Summary

에 잔 심장을 떠올리 Drosophila</em

Published: September 28, 2009
doi:

Summary

기술은 애벌레와 어른의 뛰는 심장을 시각화에 필요한<em> Drosophila</em> 제공됩니다. 각 생활 단계는 다른 방법론이 필요합니다.

Abstract

<em> Drosophila</em> 심장이 최근 myogenic 마음에 기​​능을 기본, 유전 세포 및 분자 메커니즘을 조사에 대한 좋은 모델 시스템으로 등장하고 있습니다. 파리의 심장 기능을 검사에서 중요한 단계는 여전히 뛰는 심장 장기 관찰하고 기록할 수 있도록하면서 그 myogenic 기능을 보존하는 방식으로 마음을 액세스하는 방법을 찾는 것입니다. 유충과 성인 모두에서 뛰는 심장을 관찰하고 레코딩을위한 두 가지 방법<em> Drosophila</em> 여기에 설명되어 있습니다. 성인 파리를 사용하여 우리 반 그대로 준비는 색소 상피의 간섭과 지방의 시체를 overlying없이 복부 마음의 명확 시각화 수 있습니다. 애벌레 마음을 녹음하기 위해서는이를 심근 수축과 관련되지 않은 마음의 움직임을 줄여 신체 벽의 움직임을 최소화 유충을 고정하기 위해 필요 없잖아. 우리의 방법은 안정 성인과 1-3 Hz의 속도로 시간 동안 이길 수 애벌레 심장 준비를 생산하고 있습니다.

Protocol

당신이 시작하기 전에 성인 심장 갓 인공 hemolymph (AH) 108mM 나를 포함하는 솔루션 +, 5mM K +, 2mM 칼슘 2 +, 필름 MgCl 2, 1mM 아니 2 PO 4, 4mm짜리 NaHCO 3, 10mM 자당, 5mM trehalose, 5mM HEPES (산도 7.1의 모든 시약의 준비 시그마 화학). 자당과 trehalose는 세균 오염을 방지하기 위해 사용하는 직전 냉장 주식 솔루션에서 AH에 추가되어 있어야…

Discussion

Drosophila 모델 embryological 개발에서 학습 및 메모리에 이르기까지 과학 질문 다양한 주소로 사용되었습니다 강력한 유전자 도구로 입증되었습니다. 최근이 다양한 모델 생물이 비행의 심장 기능의 유전자를 조사하는 데 사용되었습니다. 성인 Drosophila의 심장 생리를 정할 시도의 숫자가 복부 표피를 통해 그대로 파리에서 만들어진 관측에 의존합니다. 이러한 방식의 대부분은 하나의 매개 변수, 심?…

Acknowledgements

KO는 미국 심장 협회에서 교부금에 의해 지원됩니다.

Materials

Material Name Type Company Catalogue Number Comment
Micro Dissecting Spring Scissors (curved)   Roboz RS-5611 Good for gross cuts (Step 3)
Micro Dissecting Spring Scissors (straight)   Roboz RS-5620  
Dumont #55 forceps   Fine Science Tools 11295-51  
Dumont #5 forceps   Fine Science Tools 11295-10  
Glass Capillaries, 100ul   VWR 53432-921  
Glass Capillaries, fine   Science Products GB100T8P  
Pipette Puller   Sutter Equipment P-97 Both horizontal and vertical pipette pullers will work
Plastic tubing   Tygon R-3603 1/16” inner diameter for 100μl capillaries
Plastic tubing   Tygon R-3603 1/32” inner diameter for small capillaries
Histoacryl® tissue adhesive   B.Braun, Melsungen    

References

  1. Ocorr, K., Reeves, N., Wessells, R. J., Fink, M., Chen, H. -. S. V., Akasaka, T., Yasuda, S., Metzger, J., Giles, W., Posakony, J. W., Bodmer, R. KCNQ potassium channel mutations cause cardiac arrhythmias in Drosophila that mimic the effects of aging. Proc Natl Acad Sci U S A. 104, 3943-3948 (2007).
  2. Broadie, K. S., Bate, M. Development of the embryonic neuromuscular synapse of Drosophila melanogaster. J Neurosci. 13, 144-166 (1993).
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Cite This Article
Vogler, G., Ocorr, K. Visualizing the Beating Heart in Drosophila. J. Vis. Exp. (31), e1425, doi:10.3791/1425 (2009).

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