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General Laboratory Techniques
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JoVE Science Education General Laboratory Techniques
Introduction to Fluorescence Microscopy
  • 00:00Introduction to Fluorescence Microscopy
  • 01:19Principles and Components of the Fluorescent Microscope
  • 02:21Basic Principles of Fluorescence Microscopy
  • 05:25Fluorescence Microscopy Imaging
  • 06:59Applications
  • 08:45Summary

荧光显微镜技术的介绍

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Overview

荧光显微镜技术是一个强大的分析工具,它结合了光学显微镜的放大属性和荧光的可见属性。荧光现象中被称为荧光集团的荧光分子吸收或者释放小范围内的光波。荧光显微镜是在基本光学显微镜的基础上,加入了强力光源、特殊的滤光片、以及使用了荧光标记的样品。本短片讲述了荧光显微镜的基本原理,包括荧光形成的机制:斯托克丝位移和光漂白。视频还给出了多种荧光标记的方法,例如使用荧光标记的抗体或者蛋白质、核酸荧光染料、以及向样品中加入可以自然发出荧光的蛋白质;荧光显微镜中的主要组件包括氙光灯源或者水银灯源、滤光灯片、分色镜、以及使用光栅来照射样品,都将被描述。最后还演示了荧光显微镜的许多应用中的一些例子。

Procedure

荧光是指物质吸收某个波长的光,然后释放出另一个波长的光的现象。受到激发跃迁到一个较高的不稳定能量状态的电子,在回到其基础状态时释放出一个光子,就产生了荧光。导致激发的光,也就是使电子跃迁到较高能量状态的光,比释放的荧光有更短的波长和更高的能量。释放的荧光有较长的波长、较低的能量、以及不同的颜色。荧光显微镜技术结合了光学显微镜的放大特征和荧光技术?…

Disclosures

No conflicts of interest declared.

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JoVE Science Education Database. JoVE Science Education. Introduction to Fluorescence Microscopy. JoVE, Cambridge, MA, (2023).

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