2011년 9월 5일
트윈 - 투 - 쌍둥이 수혈 증후군과 트윈 빈혈 polycythemia 시퀀스는 perinatal 의학의 두 잠재적으로 치명적인 문제가 있습니다. 두 질환은 monochorionic 쌍둥이와 placental 혈관 anastomoses을 통해 불균형 혈액의 흐름에서 결과 발생합니다. 우리는 정확하게 출산 후 placental 혈관의 색깔 염료의 주입을 사용하여 혈관 anastomoses의 존재를 평가하는 간단한 프로토콜을 제공합니다.
다음 실험의 전반적인 목적은 혈관 문합부의 색소 염료 주입을 통해 단일융모막 태반의 혈관 구조를 연구하는 것입니다. 획득 후, 태반을 먼저 세척하고 다듬습니다. 그런 다음 제대 혈관에 카테터를 삽입합니다.
혈관 문합의 수, 유형 및 크기를 확인하기 위해 카테터를 통해 다음 색소 염료를 주입합니다. 최종적으로, 단일 융모막 태반에서 나타나는 다양한 혈관 문합 패턴을 염색된 혈관에서 식별할 수 있습니다. 이 방법은 쌍태아 수혈 증후군(TTTS)에 대한 통찰을 제공할 수 있습니다.
또한 태아 빈혈, 다혈구증 시퀀스, TAPS 또는 선택적 자궁 내 성장 제한과 같은 다른 단일융모막 쌍둥이 태반에 대한 중요한 정보를 제공할 수 있습니다. 일반적으로 이 방법에 익숙하지 않은 개인은 제대 혈관의 카테터 삽입에 어느 정도의 전문성과 학습 과정이 필요하기 때문에 어려움을 겪을 수 있습니다. 저희 태아 치료 센터의 동료와 함께 이 절차를 시연하겠습니다.
태반의 모체면과 태아면을 살펴 완전성 또는 파열 여부를 검사합니다. 분리막의 일부를 병리과로 보낼 수 있습니다. 융모막막의 유형을 확인하기 위해 태반을 플라스틱 용기에 담아 최종 검사 및 염색약 주입 시까지 최대 1주일 동안 냉장 보관할 수 있으며, 태반을 미온수로 세척합니다. 그다음, 주변막을 다듬어 줍니다.
교차 분리막을 제거하고 양막을 벗겨냅니다. 이제 각 탯줄을 탯줄 삽입부로부터 약 5cm 거리에서 절단합니다.
제대 및 태반 혈관에서 혈전을 조심스럽게 짜낸 후, 제정맥을 확인합니다. 캐뉼라 삽입과 이어지는 D 주입 단계가 이 절차에서 가장 어렵습니다. 정확한 주입을 위해서는 세심한 주의와 인내심이 필요합니다.
거친 조작, 특히 카테터 삽입 과정에서의 부주의는 혈관 밖으로 염료가 누출되는 결과를 초래할 수 있습니다. 염료의 확산을 돕기 위해, 한 사람이 주입하는 동안 다른 사람이 염료가 혈관 내로 잘 들어갈 수 있도록 부드럽게 마사지하는 것을 권장합니다. 핀셋을 사용하여 위통로(false passage)가 생기지 않도록 주의하며 적절한 크기의 카테터로 제정맥을 삽관하십시오. 동맥의 내강을 넓혀줍니다.
다시 한번, 가성 통로(false passage)가 생기지 않도록 주의하십시오. 그런 다음, 더 작은 카테터로 제배동맥 하나에 캐뉼라를 삽입합니다. 다른 탯줄에 대해서도 두 캐뉼라 삽입 단계를 반복하십시오.
제대 혈관을 부드럽게 앞뒤로 마사지하여 카테터 삽입을 용이하게 합니다. 그런 다음, 염료 주입 시 색소 염료의 역류를 방지하기 위해 두 탯줄 주위에 테이프 조각을 묶습니다. 시작하기 전, 서로 다른 색상의 염료를 채운 20 milliliter 주사기 두 개를 준비합니다.
다음으로, 탯줄 하나의 제정맥 카테터와 제동맥 카테터에 각각 주사기를 연결합니다. 그 후 저압을 사용하여 제정맥에 염료를 천천히 주입하며, 이때 보조자가 정맥 내의 염료를 부드럽게 밀어 넣습니다. 염료가 모든 태반 혈관을 채울 수 있도록, 두 쌍둥이의 문합이 서로 연결되는 혈관 적도 근처의 미세 혈관들에 특히 주의를 기울이십시오.
이제 다시 낮은 압력을 가하고 모든 염료가 모든 동맥 공간으로 이동하도록 보조하며 제2의 염료로 제대동맥을 채웁니다. 그런 다음 대비되는 색상의 염료를 20 mL 주사기 두 개에 더 채운 뒤, 이전과 동일한 기술을 사용하여 각 주사기의 내용물을 제대정맥과 제대동맥에 연결하여 주입합니다. 두 번째 탯줄의 경우, 혈관 적도를 주의 깊게 검사하고 문합의 수와 유형을 기록합니다.
직경과 태반 분할 영역을 디지털 사진으로 측정하기 위해 태반 위에 줄자를 놓습니다. 그런 다음 고해상도 디지털 카메라를 사용하여 주입된 태반을 촬영합니다. 쌍둥이의 태반 혈관 구조는 단일융모막 쌍둥이 임신의 유형에 따라 다양하게 나타나는데, 여기의 합병증 없는 정상적인 단일융모막 쌍둥이 임신 태반 사례에서 볼 수 있듯이, 초록색 동맥과 분홍색 정맥으로 표시된 여러 개의 동정맥 또는 AV 문합과 흰색 별표로 표시된 여러 개의 정동맥 또는 VA 문합(파란색 동맥과 노란색 정맥으로 표시됨), 그리고 초록색 별표와 파란색 및 초록색 염료의 혼합으로 확인되며 파란색 별표로 표시된 하나의 커다란 동동맥 또는 AA 문합이 관찰됩니다.
순차적 양수 감소술로 치료받은 일란성 쌍태아 수혈 증후군(TTTS) 임신의 단일 융태반에서는 흰색 별표로 표시된 동정맥(AV)吻合 및 녹색 별표로 표시된 정맥동맥(VA)吻合만이 존재하며, 여기서는 동맥동맥(AA)吻合이 나타나지 않습니다. 이는 선택적 레이저 기술을 이용한 혈관 吻合의 내시경적 레이저 응고술 이후의 A-T-T-T-S 태반으로, 흰색 별표로 표시된 작은 잔류 吻合이 실수로 개존된 상태입니다. 선택적 레이저 기술에서는 혈관 吻合을 먼저 식별한 후 하나씩 순차적으로 응고시킵니다. 이 그림은 솔로몬 기술(Solomon technique)을 이용한 내시경적 레이저 응고술 이후의 또 다른 TTTS 태반을 보여주며, 이 기술에서는 각각의 개별 吻合을 식별하고 응고시킨 후 태반의 한쪽 가장자리에서 다른 쪽까지 전체 혈관 적도 부위를 응고시켰습니다. 쌍태아 빈혈-다혈구증 시퀀스(TAPS)입니다.
태반은 소수의 아주 작은 동정맥 문합(AV anastomosis)이 존재하는 것이 특징입니다. 그 예가 여기 제시되어 있으며, 흰색 별표로 표시된 아주 작은 문합들만 보입니다. 태반의 수혜자 측 부분은 여기 태반의 왼쪽에 보이는 것처럼 흔히 충혈되어 있는 반면, 여기 오른쪽에 보이는 기증자 측 태반 부분은 창백합니다.
여기 보이는 것은 한쪽 태아에게 선택적 자궁 내 성장 제한이 나타난 쌍둥이 임신의 단일 융모막 태반입니다. 성장 제한이 있는 태아는 평균적인 탯줄 삽입 부위를 가졌으며, 태반 점유 면적이 훨씬 작았습니다. 흰색 별로 표시된 커다란 동맥-동맥(AA) 문합과 녹색 별로 표시된 커다란 동맥-정맥(AV) 문합이 명확하게 보입니다. 출생 체중 차이가 있는 쌍둥이의 단일 융모막 태반에서는 AA 문합이 자주 관찰되며, 단일 융모막 단일 양막 태반은 이 그림에서 보는 바와 같이 두 탯줄 삽입 지점 사이의 거리가 짧은 특징적인 혈관 구조를 가집니다.
초록색, 파란색, 흰색 별로 각각 표시된 여러 개의 AV VA 및 두 개의 AA 문합과 두 건삭 삽입 지점 사이의 짧은 거리를 참고하십시오. 이 시술을 시도할 때 AV 문합은 매우 작아 시각화하기 어려울 수 있다는 점을 기억하는 것이 중요합니다. TTTS에 대한 레이저 수술 후 작은 잔존 AV 문합의 존재 여부를 평가하려면 주입 절차를 매우 세심하게 수행해야 합니다.
이 기술은 태아 외과 분야의 연구자들이 TTTS를 동반한 단일 융모막 쌍태 임신에 대한 레이저 응고술 기법을 탐구하고 개선할 수 있는 길을 열어주었습니다.
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본 연구는 혈관 문합을 평가하기 위해 색소 염료 주입법을 통해 단일융모막 태반의 혈관 구조를 조사합니다. 이 방법은 쌍태아 수혈 증후군과 쌍태아 빈혈-다혈구증 시퀀스에 대한 이해를 높이는 것을 목표로 합니다.
태반 혈관 문합증에 대한 이해는 단일 융모막 쌍둥이에서 혈류 불균형으로 인해 발생하는 쌍태아 수혈 증후군(TTTS) 및 쌍태아 빈혈-다혈구증 서열(TAPS)의 병태생리를 규명하는 데 매우 중요합니다. 이 염료 주입법은 동맥-동맥, 정맥-정맥 및 동맥-정맥 문합을 시각화하고 특성화하는 간단한 접근 방식을 제공하며, 태아 순환 장애에 대한 기전적 통찰을 지원합니다. 본 프로토콜을 통해 주산기 전문의와 연구자는 레이저 수술 후 잔존 문합을 평가함으로써 고위험 쌍둥이 임신에서의 임상적 의사 결정에 필요한 정보를 얻을 수 있습니다.
이 방법은 태반 혈관 구조의 해부학적 특성 분석을 가능하게 함으로써, 쌍둥이 수혈 증후군의 기전 모델에 정보를 제공하고 혈관 문합을 대상으로 하는 치료적 개입의 평가를 안내하여 발견의 연속체(discovery continuum) 내에서 그 역할을 수행합니다.