Visualizar el corazón latiendo en Drosophila</em
Summary
Técnica necesaria para la visualización de los latidos del corazón en adultos y larvas<em> Drosophila</em> Se presentan. Cada etapa de la vida requiere de una metodología diferente.
Abstract
La<em> Drosophila</emCorazón> ha surgido recientemente como un buen modelo de sistema para el examen de los mecanismos genéticos, celulares y moleculares que subyacen a la función en el corazón de miogénica. Un paso clave en el examen de la función del corazón en la mosca es encontrar una manera de acceder al corazón de una manera que preserva su función miogénica al tiempo que permite el órgano corazón que late a ser observados y registrados. Dos métodos diferentes para observar y registrar los latidos del corazón, tanto en larva y adulto<em> Drosophila</em> A continuación se describen. Nuestros semi-intacta la preparación con las moscas adultas permite una visualización clara del corazón abdominal sin la interferencia de la cutícula pigmentada y que cubre los cuerpos grasos. Para grabar el corazón late larval es necesario inmovilizar a la larva, lo que minimiza los movimientos del cuerpo lo que reduce los movimientos de la pared del corazón que no están asociadas con las contracciones del miocardio. Nuestras metodologías de producción de un adulto estable y preparaciones de larvas del corazón que puede vencer a la hora a un ritmo de 3.1 Hz.
Protocol
Discussion
El modelo de Drosophila ha demostrado ser una potente herramienta genética que se ha utilizado para tratar una variedad de problemas científicos que van desde el desarrollo embrionario para el aprendizaje y la memoria. Recientemente, este organismo modelo versátil se ha utilizado para investigar la genética de la función cardíaca en la marcha. Un número de intentos de cuantificar la fisiología del corazón en adultos de Drosophila se han basado en observaciones realizadas en las moscas intacta a través de la cu…
Acknowledgements
KO con el apoyo de una beca de la Asociación Americana del Corazón.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Micro Dissecting Spring Scissors (curved) | Roboz | RS-5611 | Good for gross cuts (Step 3) | |
| Micro Dissecting Spring Scissors (straight) | Roboz | RS-5620 | ||
| Dumont #55 forceps | Fine Science Tools | 11295-51 | ||
| Dumont #5 forceps | Fine Science Tools | 11295-10 | ||
| Glass Capillaries, 100ul | VWR | 53432-921 | ||
| Glass Capillaries, fine | Science Products | GB100T8P | ||
| Pipette Puller | Sutter Equipment | P-97 | Both horizontal and vertical pipette pullers will work | |
| Plastic tubing | Tygon R-3603 | 1/16” inner diameter | for 100μl capillaries | |
| Plastic tubing | Tygon R-3603 | 1/32” inner diameter | for small capillaries | |
| Histoacryl® tissue adhesive | B.Braun, Melsungen |
References
- Ocorr, K., Reeves, N., Wessells, R. J., Fink, M., Chen, H. -. S. V., Akasaka, T., Yasuda, S., Metzger, J., Giles, W., Posakony, J. W., Bodmer, R. KCNQ potassium channel mutations cause cardiac arrhythmias in Drosophila that mimic the effects of aging. Proc Natl Acad Sci U S A. 104, 3943-3948 (2007).
- Broadie, K. S., Bate, M. Development of the embryonic neuromuscular synapse of Drosophila melanogaster. J Neurosci. 13, 144-166 (1993).
