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DOI: 10.3791/60541-v
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Présenté ici est un protocole pour détecter la production de pièges extracellulaires macrophages (MET) dans la culture cellulaire vivante en utilisant la microscopie et la coloration de fluorescence. Ce protocole peut être étendu pour examiner des marqueurs spécifiques de protéine de MET par coloration d'immunofluorescence.
La libération de pièges extracellulaires par les neutrophiles et autres cellules immunitaires est importante dans l’immunité innée mais aussi fortement liée aux pathologies inflammatoires. Très peu est connu au sujet de ce processus dans les macrophages bien que ces cellules jouent un rôle critique dans la réponse inflammatoire. Ce protocole fournit un modèle in vitro humain primaire de piège extracellulaire de macrophages ou de libération de mât.
Il fournit un modèle pour nous d’étudier une croissance physiologique potentielle de cette structure in vivo. Le principal avantage de cette technique est que les cellules de ce protocole sont des cellules primaires isolées des préparations de couches buffy humaines. Il n’y a pas d’étape d’amorçage nécessaire pour différencier le monocyte en macrophages, ce qui contraste avec d’autres lignées cellulaires monocytes telles que la lignée cellulaire THP-1.
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