5 janvier 2012
Terriers, de nidification et la thésaurisation des espèces typiques des activités que les souris effectuer facilement en laboratoire. Cet article décrit comment ils peuvent être facilement évalués à un prix avantageux. Ces protocoles sont extrêmement sensibles à la souche de souris, des lésions cérébrales et les maladies. En outre, ils constituent «l'enrichissement de l'environnement» pour les souris, et incarner le "raffinement" aspect du «3 R» 18.
L'objectif de cette procédure est de caractériser les comportements typiques des espèces chez la souris. Le comportement de fouissage est d'abord étudié en remplissant un tube avec un matériau et en mesurant la quantité retirée par l'animal. Des morceaux de nidification sont placés dans la cage et l'intégralité du nid est quantifiée comme mesure du comportement de nidification.
Le comportement de thésaurisation est examiné en plaçant une souris dans une boîte ayant accès à un tunnel rempli de granulés alimentaires et en mesurant la quantité que l'animal récupère depuis le tunnel. Les résultats de cette série de tests indiquent si les souris accomplissent leurs activités de la vie quotidienne. Normalement, les implications de cette technique peuvent s'étendre à la recherche de traitements contre la démence, car des comportements fonctionnellement similaires sont altérés à la fois chez la souris et chez l'homme.
Les comportements typiques de la souris peuvent être comparés aux activités quotidiennes des êtres humains, voire aux leurs. Les premiers effets de la maladie d'Alzheimer consistent à inhiber l'exécution des activités habituelles de la vie quotidienne, comme préparer son petit-déjeuner, lacer ses chaussures, planifier un repas ou faire une course. Avec notre modèle de souris atteintes de la maladie d'Alzheimer, nous constatons que les comportements typiques de l'espèce sont fortement inhibés.
Ici, nous disposons d'un modèle direct, presque homologue, entre les activités de la vie quotidienne observées chez les patients atteints de la maladie d'Alzheimer à domicile et en clinique, et l'inhibition des espèces. Comportements typiques chez la souris : construire un terrier à partir d'un tube en plastique de 68 millimètres de diamètre et de 20 centimètres de longueur. Boucher une extrémité avec un bouchon en MDF de 12 millimètres d'épaisseur.
Ensuite, percer deux trous, à un centimètre de l'extrémité ouverte du tube de fouissage, à un angle de 90 degrés. Insérer une vis machine de cinq centimètres de long dans chaque trou et les serrer en place. Le tube doit maintenant être surélevé d'environ trois centimètres au-dessus du sol.
D’un côté, remplir le terrier avec 200 grammes de granulés alimentaires et le placer dans la cage d’habitation pendant la nuit. Si les souris sont logées en groupe, l’habituations sera plus rapide et plus complète en raison de l’effet de facilitation sociale. Toutefois, des tests de base doivent toujours être réalisés sur des souris logées individuellement.
Par la suite, des substances non alimentaires peuvent également être utilisées pour mesurer le comportement de fouissage. Parmi les exemples figurent les boules d'argile, les gravillons de pois et le sable. Après l'acclimatation des animaux, placez un terrier complet dans la cage d'essai vers 16h00 pour effectuer un test de référence.
Il est recommandé d'effectuer deux tests de référence, espacés de 48 heures. Deux heures plus tard, mesurez la masse du matériau restant dans le terrier en vidant son contenu dans un récipient taré.
Remettez le matériau non consommé dans le tube et replacez-le dans la cage d'origine le lendemain matin. Retirez le tube et pesez tout matériau restant pour analyse. Répétez cette procédure au moins 48 heures après la dernière mesure de base.
Les souris C57 noires six creusent typiquement environ 70 grammes au cours des deux premières heures et près de 200 grammes pendant la nuit. Les souris présentant des lésions hippocampiques creusent souvent moins de cinq grammes. La maladie à prions inhibe le creusement, tout comme le lipopolysaccharide.
L'exploration du comportement de creusement permet de détecter la maladie à prions 10 à 12 semaines après l'injection d'un homogénat cérébral malade, alors que les signes cliniques n'apparaissent qu'à 22 semaines. Il a été démontré que ce comportement est sensible aux différences de souche et à l'invalidation de sous-unités de canaux ioniques potassiques. Pour mesurer le comportement de nidification, préparez des cages individuelles et recouvrez le sol d'un matériau d'ensablement de 0,5 centimètre d'épaisseur.
Placer profondément dans chaque cage un carré de coton compressé de cinq centimètres de côté, appelé nid d'ouate, puis mettre un souris dans chaque cage de nidification environ une heure avant la phase sombre et évaluer les résultats. Le lendemain matin.
Peser la quantité de litière de nid non déchirée et évaluer le nid selon une échelle à cinq points. Un score de un est attribué lorsque la litière de nid est largement intacte, et un score de cinq est attribué à un nid presque parfait, avec plus de 90 % de la litière déchirée. Tant les mâles que les femelles construisent des nids, dont la fonction est la thermorégulation ainsi que l'association à la reproduction.
Les scores de nidification des souris C57BL/6 mâles et femelles se situent dans la même fourchette. Bien que nous n'ayons pas effectué de comparaison contrôlée dans une seule expérience, la plupart des souris C57BL/6 obtiennent un score de quatre à cinq pour la construction de nids. Toutefois, lorsque l'hippocampe est lésé, le score médian serait d'environ deux.
Il est peu probable que le score atteigne trois. Pour mesurer le comportement de thésaurisation, préparez la boîte qui servira de base en insérant une bouteille d'eau et en perçant un trou sur le côté, là où sera fixé le tube de thésaurisation. Fabriquez un tube de thésaurisation en enroulant une longueur de treillis métallique de 45 centimètres autour d'un tube de 40 millimètres de diamètre.
Fixez-le avec des colliers Allen ou des fils torsadés. Ensuite, insérez-le sur une longueur de 10 centimètres d'un tube noir de 40 millimètres. Puis, reliez le tube de retenue à la boîte préparée précédemment et obturez l'extrémité proximale avec un bouchon en bois amovible.
Préparez la boîte d’habitation avec un tunnel en carton et de la litière souillée provenant de la cage d’origine. Veillez à empêcher l’accès au tube de stockage. Placez la souris dans la boîte tôt dans la journée pour une période d’habituation ultérieure, retirez le tube de stockage et remplissez son extrémité distale avec un mélange de granulés alimentaires de grande et petite taille, pour un total de 100 grammes.
Juste avant le début de la phase sombre. Retirez le bouchon en bois pour permettre à la souris d'accéder au tube de stockage le lendemain matin. Là encore, le moment n'est pas critique.
Collecter et peser les granulés alimentaires qui ont été stockés dans la boîte de la base domestique. Utiliser des souris femelles C57BL/6. La quantité médiane stockée serait d’environ 50 à 70 grammes.
Les lésions de l'hippocampe suppriment fortement l'accumulation, tandis que les lésions du cortex préfrontal n'ont qu'un effet faible. Après avoir visionné cette vidéo, vous devriez bien comprendre comment évaluer les comportements typiques d'une espèce dans la masse.
Cet article décrit des méthodes permettant d'évaluer les comportements typiques des espèces chez la souris, notamment le creusage, le nidification et l'accumulation. Ces comportements sont sensibles à divers facteurs tels que la souche de souris et les lésions cérébrales, et ils constituent une forme d'enrichissement environnemental.
L'évaluation quantitative du creusage, de la construction de nids et de l'accumulation chez les souris fournit un indicateur pertinent sur le plan translationnel du déclin fonctionnel précoce dans les modèles de maladies neurodégénératives. Ces tests comportementaux permettent aux équipes précliniques d'évaluer des analogues des activités de la vie quotidienne, renforçant ainsi la confiance prédictive en l'engagement de la cible et le potentiel de modification de la maladie. L'intégration de ces critères d'évaluation dans les flux de travail de découverte améliore le tri des portefeuilles et réduit les risques liés aux décisions d'avancement pour la maladie d'Alzheimer et les affections connexes.
Ces tests comportementaux s'inscrivent dans le continuum allant de la découverte précoce à la phase préclinique, assurant un lien entre la validation des cibles et la recherche translationnelle pour les portefeuilles de maladies neurodégénératives.