Água (Palmatória) Variantes de água rasa testes de labirinto em ratos

O objetivo deste procedimento é estudar a cognição espacial em camundongos usando variações do labirinto aquático. Ao contrário de outros modelos, o nível da água é raso o suficiente para permitir que o mouse reme. Em vez de nadar, um rato é colocado no centro do Mae e pode procurar a saída.

As saídas da piscina infantil estão localizadas nas laterais para imitar uma resposta de fuga mais natural. Uma vez localizada a saída correta, o animal é removido e os dados que representam a capacidade cognitiva espacial são registrados. A principal vantagem da piscina infantil ou do labirinto infantil sobre as técnicas existentes para testar a cognição espacial, como, por exemplo, o labirinto aquático maus ou o labirinto dos celeiros, é que é muito menos estressante do que o labirinto mo, certamente, e você não obtém dicas locais ou de fábrica confusas como faria nos celeiros. Labirinto.

Três desenhos sucessivos foram feitos da marca da piscina infantil. Uma é uma piscina circular, de 85 centímetros de diâmetro com 12 saídas verdadeiras ou forçadas. A marca dois é uma piscina octogonal, com 86 centímetros de diâmetro com oito saídas verdadeiras ou de força colocadas nos cantos.

Por fim, a marca três é uma piscina agonal do deck, com 120 centímetros de diâmetro com 12 saídas verdadeiras ou de força colocadas nos cantos. Cada projeto é construído sobre uma base branca e é cercado por paredes transparentes feitas de plástico acrílico transparente. A piscina é preenchida com água de 20 a 25 graus Celsius para reduzir o estresse de natação às vezes encontrado quando um rato é introduzido em uma piscina mais profunda.

O nível da água é ajustado a uma profundidade de cerca de dois centímetros para incentivar o comportamento de remo. Para facilitar uma resposta de fuga mais natural, o animal pode escapar para um tubo seco feito de tubo de plástico preto colocado na lateral do aparelho. As saídas falsas são ocluídas por um tampão de madeira preto, enquanto a saída verdadeira é aberta e unida a um tubo adicional.

Ao entrar na saída verdadeira, o mouse pode ser rapidamente e dramaticamente devolvido à sua gaiola inicial enquanto estiver dentro deste tubo. Como acontece com todos os testes de memória espacial, o mouse depende de pistas de sala vistas através das paredes transparentes do aparelho. Prateleiras, armários e formas de plástico preto devem ser posicionados nas paredes para servir como dicas visuais distintas.

Para iniciar um teste, coloque um mouse no centro da piscina de frente para uma das quatro posições no perímetro, nove 12 ou três horas. Se o tubo de escape estiver às seis horas, solte o animal rapidamente quando ele estiver logo acima da água, em vez de soltá-lo lentamente, o que pode fazer com que ele lute e prejudique sua orientação inicial. Se o mouse não conseguir escapar por 60 segundos, guie-o manualmente até a saída.

Usando pás de perspex transparentes. Registre o tempo para encontrar a saída e quaisquer erros. Os erros são definidos como chegar ao comprimento de uma cabeça de um tubo ou passar perto da saída real sem entrada.

O cronômetro é interrompido quando toda a cabeça entra no tubo. 10 tentativas são executadas para cada camundongo com um descanso de cinco minutos entre as tentativas. Em seguida, o modelo de piscina infantil foi aplicado ao labirinto em Y.

O aparelho consiste em três braços feitos de plástico transparente, cada um com 30 por oito por 20 centímetros. Este é montado em uma base branca e preenchido com água rasa. Outra vez. Há apenas uma saída verdadeira com os outros dois braços terminando em saídas falsas.

Para iniciar um teste no remo y labirinto coloque um mouse no final de um dos braços fechados voltado para longe do centro. Se o mouse não conseguir sair por 60 segundos, guie-o manualmente até a saída. Usando pás Clear Perspex, meça o tempo total para sair e o número de erros que o remo y labirinto pode ser usado sem água.

Para testar a memória de novidade espacial, comece colocando uma fina camada de cama de lascas de madeira no chão do labirinto em Y. Para enriquecer o ambiente olfativo, permita que um ou dois camundongos não experimentais explorem o labirinto por alguns minutos antes do início do experimento. Em seguida, remova as pistas olfativas misturando a serragem.

Isso ajuda a garantir que o próximo mouse tenha que confiar em dicas espaciais. Insira uma porta de guilhotina transparente para cobrir o orifício de saída na extremidade do braço de saída e uma porta de guilhotina opaca para selar o braço dos outros dois. Durante a primeira fase do teste, coloque o mouse no braço inicial e deixe-o explorar livremente.

Registre o número de entradas e os tempos gastos em cada amuleto. Depois que o rato for explorado por cinco minutos, remova o animal e levante a porta opaca para permitir o livre acesso aos três braços. Reintroduza o mouse no braço inicial e observe-o por dois minutos.

Observe o número de entradas e o tempo gasto em cada braço. Controle. Os ratos devem se lembrar dos dois primeiros braços e passar mais tempo. No novo braço anteriormente inacessível, as lesões do hipocampo prejudicam muito o aprendizado na piscina infantil.

Neste exemplo, o desempenho no labirinto seco revelou deficiências na memória de novidade espacial em camundongos com nocaute do receptor de glutamato. Subunidades receptoras de um AMPA. Ao contrário das medidas de comprimento do caminho e tempo de fuga no labirinto aquático de Morris, a taxa de erro na piscina infantil para camundongos com lesão do hipocampo permaneceu constante durante todo o período de treinamento.

Portanto, isso representa uma medida pura de memória espacial em oposição ao tempo de escape ou comprimento do caminho, o que diminui os ratos se familiarizam com os elementos não espaciais da tarefa. A medida de erros também fornece uma maior magnitude de diferença entre camundongos deficientes e controles. Ao tentar os testes de piscina infantil ou Y MAs, é importante lembrar sempre de sentar na mesma posição, porque os experimentos por si só atuam como uma dica espacial.

Certa vez, recebemos visitantes da EMBO, Organização Europeia de Biologia Molecular, incluindo dois laureados nobres, e a presença deles lá interrompeu o desempenho dos camundongos. Portanto, antes de começar a piscina infantil, por favor, retire todos os ganhadores do Prêmio Nobel das imediações.