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Fundamentos de la biología celular

Esta colección proporciona una ojeada en el campo de la biología de la célula y perfila cinco fenómenos celulares importantes: División de célula; motilidad; endocitosis y exocitosis; metabolismo; y muerte celular.

  • Cell Biology

    10:02
    Una introducción a la división celular

    División celular es el proceso por el cual una célula madre divide y da lugar a dos o más células hijas. Es un medio de reproducción de organismos unicelulares. En organismos multicelulares, la división celular contribuye al crecimiento, desarrollo, reparación y la generación de las células reproductivas (espermatozoides y huevos). División celular es un proceso estrechamente regulado, y aberrante la división celular pueden causares, especialmente cáncer. Introducción de Zeus a división celular cubrirá una breve historia de los descubrimientos de hito en el campo. Entonces discutimos varias preguntas claves y métodos, tales como análisis de ciclo celular y proyección de imagen de celular en vivo. Finalmente, nos muestra algunas aplicaciones actuales de estas técnicas en la investigación de la división celular.

  • Cell Biology

    09:31
    Análisis de ciclo celular

    Ciclo celular se refiere al conjunto de eventos a través del cual una célula crece, replica su genoma y en última instancia, se divide en dos células hijas a través del proceso de la mitosis. Porque la cantidad de ADN en una célula muestra cambios característicos en todo el ciclo, conocidas como análisis de ciclo celular pueden ser usado para separar una población de células según las diferentes fases del ciclo celular en que se encuentranas, basado en su contenido de ADN diferente.Este video cubre los principios del análisis del ciclo celular mediante tinción de ADN. Vamos a revisar un protocolo generalizado para realizar esta tinción utilizando bromodeoxiuridina (BrdU, una análogo de la timidina que se incorpora en hebras de ADN recién sintetizados) y yoduro de propidio (PI, un tinte de ADN que tiñe todo ADN), seguido por el análisis de las células teñidas con citometría de flujo. En citometría de flujo, una suspensión unicelular de células fluorescencia etiquetadas se pasa a través de un instrumento con un haz de láser y se lee la fluorescencia de cada célula. Luego discutir cómo interpretar los datos de parcelas de dispersión de citometría de flujo y finalmente, mirar unas cuantas aplicaciones de esta técnica.

  • Cell Biology

    09:56
    Imágenes de células vivas de la Mitosis

    La mitosis es una forma de división celular que material genético de una célula se divide igualmente entre dos células hijas. Mitosis puede dividirse en seis fases, durante cada uno de los cuales los componentes de la célula, tales como sus cromosomas, muestran visualmente distintas características. Avances en fluorescencia en vivo la proyección de imagen de la célula han permitido a los científicos estudiar este proceso con gran detalle,ona penetraciones importantes en el control biológico de este proceso y cómo podría ir mal en enfermedades como el cáncer.Comenzamos este video rompiendo las fases de la mitosis y la introducción de algunas consideraciones importantes para una visualización óptima del proceso usando proyección de imagen de células vivas. Luego caminamos a través de los pasos para ejecutar una mitosis celular directo imágenes experimento y discutir diversos métodos de análisis, incluyendo la generación de montajes, películas y recreaciones en 3D. Por último, echamos un vistazo a cómo visualizar el proceso de mitosis se puede aplicar a responder preguntas en biología de la célula.

  • Cell Biology

    08:51
    Una introducción a la motilidad celular y la migración

    Migración y motilidad celular desempeñan importantes funciones en ambos normal de la biología y en la enfermedad. Por un lado, la migración permite generar complejos tejidos y órganos durante el desarrollo de las células, pero por otro lado, los mismos mecanismos son utilizados por las células del tumor y extensión en un proceso conocido como metástasis del cáncer. Uno de los mecanismos celulares primarios que permiten el movimiento celulard intracelular de miosina y actina moléculas, juntas conocidos como "actomyosin", que crea una fuerza contráctil para tirar de una celda en distintas direcciones.En este video, JoVE presenta una descripción histórica del campo de la migración de la célula, observando cómo trabajo en la contracción muscular conducida al descubrimiento del aparato actomyosin. A continuación exploramos algunas de las preguntas que los investigadores todavía se preguntan sobre la motilidad celular y revisión las técnicas utilizadas para el estudio de diferentes aspectos de este fenómeno. Por último, veremos cómo los investigadores están estudiando actualmente la migración de la célula, por ejemplo, para entender mejor la metástasis.

  • Cell Biology

    08:23
    El ensayo de migración Transwell

    Migración de las células en respuesta a señales químicas es crucial para los Estados de desarrollo, inmunidad y enfermedades como el cáncer. Para cuantificar la migración celular, un simple ensayo fue desarrollado en 1961 por el Dr. Stephen Boyden, que ahora se conoce como el ensayo de migración transwell o ensayo de cámara de Boyden. Esta configuración consiste en un inserto que separa los pocillos de una placa de pocillos en compartimentos e inferior. Se siembran las células cuya migración debe ser estudiado en el compartimiento superior y la solución chemoattractant se coloca en el compartimento inferior. Después de la incubación, contar las células en el compartimiento inferior permite la cuantificación de la migración inducida por atrayentes. Este video reseña el montaje experimental utilizado para estudios de migración celular. Entonces a destacar algunas consideraciones claves y esbozar un protocolo generalizado para correr un experimento que involucra las células adherentes. Por último, repasamos varias adaptaciones de esta configuración se utiliza actualmente para estudiar diferentes factores que afectan la migración.

  • Cell Biology

    07:57
    Ensayo de invasión utilizando Matrices 3D

    La matriz extracelular (ECM) es una red de moléculas que proporcionan un marco estructural para las células y los tejidos y ayuda a facilitar la comunicación intercelular. Han desarrollado técnicas de cultivo celular tridimensional para modelar con mayor precisión este entorno extracelular para estudio en vitro . Mientras que muchos procesos de la célula durante la migración a través de matrices de 3D son similares a los requeridos movimiento a través de superficies 2D rígidas, incluyendo la adherencia, migración a través de ECM también requiere las células modulan e invadir esta malla polimérica de ECM.En este video, presentamos la estructura y función del ECM y los mecanismos básicos de cómo las células migran a través de él. A continuación, examinaremos el protocolo de un ensayo para la formación del tubo por las células endoteliales, cuyos pasos se pueden generalizar a otros experimentos basados en matrices de 3D. Vamos a acabar explorando varias otras cuestiones biológicas que pueden abordarse usando análisis de invasión de ECM.

  • Cell Biology

    09:26
    Una introducción a endocitosis y exocitosis

    Las células pueden tomar sustancias del medio extracelular por endocitosis y activamente liberar moléculas en ella por exocitosis. Tales procesos incluyen sacos de membrana-limite de lípidos llamados vesículas. Conocimiento de la arquitectura molecular y mecanismos de ambos son clave para entender la fisiología normal de la célula, así como los Estados de enfermedad que ocurren cuando se vuelven defectuosos.

    Este video primeroremos brevemente algunos descubrimientos fundamentales en la historia de la investigación de endo - y exocitosis. A continuación, algunas claves se examinarán cuestiones, seguida por una discusión de los métodos importantes para investigar estos problemas, incluyendo etiquetado celular, ensayos de fusión y proyección de imagen de fluorescencia. Por último, explorará la investigación actual está llevando a cabo por científicos en el campo hoy.

  • Cell Biology

    09:12
    Ensayo de Biotinilación de superficie de la célula

    Una célula puede regular la cantidad de proteínas particulares en su membrana de la célula por endocitosis, después de que proteínas de la superficie de la célula son efectivamente secuestradas en el citoplasma. Una vez dentro de una célula, las proteínas de la superficie pueden ser destruidas o "recicladas" a la membrana. El ensayo de Biotinilación superficial celular ofrece a los investigadores una manera de estudiar estos fenómenos. Laace uso de un derivado de la biotina de molécula pequeña, que puede marcar proteínas de la superficie y luego ser dividido químicamente. Sin embargo, si la proteína de la superficie es endocytosed, el derivado de biotina estará protegido del escote. Por lo tanto, a analizar la etiqueta de biotina endocytosed uncleaved, los científicos pueden evaluar las cantidades de proteínas de la superficie internalizadas.En este video, revisamos los conceptos del ensayo de Biotinilación, adentrarse en la estructura química del derivado de biotina y el mecanismo de su escote. Esto es seguido por un protocolo generalizado de la técnica y por último, una descripción de cómo los investigadores actualmente están usando para estudiar la dinámica de proteínas de superficie de diferentes células.

  • Cell Biology

    08:35
    Tintes de FM en el reciclaje de vesícula

    FM los tintes son una clase de moléculas fluorescentes que ha encontrado su uso importante en el estudio de la vesícula en el proceso de reciclaje. En virtud de una estructura química, estas moléculas se pueden insertar en la hoja exterior de las membranas de bicapa de fosfolípido. Después de la inserción de la membrana, son internalizadas en la célula mediante vesículas de endocitosis y al reciclan estas vesículas hacia la membrana. Desde estos tintes fluorescencia fuertemente en el ambiente hidrofóbico dentro de las membranas y débil en el compartimiento extracelular, los niveles de fluorescencia FM pueden utilizarse para registrar la actividad vesicular durante todo el proceso de reciclaje.Este video proporciona una introducción al uso de tintes de FM en experimentos para examinar la vesícula reciclaje. En primer lugar repasamos la bioquímica de tintes de la FM y cómo sus propiedades permiten su uso en estos experimentos. Vamos entonces a través de un protocolo general para el uso de tintes de FM en tales estudios y finalmente, se discuten algunas investigaciones recientes que hace uso de estas moléculas únicas.

  • Cell Biology

    10:18
    Introducción al metabolismo celular

    En las células, moléculas críticas construidas ensamblando unidades individuales como los aminoácidos o nucleótidos, o desglosadas en componentes más pequeños. Respectivamente, las reacciones responsables de esto se conocen como anabólico y catabólico. Estas reacciones requieren o producen energía por lo general en forma de una "gran energía" molécula llamada ATP. Juntos, estos procesos constituyen "Metabolismo celular" y son característicasde las células sanas, vida.Introducción de Zeus al metabolismo celular revisa brevemente la rica historia de este campo, desde los primeros estudios sobre fotosíntesis a descubrimientos más recientes relacionados con la producción de energía en todas las células. Esto es seguido por una discusión de algunas preguntas claves de los científicos que estudian el metabolismo y los métodos comunes que se aplican para responder a estas preguntas. Por último, exploraremos los investigadores actuales son estudiar alteraciones en el metabolismo que acompañan a trastornos metabólicos, u ocurren después de la exposición a factores de estrés ambientales.

  • Cell Biology

    08:31
    El ensayo de bioluminiscencia de ATP

    En luciérnagas, la enzima luciferase convierte un compuesto llamado luciferin en oxyluciferin y produce como resultado la luz o "luminiscencia". Esta reacción requiere energía derivada del ATP para proceder, por lo que los investigadores han aprovechado de la interacción de luciferin luciferasa para medir los niveles de ATP en las células. Dado el papel del ATP como moneda de la célula de energía, el ensayo de bioluminiscencia de ATP puedecionar la penetración en el metabolismo celular y la salud general de la célula.En este video, Zeus habla sobre respiración celular, específicamente revisar cómo el metabolismo de la glucosa resulta en la producción de ATP. Esto es seguido por los principios de la prueba de bioluminiscencia de ATP y un protocolo generalizado de esta técnica. Por último, un estudio de cómo los investigadores actualmente están usando el ensayo de bioluminiscencia de ATP para evaluar viabilidad celular en una variedad de condiciones experimentales.

  • Cell Biology

    09:07
    Detección de especies reactivas de oxígeno

    Especies reactivas del oxígeno son moléculas químicamente activas, derivados de oxígeno capaces de oxidar otras moléculas. Debido a su naturaleza reactiva, hay muchos efectos deletéreos asociados a la producción de ROS, incluyendo daño estructural para el ADN y otras moléculas biológicas. Sin embargo, ROS puede ser también mediadores de señales fisiológicas. Hay acumulando pruebas que ROS desempeñan un papel importante en todo, desde la factores de transcripción a la mediación de toxicidad inflamatoria que mata patógenos extranjeros y defender el cuerpo.En este video ahondamos en las asociaciones entre el ROS, el metabolismo y la enfermedad. Después de establecer su significado, vamos a discutir los principios y un protocolo de una metodología comúnmente utilizada para medir los niveles de ROS en las células: el uso de fluorescentes no sondas que fluorescente sobre la oxidación. Por último, vamos a revisar algunas aplicaciones actuales de esta técnica en investigación de Biología de la célula.

  • Cell Biology

    10:05
    Una introducción a la muerte celular

    Necrosis, apoptosis y muerte celular autofagia son todas las maneras en que las células pueden morir, y estos mecanismos pueden ser inducidos por diferentes estímulos, tales como lesión de la célula, niveles bajos de nutrientes o proteínas de señalización. Mientras que la necrosis se considera una forma "accidental" o inesperada de la muerte celular, existe evidencia que apoptosis y autofagia son tanto programados como "planificadas" por lass.En este video introductorio, JoVE destaca descubrimientos claves relativas a la muerte celular, incluyendo trabajo reciente realizado en gusanos que ayudó a identificar los genes involucrados en la apoptosis. Luego exploramos cuestiones planteadas por los científicos que estudian la muerte de las células, algunas de las cuales miran muerte diferentes vías y sus interacciones. Finalmente, se discuten varios métodos para evaluar la muerte celular, y observamos cómo los investigadores están aplicando estas técnicas en sus experimentos hoy.

  • Cell Biology

    08:11
    El ensayo TUNEL

    Una de las características de la apoptosis es la fragmentación del ADN nuclear por nucleasas. Estas enzimas son activadas por caspasas, la familia de proteínas que ejecutan el programa de muerte celular. Ensayo de túnel es un método que aprovecha esta característica para detectar células apoptóticas. En este ensayo, una enzima llamada terminal deoxynucleotidyl transferasa cataliza la adición de dUTP nucleótidos a los extremos 3' libre de ADNdo. Mediante el uso de dUTPs que están etiquetados con las etiquetas químicas que pueden producir color o fluorescencia, pueden identificarse específicamente células apoptóticas.Video de Zeus en el ensayo TUNEL comienza discutiendo cómo puede utilizarse esta técnica para detectar células apoptóticas. Luego pasamos por un protocolo general para realizar ensayos TUNEL en secciones de tejidos y visualizar los resultados utilizando microscopía de fluorescencia. Por último, se tratarán varias aplicaciones del análisis a la investigación actual.

  • Cell Biology

    09:08
    Anexina V y yoduro de propidio etiquetado

    Tinción con anexina V y propidio yoduro (PI) ofrece a los investigadores una manera de identificar distintos tipos de muerte celular: necrosis o apoptosis. Esta técnica se basa en dos componentes. La primera, anexina V, es una proteína que se une a ciertos fosfolípidos llamados phosphatidylserines, que normalmente ocurren solamente en el folleto de la interno, orientada al citoplasma de la membrana de la célula, pero se convierten en "lata" al prospecto externo durante las primeras etapas de la apoptosis. El segundo componente es la molécula del tinte de ADN PI, que sólo puede entrar las células cuando se rompen sus membranas, una característica de necrosis y apoptosis tardía.Este artículo de video comienza con una revisión de los conceptos detrás de anexina V y PI la coloración y destaca cómo diferenciales patrones de tinción puede utilizarse para distinguir entre las células que avanza por caminos diferentes de la muerte. A continuación repasamos un protocolo generalizado de esta técnica, seguido de una descripción de cómo los investigadores actualmente están utilizando anexina V y PI tinción para comprender mejor la muerte celular.

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