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Analyse du promoteur du ligand c-KIT utilisant l'immunoprécipitation de la chromatine
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JoVE Journal Genetics
Analysis of the c-KIT Ligand Promoter Using Chromatin Immunoprecipitation

Analyse du promoteur du ligand c-KIT utilisant l'immunoprécipitation de la chromatine

Full Text
8,288 Views
09:40 min
June 27, 2017

DOI: 10.3791/55689-v

Pingyu Zhang*1, Andres Rojas*1, Boris Blechacz1

1Department of Gastroenterology, Hepatology and Nutrition,The University of Texas MD Anderson Cancer Center

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Les interactions ADN-protéines sont essentielles pour de multiples processus biologiques. Au cours de l'évaluation des fonctions cellulaires, l'analyse des interactions ADN-protéines est indispensable pour la compréhension de la régulation des gènes. L'immunoprécipitation de la chromatine (ChIP) est un outil puissant pour analyser ces interactions in vivo.

L’objectif global de cette procédure d’immunoprécipitation de la chromatine est d’évaluer la liaison induite par le TGF bêta 1 du facteur de transcription SMAD2 aux éléments de liaison SMAD dans le promoteur du kit C. Cette méthode peut répondre à des questions clés dans le domaine de la biologie cellulaire telles que la transcription génique induite par les cytokines. Le principal avantage de cette technique est qu’elle a le potentiel de démontrer la liaison directe des facteurs de transcription et d’autres protéines régulatrices de la transcription à leurs sites de liaison à l’ADN in vivo.

Cultivez les cellules à une confluence comprise entre 70 et 80 % sur des plaques de culture tissulaire de dix centimètres. Stimuler les cellules selon les objectifs expérimentaux. Retirez le milieu de culture tissulaire et ajoutez cinq millilitres de solution de fixation.

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Genetics Issue 124 immunoprécipitation de la chromatine régulation des gènes promoteur facteur de transcription ligand c-KIT TGF-β SMAD

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