ratón y demostrar su utilidad mediante el estudio de muestras de un modelo de melanoma tratado con nanopartículas que administran ADN plasmático, codificando señales inmunológicas para reprogramar el microambiente tumoral. El campo carecía de protocolos de inmunofluorescencia multiplex rigurosamente desarrollados y validados compatibles con tejidos FFPE fijados en formol e incluidos en parafina de ratón.

La inclusión de parafina fijada en formol preserva la morfología del tejido a largo plazo, es fácil de manejar y almacenar, y permite la creación de micromatrices de tejido para ver múltiples muestras en un solo portaobjetos.