可视化心脏跳动果蝇</em
Summary
技术所需的可视化的幼虫和成虫在跳动的心脏<em>果蝇</em>提交。每个人生阶段需要不同的方法。
Abstract
“<em>果蝇</em>心脏最近出现了一个很好的模型系统研究生肌心中的基本功能的基因，细胞和分子机制。在飞行检查心脏功能的一个关键的一步是寻找一种方法来访问的方式，保留其生肌的功能，同时仍然允许跳动的心脏器官进行观察和记录的心。两种不同的方法，观察和记录中的幼虫和成人心脏跳动<em>果蝇</em>这里描述。成蝇半完整的准备允许在不干扰色素的角质层和覆脂肪体腹部心脏清晰的可视化。记录幼虫心脏跳动，它是必要的，以固定的幼虫，最大限度地减少体壁运动，从而减少心脏运动不与心肌收缩。我们的方法产生稳定的成年和幼虫的心准备，可以在1-3赫兹率击败小时。
Protocol
在您开始之前成人心刚准备人工血淋巴（AH）的解决方案包含108MM娜5mm的K +，2mm的钙2 +，8MM氯化镁2，1MM的NaH 2 PO 4，4MM碳酸氢钠3，10mm的蔗糖，5mm的海藻糖，5MM的HEPES（pH值7.1，所有的试剂从西格玛化学品）。蔗糖和海藻糖应添加到AH冷藏库存解决方案在使用前，为了防止细菌污染。 带来AH室温至少15分钟的含氧空气鼓泡解决?…
Discussion
果蝇模型已被证明是一个强大的遗传工具，已经被用来解决各种科学问题，从胚胎发育，学习和记忆不等。最近这种多功能的模式生物用于研究在果蝇心脏功能的基因。一些试图量化在成年果蝇的心脏生理依赖于完整的苍蝇经腹角质层的意见。这些方法大多依靠肉眼观察或改变录音，通过腹部的量化一个参数，心率在光照强度变送器。这些方法有一些限制：通常只有心前结束，可以观察到，我们?…
Acknowledgements
Ko是支持由美国心脏协会的资助。
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Micro Dissecting Spring Scissors (curved) | Roboz | RS-5611 | Good for gross cuts (Step 3) | |
| Micro Dissecting Spring Scissors (straight) | Roboz | RS-5620 | ||
| Dumont #55 forceps | Fine Science Tools | 11295-51 | ||
| Dumont #5 forceps | Fine Science Tools | 11295-10 | ||
| Glass Capillaries, 100ul | VWR | 53432-921 | ||
| Glass Capillaries, fine | Science Products | GB100T8P | ||
| Pipette Puller | Sutter Equipment | P-97 | Both horizontal and vertical pipette pullers will work | |
| Plastic tubing | Tygon R-3603 | 1/16” inner diameter | for 100μl capillaries | |
| Plastic tubing | Tygon R-3603 | 1/32” inner diameter | for small capillaries | |
| Histoacryl® tissue adhesive | B.Braun, Melsungen |
References
- Ocorr, K., Reeves, N., Wessells, R. J., Fink, M., Chen, H. -. S. V., Akasaka, T., Yasuda, S., Metzger, J., Giles, W., Posakony, J. W., Bodmer, R. KCNQ potassium channel mutations cause cardiac arrhythmias in Drosophila that mimic the effects of aging. Proc Natl Acad Sci U S A. 104, 3943-3948 (2007).
- Broadie, K. S., Bate, M. Development of the embryonic neuromuscular synapse of Drosophila melanogaster. J Neurosci. 13, 144-166 (1993).
Tags
VisualizingBeating HeartDrosophilaModel SystemGenetic MechanismsCellular MechanismsMolecular MechanismsMyogenic FunctionObservingRecordingLarvaAdult FliesVisualizationAbdominal HeartPigmented CuticleFat BodiesLarval Heart BeatsImmobilize LarvaBody Wall MovementsMyocardial ContractionsStable Heart Preparations
Cite This Article
Vogler, G., Ocorr, K. Visualizing the Beating Heart in Drosophila. J. Vis. Exp. (31), e1425, doi:10.3791/1425 (2009).