Summary
Här, beskriver vi en enkel metod för att framkalla kliniskt relevanta hud trycksår (PUs) i en musmodell av ryggmärgsskada (SCI). Denna modell kan användas i prekliniska studier till skärmen för olika therapeutics för helande PUs i SCI patienter.
Abstract
Trycksår (PUs) är vanliga försvagande komplikationer av traumatisk ryggmärgsskada (SCI) och tenderar att inträffa i mjukdelar runt benutskott. Det är dock föga kända om inverkan av SCI på hud sår läkning i samband med djurmodeller i kontrollerade experimentella inställningarna. I denna studie presenteras en enkel, icke-invasiv, reproducerbar och kliniskt relevanta musmodell av PUs i samband med komplett SCI. Vuxna manliga möss (Balb/c, 10 veckor gammal) var rakade och avhåras. Efter hårborttagning (24 h), möss utsattes för laminektomi följt av komplett ryggmärgen transection (T9-T10 kotorna). Omedelbart efter, var ett hudveck på baksidan av mössen lyfte och inklämt mellan två magnetiska skivor hålls på plats för nästa 12 h, vilket skapar en ischemisk område som utvecklats till en PU under följande dagar. De skadade områdena visat vävnad ödem och epidermal försvinnandet av dag 3 efter magnet ansökan. PUs spontant utvecklat och läkt. Healing var, men långsammare i SCI mössen jämfört för att styra icke-SCI möss när såret skapades under nivån för SCI. omvänt, sågs ingen skillnad i läkning mellan SCI och kontroll icke-SCI möss när såret skapades ovanför SCI. Denna modell är ett potentiellt användbart verktyg att studera dynamiken i huden PU utveckling och läkning efter SCI, samt för att testa behandlingsmetoder som kan hjälpa till att läka dessa sår.
Introduction
Trycksår (PUs) är stora sekundära komplikationer av traumatisk SCI1. PUs är lokaliserade skador på hud och/eller underliggande vävnader som uppträder vanligtvis över benutskott där kroppsvikt är koncentrerad medan patienten sittande eller liggande1. Den hud, fett och muskler utsätts för denna konstant tryck som leder till utvecklingen av lokaliserad ischemi, vävnadsinflammation, mekaniska skador och nekros2,3.
Utvecklingen av PUs påverkas av flera lokala faktorer, inklusive omfattningen av tryck och skjuvning, lastning varaktighet, huden fukt och temperatur, skada livslängd och allmänna hud hygien. Det finns också systemisk faktorer som spelar en roll, till exempel allmänna fysiska kondition, ben och muskel vävnad morfologi och styrka4, patientens ålder, hematologiska åtgärder, kön och även socioekonomiska faktorer inklusive civilstånd, utbildning, och intäkter4,5.
Förebyggande och behandling av PUs förbli betydande utmaningar i SCI patienter. SCI patienter utveckla PUs i ~ 30-40% av fallen, med en återkomst 60-85%, möjligen på grund av svag ärrvävnad och brist på skyddande känsel1. Således, PUs leder ofta till ny sjukhusvistelse för SCI patienter, och totalt sett utgör en betydande ekonomisk börda (80% mer vs. SCI endast) till hälso-och sjukvårdssystemet5,6,7,8,9 , 10.
Till bäst av vår kunskap, där inga studier har utförts i kontrollerade experimentella inställningarna att undersöka inverkan av SCI på PU läkningsprocessen avsaknaden av lämplig djurmodeller. Här beskrivs en reproducerbar och kliniskt relevanta musmodell av PU i huden. Denna modell kan användas för att studera dynamiken i PU debut och efterföljande healing, samt att testa potentiella terapeutiska metoder för att förhindra PU eller förbättra PU healing i samband med SCI.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Alla djurhantering och kirurgiska ingrepp utfördes i enlighet med ett protokoll som godkänts av Rutgers University institutionella djur vård och användning kommittén. Möss matades standard kost och vatten ad lib.
1. beredning av kirurgisk och icke-kirurgisk
- Sterilisera Kirurgiska och icke-kirurgiska instrument i en autoklav.
- Rensa kirurgiska operationsbordet med 70% etanol och värma en värmedyna till 37 ° C.
- Placera värmedyna på operationsbordet och täck det med sterila kirurgiska draperier.
Obs: I alla förfaranden som överlevnad används ”No Touch” tekniken här att upprätthålla sterilitet.
2. beredning av djur och utför den T9-T10 Spinal laminektomi
- Upphandla vuxna (Balb/c) 10 veckor gamla manliga möss. Inducera anestesi i varje djur som använder en inhalator som börjar med 5% isofluran, och sedan minska till 2-3% att upprätthålla sedering för återstoden av förfarandena.
- Bekräfta fullständig anestesi genom att framkalla något svar på en svans/paw nypa inducerad nociception stimulering.
- Raka håret över handryggen (huvud till svans) med en elektrisk klippare och sedan krämen hårborttagningsprodukter (3 min) för att ta bort återstående håret. Slutligen, tvätta dorsum med rinnande vatten våt scrub och häll tillbaka djuren till deras burar.
Obs: Detta är nödvändigt för att undvika ytterligare irritation på hud och kemiska föroreningar samtidigt som huden såra - Nästa dag, gälla oftalmologiska salva i hornhinnor att skydda ögonen från torkning under det kirurgiska ingreppet och sedan skrubba huden med 3 alternativa preparat betadine buskmarker och 70% etanol.
- Med en skalpell, utföra en huden snitt (~1.0-1.5 cm) längs mittlinjen på ryggen på nivån av T8-T12 Kotor.
Obs: Nivån på kotorna identifieras av tillbaka räknar kotan från T13 använda platsen flytande revben som motsvarar T13 kotan11,12. - Avmarkera den subkutan fettvävnaden för att få tillgång till de paraspinal musklerna och sedan dissekera dem långsamt för att exponera de spindelkrabba processer och bladskivan på båda sidor.
Obs: Gör proceduren mycket försiktigt för att undvika överflödigt blödning eller någon skada på ryggmärgen, på denna punkt. - Utföra en laminektomi för att exponera ryggmärgen (T9-T10 kotorna) genom att försiktigt dra bort den spinal lamina använder microdissecting pincett.
Obs: Utföra laminektomi så att ett överskott av ryggmärgen utsätts för att underlätta skapandet av skadan. I kontrollgruppen utförs endast laminektomi.
3. utför en T9-T10-komplett ryggmärgsskada
- Med pincett, säkert ryggrads-kolonnen i T8 och hiss upp till överdriva spinal krökning.
- Med fina sax, avsnitt ryggmärgen mellan T9 och T10 kotan ända till golvet i ryggradskanalen, att säkerställa fullständig transection.
- Efter att observera den komplett transection i kirurgiska Mikroskop, applicera en bit av subkutant fett över webbplatsen laminektomi att ge ytterligare skydd på ryggmärgen innan operationsområdet.
- Slutligen, nära såret och sutur paravertebral muskler, ytliga fascia, med kontinuerlig sutur och stäng sedan huden med hjälp av suturen klipp12.
- Post-SCI, iaktta avföring nästa dag. dock hantera urinblåsan genom manuell urinblåsan evakuering.
Obs: Basso mus skala (BMS) kan användas för att övervaka framstegen i bakbenet funktionell återhämtning post-SCI på dag 2 och sedan varje vecka, se kompletterande figur111,12,13.
4. induktion av huden trycksår efter komplett SCI
- Genast efter operationen SCI skrubba ryggen med betadine och 70% alkohol för djuret.
- För en PU nedanför webbplatsen SCI, injicera i dorsala huden nära korsbenet, en mycket liten volym (10 µL) av 0,125% bupivakain lösningen med en 25 G nål på ekvidistanta platser ~0.5-1.0 cm isär, i en ellips runt magnet applikationsstället.
Obs: För en PU ovan webbplatsen SCI, injicera dorsala huden nära regionen livmoderhalscancer. - Lyft ett hudveck på baksidan av musen försiktigt och smörgås det mellan 2 magnetiska skivor (5 × 12 mm diameter, 2.4 g varje, 3800 G magnetisk kraft) (figur 1). 11 , 12
- Omedelbart efter magnet ansökan, återvändande djur till enda burar placeras på återfått en värmedyna tills fullt medvetande är (figur 1).
- Efter 12 h magnet ansökan, lätt söva djuret med isofluran och ta bort magneter. Ta ett fotografi av såret webbplatser, spela in det första utseendemässigt av PU (dag 0 tid punkt). Täck såret med transparent förband film (3M) för att undvika uttorkning eller kontaminering.
5. postoperativ Djurvård, dödshjälp och vävnad samling för histologi
- Omedelbart efter operation, injicera djuret med 1 mL av 0,9% saltlösning subkutant för återfuktning.
- Injicera subkutant buprenorfin-SR (1 mg/kg) omedelbart för analgesi.
- Injicera subkutant djurens dagliga meloxikam (1 mg/kg), och cefazolin (50 mg/kg i 3-7 dagar), och två gånger daglig manuell urinblåsan evakuering.
- Placera djuren i enda burar och tillhandahålla lättillgänglig mat och vatten ad libitum. Möss med komplett SCI kan gå med sina framben och närma sig mat och vatten utan problem.
- Ta bort kirurgiskt klipp 7 dagar efter SCI kirurgi.
- Vid önskade tidpunkter efter SCI och huden såra, avliva djur av CO2 inandning (3-5 min), enligt de riktlinjer som AVMA på dödshjälp14.
- Samla sårade hud prover, fixa i 10% formalin för 24 h och sedan lagra i 70% etanol vid 4 ° C tills snittning.
- För att bearbeta vävnader, bädda in i paraffin och generera tunnslip (5 µm) på en mikrotom. Färgas med hematoxylin och eosin (H & E) för att visualisera vävnad morfologi (figur 3). För immunohistokemi studier (figur 4), fläcken sektioner med lämpliga antikroppar för Ki67 (spridning), CD31 (angiogenes), och alpha-smooth muscle aktin (α-SMA) som beskrivs i Kumar et al.12
Obs: Bild analys programvara kan användas för att kvantifiera bild funktioner12.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Detta protokoll skapar en PU i fastställandet av komplett SCI. kort (som illustreras i figur 1), alla möss med eller utan komplett SCI tolereras magneterna mycket väl, som återstod i sin utgångsposition för hela 12 h (figur 1 c, 1 d, 1f, 1 h ). Alla möss utvecklat två cirkulära sår åtskilda av en bro av normal vävnad (figur 1e, 1 g, 1i). Den första skadade Svaren var liknande hos möss utan SCI (figur 1e) eller med SCI under webbplatsen SCI (figur 1 g) eller över webbplatsen SCI (figur 1i).
Figur 2 visar försvinnandet av epidermis av dag 3 post magnet borttagning och dess reappearance av dag 7, om än med en betydligt långsammare migration i sår skapade under nivån för SCI i SCI möss.
Tryck såren var graderade enligt tidigare publicerade kriterier12. Figur 3 och figur 4 skildra de läkande funktionerna i SCI och styra icke-SCI möss. SCI gruppen uppvisade långsammare läkning, större ärr området, tunnare epidermis och dermis och lägre densitet av prolifererande celler (Ki67+ celler), blodkärl (CD31+ celler), och alpha-smooth muscle aktin (α-SMA+) i hudsår 11 , 12.
När hudsår skapades ovanför SCI, som visas i figur 5, ingen förändring i läkningstiden, epidermal och dermal sågs tjocklekar eller ärr område jämfört med icke-SCI kontroll.
Figur 1 : Experimentella proceduren för att skapa tryck sår i icke-SCI (n = 3) och slutföra-SCI möss (n = 3). Efter 1 veckas tillvänjning i laboratoriet, möss var rakade och avhåras (en). Schematisk bild av magnetisk skiva (M) placering (b, modifierad från Stadler et al.15). Placering av magnetiska skivor på huden dorsum av en normal mus och dess aktivitet efter återhämtning från anestesi i buren ( c,d). I SCI möss, skivor kan placeras nedanför (f) eller över (h), SCI webbplats. Området av magnet-inducerad hudskada syns omedelbart efter 12 h M ansökan, som visar 2 sår åtskilda av en intakt hud bro i icke-SCI (e) och SCI möss (g, jag). Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Figur 2 : Hud sår histologi (H & E fläcken) och epidermal såret bredd. På dag 3 och dag 7 efter M ansökan offrades en uppsättning möss i icke-SCI (Ctrl + M) och slutföra-SCI (SCI + M) för att studera det tidiga effekter M-inducerad ischemi och reperfusion. Pilarna visar epidermal såret kanterna, ligger där epitelial slemhinnan tunnar och försvinner. Skalstapeln = 1 mm. Epidermal såret bredd mätt i varje grupp (n = 3 vid varje tidpunkt) är representerad i det nedre panelen bar diagrammet. Statistisk signifikans bestäms av Student t-test. * p < 0,05 och ** p < 0,01. Data presenteras som menar ± SEM (standardfelet för medelvärdet). Denna siffra har ändrats med tillstånd från den tidning av Neurotrauma, 35, 6, 815-824, (2018), utgiven av Mary Ann Liebert, Inc., New Rochelle, NY12. Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Figur 3 : Inverkan av komplett SCI på M-inducerad PU utveckling och helande. (en) representativa bilder av hudsår i icke-SCI (Ctrl + M) och slutföra-SCI (SCI + M) möss efter PU induktion under 21 dagar. Skalstapeln = 1 cm. (b), kvantifierade sår bilder visar andelen sårslutning som funktion av tiden. (c, d) Representativa bilder av läkta sår visar området ärr i icke-SCI och SCI möss. (e), kvantifierade ärr område i icke-SCI kontra SCI möss. (f, g) Representativa histologi av läkta sår hud (H & E färgning) visar epidermis (E, dubbla pilarna), dermis (D, stora dubbla pilarna) och fett lager (F). Skalstapeln = 100 µm. (h), kvantifiering av epidermal och dermal tjocklekar av läkta sår på tiden av sårslutning (21 dagar för icke-SCI och 35 dagar för SCI möss). Data presenteras som mean±SEM. statistisk signifikans bestäms av ANOVA följt av post-hoc-Fishers LSD test och Students t-test. * p < 0,05, ** p < 0,01, och *** p < 0,001. Denna siffra har varit omtryckt med tillåtelse från den tidning av Neurotrauma, 35, 6, 815-824, (2018), utgiven av Mary Ann Liebert, Inc., New Rochelle, NY12. Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Figur 4 : Uttryck av Ki67, CD31 och en SMA i hudsår av icke-SCI och SCI möss. Såret vävnader skördades efter sårslutning, nämligen på dagar 21 (Control + M) och 35 (SCI + M) post-PU induktion. Representativa bilder av 5 µm tjocka sektioner färgas med anti-Ki67, anti-CD31 eller anti-α-SMA och visualiseras med ett 40 x-objektiv. Representativa bilder av icke-SCI (a, d, g) och SCI (b, e, h) möss visar fördelningen av Ki67+, CD31+, och α-SMA+ (brun fläck, röda pilarna peka på vissa färgade områden) . Området % positiva i uttryck som erhållits genom bildanalys jämförs mellan grupperna (c, f, jag). Området var i genomsnitt från tre 40 x fält (två från såret kanter) och en från såret center per avsnitt (2/mus, 3 möss i varje grupp). Data presenteras som medelvärde ± SEM. statistisk signifikans bestämdes av Students t-test. Denna siffra har varit omtryckt med tillåtelse från den tidning av Neurotrauma, 35, 6, 815-824, (2018), utgiven av Mary Ann Liebert, Inc., New Rochelle, NY12. Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Figur 5 : Inverkan av SCI utveckling och läkning av sår ovanför SCI platsen. Representativa bilder av sår i icke-SCI (Ctrl + M) och SCI (SCI + M) möss under observationsperioden (en). Skalstapeln = 1 cm. Området ärr på dag 21 representeras av cirklar (a) och medelvärdet var i icke-SCI och SCI möss (b). Kvantifierade såret bilder visar andelen sårslutning som funktion av tiden (c). Representativa histologi av läkta hudsår visar epidermis (E, liten dubbelpil) och dermis (D, stora dubbla pilen). Skalstapeln = 100 µm (d). Kvantifiering av epidermal och dermal tjocklekar av läkta hudsår på såret stängningen tid (dag 21). Data presenteras som medelvärde ± SEM. statistiska betydelse bestäms av ANOVA följt av posthoc Fishers LSD test, eller Student t-test. NS-statistiskt icke-signifikant. Denna siffra har modifierats och återges med tillstånd från den tidning av Neurotrauma, 35, 6, 815-824, (2018), utgiven av Mary Ann Liebert, Inc., New Rochelle, NY12. Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Kompletterande bild 1: Motor funktion i SCI möss bedömdes med hjälp av BMS poäng efter skada dag 2 och sedan veckovis. BMS poäng på dag 2 och vecka 5 var 0.058 ±0.058 (median 0-ingen rörelse, n = 17) och 0.35±0.12 (n = 17, median-0). Data representeras som mean±SEM. Denna siffra har modifierats och återges med tillstånd från den tidning av Neurotrauma, 35, 6, 815-824, (2018), utgiven av Mary Ann Liebert, Inc., New Rochelle, NY12. Vänligen klicka här för att ladda ner denna siffra.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Protokollet i denna studie beskriver en ny experimentell modell av PUs att utvärdera effekterna av SCI på sårläkning. Huden PUs förmåddes via en 12 h tillämpningen av två 12 mm diameter skiva magneter på en dorsal hudveck, antingen ange ovanför eller nedanför SCI webbplatsen. Data visar att SCI saktar ner huden sårläkning hos möss. Ännu viktigare, dessa observationer gjordes specifikt i hudsår under innervation SCI, som sår gjorde ovanför SCI, och således som förblev innerverade, var i stort sett opåverkad i deras helande mönster jämfört med icke-SCI möss.
Det PU-protokollet som beskrivs häri är baserad på en tidigare publicerad metod som används i möss, där svagare magneter (1000 Gauss) tillämpades i tre cykler av 12 h magnet ansökan avgränsade med 12 h utan magnet15. Inledningsvis jämfört vi med en, två och tre 12 h cykler av magnet ansökan. En nackdel med att använda upprepade ansökningar är att varje gång som särskild försiktighet måste vidtas för att lossa magneten från hudvecket och återanvända den på exakt samma plats. En enda ansökan är därför mycket enklare och räckte för att skapa en PU i mus dorsala hudvecket. Annars denna metod kräver inte en komplex enhet, försämra inte djurens rörelser och är mycket reproducerbara. Studier med olika magnet storlekar, former och eller styrkor eller försöker skapa PUs i olika anatomiska platser kan behöva optimera protokollet. Som i alla hud sår helande studier är det viktigt att korrekt tillämpa och regelbundet byta plasten som täcker för att undvika uttorkning och förorening av såret sängen.
Mekanismen av PU-formationen i denna modell bygger på den tryckkraft mellan två magneter, vilket förväntas väsentligen överstiga kapillär och venösa perfusion tryck i huden, och har tidigare dokumenterats väl inducera lesioner i större djur16. Använda en enda 12 h cykel skapade en hudsår som haft skada sträcker sig djupt in i dermis, vilket motsvarar steg I och II enligt standardkriterier15. En begränsning av denna teknik är att vi inte kunde få ett stadium III-IV PU. Därför kunde man inte studera medverkan av muskler och ben i PU utveckling och läkning utan betydande ändringar av vår nuvarande modell. Dessutom PUs genererar vi läka spontant och, därför, representerar troget inte en kronisk PU som kan ses hos patienter. Intressant, dock resulterat metoden i en PU inledande liknande storlek som avslutades med liknande dynamics som vanligen används 1 x 1 cm fullhudsskador excisional hudsår. PU induktion metoden besparar den underliggande panniculus carnosus, medan det är helt bort i excisional modellen. Det framgår således, att den panniculus carnosus inte spelar en viktig roll i såret och stängning, som, på möss och andra gnagare, primärt sker via kontraktion medieras av fibroblaster och myofibroblaster i livskraftiga dermis omger sårområdet, med lite ärr bildas17.
Platsen för PU induktion, ovanför eller nedanför SCI, stör inte huden snittet används för åtkomst till platsen för SCI. Metoden kan därför appliceras lätt nedanför eller ovanför nivån för SCI, vilket möjliggör studier som kan skilja lokalen vs. systemiska effekter av SCI på sårläkning. Medan icke-SCI djur fortsätter att gå upp i vikt efter PU induktion, är tillväxten av SCI djur hämmad. Trots detta djupgående systemisk förändring påverkades inte sårläkning när PU skapades över SCI nivå. Denna modell kan därför användas för att bättre förstå rollen som lokala innervationen i sårläkning. Som i alla studier som involverar SCI, är det viktigt att ge särskild vård och övervakning till post-SCI möss, som kräver manuell tömning av urinblåsan, övervakning av tarm villkor och profylaktisk antibiotikabehandling11,12 .
SCI patienter utmanas kraftigt även med bästa sjukhusvård och utbildning, och huden PUs ge betydande kostnader för det amerikanska sjukvårdssystemet. Denna modell tillåter side-by-side utvärdering av effekten av SCI på PU mallutveckling och healing, som ger en plattform för att testa olika behandlingsstrategier som kan hjälpa PU läkning hos SCI patienter.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Författarna har något att avslöja.
Acknowledgments
Detta arbete var delvis stöds av New Jersey kommissionen på ryggmärgsforskning (CSCR15IRG010), US Department of Defense (SC160029) och Yale Institutionen för kirurgi Ohse Grant forskningsprogrammet. Vi tackar Sean Olsson från W.M. Keck Center for Collaborative neurovetenskap, Rutgers för tekniskt bistånd.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Magnets | Master Magnetcs, Inc., Castle Rock, CO | CD14C | 3800 G Magnetic force |
| Mice standard diet | PMI Nutrition International, Brentwood, MO | Standard Food Pellet | |
| Isoflurane | HENRY SCHEIN Animal Health | SKU 029405 | |
| ImageJ | NIH, Bethesda, MD | Image Analysis Software | |
| BETADINE Surgical Scrub | HENRY SCHEIN Animal Health | ||
| Ophthalmic Ointment | HENRY SCHEIN Animal Health | SKU 008897 | |
| NAIR-Hair Remover Lotion | Church & Dwight Co., Inc. Princeton, NJ | ||
| ELOXIJECT (meloxicam) Injection | HENRY SCHEIN Animal Health | SKU 049755 | 5 mg/mL, 10 mL |
| Cefazolin Sodium | HENRY SCHEIN Animal Health | SKU 054846 | 1 g, 10 mL bottle |
| Buprenorphine-SR | ZooPharm, Windsor, CO | - | - |
| 0.9% Sodium Chloride Injection USP | BRAUN, Irvine, CA | S8004-5384 | |
| 10% Neutral Buffered Formalin | VWR, Radnor, PA | 16004-130 | |
| BALB/C Male Mouse | Charles River Lab., Wilmington, MA | 28 | |
| Sterile Cotton Tipped Applicator | Puritan, Guilford, ME | SKU#: 25-806 | |
| Michel Suture Clips | Fine Science Tools (USA) Inc., Foster City, CA | 12040-01 | |
| Surgical Suture, U.S.P. | Henry Schein Animal Health | 101-2636 |
References
- Rappl, L. M. Physiological changes in tissues denervated by spinal cord injury tissues and possible effects on wound healing. International Wound Journal. 5 (3), 435-444 (2008).
- Salcido, R., Popescu, A., Ahn, C. Animal models in pressure ulcer research. The Journal of Spinal Cord Medicine. 30 (2), 107-116 (2007).
- Mak, A. F., Zhang, M., Tam, E. W. Biomechanics of pressure ulcer in body tissues interacting with external forces during locomotion. Annual Review of Biomedical Engineering. 12, 29-53 (2010).
- National Pressure Ulcer Advisory Panel. Prevention and Treatment of Pressure Ulcers: Clinical Practice Guideline. , Cambridge Media. Osborne Park, Western Australia. (2014).
- Marin, J., Nixon, J., Gorecki, C. A systematic review of risk factors for the development and recurrence of pressure ulcers in people with spinal cord injuries. Spinal Cord. 51 (7), 522-527 (2013).
- Krause, J. S. Skin sores after spinal cord injury: relationship to life adjustment. Spinal Cord. 36 (1), 51-56 (1998).
- Redelings, M. D., Lee, N. E., Sorvillo, F. Pressure ulcers: more lethal than we thought? Advances in Skin & Wound. 18 (7), 367-372 (2005).
- Kruger, E. A., Pires, M., Ngann, Y., Sterling, M., Rubayi, S. Comprehensive management of pressure ulcers in spinal cord injury: current concept and future trends. The Journal of Spinal Cord Medicine. 36 (6), 572-585 (2013).
- Lala, D., Dumont, F. S., Leblond, J., Houghton, P. E., Noreau, L. Impact of pressure ulcers on individuals living with a spinal cord injury. Archives of Physical Medicine and Rehabilitation. 95 (15), 2312-2319 (2014).
- Li, C., DiPiro, N. D., Krause, J. A latent structural equation model of risk behaviors and pressure ulcer outcomes among people with spinal cord injury. Spinal Cord. 55 (6), 553-558 (2017).
- Kumar, S., Yarmush, M. L., Berthiaume, F. Impact of complete spinal cord injury on neovascularization and tissue granulation in mouse model of skin pressure ulcers. Journal of Neurotrauma. 34 (13), A72-A73 (2017).
- Kumar, S., Yarmush, M. L., Dash, B. C., Hsia, H. C., Berthiaume, F. Impact of complete spinal cord injury on healing of skin ulcers in mouse models. Journal of Neurotrauma. 35 (6), 815-824 (2018).
- Basso, D. M., Fisher, L. C., Anderson, A. J., Jakeman, L. B., McTigue, D. M., Popovich, P. G. Basso Mouse Scale for locomotion detects differences in recovery after spinal cord injury in five common mouse strains. Journal of Neurotrauma. 23 (5), 635-659 (2006).
- Leary, S., et al. AVMA Guidelines for the Euthanasia of Animals. , American Veterinary Medical Association. Schaumburg, Illinois, USA. (2013).
- Stadler, I., Zhang, R. Y., Oskoui, P., Whittaker, M. S., Lanzafame, R. J. Development of a simple, noninvasive, clinically relevant model of pressure ulcers in the mouse. Journal of Investigative Surgery. 17 (4), 221-227 (2004).
- Peirce, S. M., Skalak, T. C., Rodeheaver, G. T. Ischemia-reperfusion injury in chronic pressure ulcer formation: a skin model in the rat. Wound Repair and Regeneration. 8 (1), 68-76 (2000).
- Wong, V. W., Sorkin, M., Glotzbach, J. P., Longaker, M. T., Gurtner, G. C. Surgical approaches to create murine models of human wound healing. Journal of Biomedicine and Biotechnology. 2011, 969618-969625 (2011).
