Summary
Данное исследование описывает развитие CsCl изменение метода, который легко очищается Т. гондий ооцист с фекалиями инфицированных кошек, которые подходят для молекулярно-биологических и манипуляции культуре ткани
Abstract
Toxoplasma гондий является облигатным внутриклеточным патогеном простейших, которые обычно заражает людей. Она также характеризуется apicomplexan связанных с причинением вспышки пищевых и водных болезни. Окончательным хозяином является кошачьих, где сексуальное репликации в результате развития очень заразным и экологически устойчивых ооцисты. Заражение происходит через употребление ткани кисты от зараженного мяса или ооцист из почвы или воды. Инфекция, как правило, протекает бессимптомно у здоровых людей, но и приводит к пожизненной латентной инфекции, которая может активировать вызывая toxoplasmic энцефалита и смерти, если человек становится ослабленным иммунитетом. Мясо загрязненных Т. гондий кист были основным источником инфекции в Европе и США, но последние изменения в области управления животными и животноводство практики и улучшенной обработки пищевой и перерабатывающей процедуры привели к значительному сокращению распространенности Т. гондий кисты в 1 мясом, 2. Тем не менее, распространенность у людей остается относительно высоким том, что воздействие от ооцист загрязненной почвы или воды, скорее всего. Действительно, воду вспышки токсоплазмоз были зарегистрированы по всему миру поддерживают теорию воздействия экологических форму ооцисты представляет значительный риск для здоровья 3-5. На сегодняшний день исследований по пониманию распространенности Т. гондий ооцист в воде и окружающей среде ограничены из-за отсутствия инструментов для обнаружения ооцист в окружающей среде, 5, 6. Это в первую очередь из-за отсутствия эффективных протоколов очистки для получения большого количества высокоочищенного Т гондий ооцист от инфицированных кошек для исследовательских целей. Данное исследование описывает развитие CsCl изменение метода, который легко очищается Т. гондий ооцист с фекалиями инфицированных кошек, которые подходят для молекулярно-биологических и культуры тканей манипуляции 7.
Protocol
Acknowledgments
Мы хотели бы поблагодарить Nichole Бринкман и Майкл Посуда для технического обзора рукописи и д-р Абу-Саид и Линда Ransick технической и административной поддержки. Охране окружающей среды США агентства лице Управления по исследованиям и разработкам частично финансируется и сотрудничал в исследования, описанные здесь по контракту номер EP-D-06-096 для Dynamac, Inc и количество межведомственное соглашение DW-12-92289801-0 Министерство сельского хозяйства США. Он был подвергнут агентства рассмотрения и одобрен для публикации. Упоминание торговых наименований или коммерческих продуктов не означает одобрение или рекомендации к использованию. MJS текущий адрес: Dynamac, Inc Цинциннати, штат Огайо.
References
- Dubey, J. P. Prevalence of viable Toxoplasma gondii in beef, chicken, and pork from retail meat stores in the United States: risk assessment to consumers. J. Parasitol. 91, 1082-1093 (2005).
- Tenter, A. M., Heckeroth, A. R., Weiss, L. M. Toxoplasma gondii: from animals to humans. Int. J. Parasitol. 30, 1217-1258 (2000).
- Bowie, W. R. Outbreak of toxoplasmosis associated with municipal drinking water. Lancet. 350, 173-177 (1997).
- Moura, L. de Waterborne toxoplasmosis, Brazil, from field to gene. Emerg. Infect. Dis. 12, 326-329 (2006).
- Jones, J. L., Dubey, J. P. Waterborne toxoplasmosis - Recent developments. Exp. Parasitol. doi: 10.1016/j.exppara.2009.03.013, (2009).
- Dumetre, A., Darde, M. L. How to detect Toxoplasma gondii oocysts in environmental samples. FEMS Microbiol. Rev. 27, 651-661 (2003).
- Dumetre, A., Darde, M. L. Purification of Toxoplasma gondii oocysts by cesium chloride gradient. J. Microbiol. Methods. 56, 427-4230 (2004).
- Dubey, J. P. Toxoplasmosis of Animals and Man. , 2nd Edition, CRC Press, Inc. Boca Raton, FL. (2009).
