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General Laboratory Techniques
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JoVE Science Education General Laboratory Techniques
Histological Sample Preparation for Light Microscopy
  • 00:00Overview
  • 01:05Fixation of Tissue Samples
  • 04:19Embedding and Sectioning
  • 06:12Applications
  • 09:01Summary

Préparation des échantillons histologiques pour la microscopie optique

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Overview

L’histologie est l’étude des cellules et des tissus, ce qui est typiquement assisté par l’utilisation d’un microscope optique. La préparation d’échantillons histologiques peut varier grandement sur base des propriétés intrinsèques des échantillons comme la taille et la dureté ainsi que la procédure espérée en aval qui inclut des techniques de coloration planifiées ou d’autres utilisations en aval.

Comme décrit dans cette vidéo, la préparation de l’échantillon commence typiquement avec une procédure de fixation pour empêcher la dégradation de l’échantillon par les enzymes naturellement relâchés par les cellules à leur mort. Une fois fixés, les échantillons sont placés dans un milieu d’implantation qui est capable de soutenir suffisamment l’échantillon. Le plus souvent c’est une cire de paraffine, mais d’autres matériaux comme un milieu gelé à base de glycérine ou un milieu à base de gélose sont aussi utilisés pour entourer l’échantillon pendant la découpe. L’amincissement (coupe) prend alors place dans un microtome ou une autre machine de coupe qui permet à l’utilisateur de raser l’échantillon en fines tranches d’épaisseur allant de quelques microns à quelques millimètres. Une fois coupées, les tranches sont montées sur une lame de verre et colorées pour mettre en évidence les caractéristiques de l’échantillon avant d’être visualisées par un microscope.

Procedure

L’histologie est un terme qui fait référence à l’étude de l’anatomie microscopique des tissus et des cellules. Une bonne préparation d’échantillon histologique pour la microscopie optique, est essentielle pour l’obtention de résultats de haute qualité, à partir d’échantillons de tissus. Il y a 3 étapes principales communes à la majorité des procédures histologiques. Tout d’abord, l’échantillon est fixé, en vue de préserver le tissu et de ralentir sa dégradation. Ensuite, l’échant…

Disclosures

No conflicts of interest declared.

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JoVE Science Education Database. JoVE Science Education. Histological Sample Preparation for Light Microscopy. JoVE, Cambridge, MA, (2023).

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