の心臓の鼓動の可視化ショウジョウバエ</em

Summary

幼虫および成体での心臓の鼓動を可視化するために必要なテクニック<em>ショウジョウバエ</em>提示されます。各ライフステージでは、異なる方法論が必要になります。

Abstract

市販<em>ショウジョウバエ</em>心臓は最近、遺伝子、細胞、および筋原性心内分子メカニズムの基礎となる機能を調べるための良いモデル系として注目されています。ハエで心機能を調べる上で重要なステップは、まだ心臓の鼓動の臓器を観察し、記録されることを可能にしながら、その筋の機能を維持する方法で、心臓にアクセスする方法を見つけることです。幼虫と成人の両方で心臓の鼓動を観察し、記録するための2つの異なった方法<em>ショウジョウバエ</em>ここで説明されています。大人のハエを使って私たちの半無傷の準備は、色素性クチクラからの干渉と脂肪体を覆うことなく、腹部、心臓の明確な可視化が可能になります。幼虫の心臓を記録するには、それにより心筋の収縮に関連付けられていない心の動きを減らし体壁の動きを最小化する幼虫を、固定化する必要が打つ。私たちの方法論は1-3 Hzのレートでの時間のために打つことができる安定した大人と幼虫の心の準備を生成する。

Protocol

あなたが始める前に大人の心新鮮な108mMのNa +、5mMのK +、2mMのCa 2 +は 、8MMのMgCl 2、1mMののNaH 2 PO 4、4mmの飽和NaHCO 3、10mMのスクロース、5mMのトレハロース、5mMのHEPES（pHは7.1、すべての試薬 ​​からを含む人工体液（AH）溶液を調製シグマケミカル）。スクロースおよびトレハロースは、細菌汚染を防ぐために、使用直?…

Discussion

ショウジョウバエモデルでは、胎生発育から学習や記憶に至るまで、科学的なさまざまな質問に対処するために使用されている強力な遺伝学的ツールであることが証明されている。最近この多目的なモデル生物はハエの心機能の遺伝学を調査するために使用されています。成体ショウジョウバエで心臓生理学を定量化するための試行回数は、腹部のクチクラを通してそのままハエで行った観?…

Materials

Material Name	Type	Company	Catalogue Number	Comment
Micro Dissecting Spring Scissors (curved)		Roboz	RS-5611	Good for gross cuts (Step 3)
Micro Dissecting Spring Scissors (straight)		Roboz	RS-5620
Dumont #55 forceps		Fine Science Tools	11295-51
Dumont #5 forceps		Fine Science Tools	11295-10
Glass Capillaries, 100ul		VWR	53432-921
Glass Capillaries, fine		Science Products	GB100T8P
Pipette Puller		Sutter Equipment	P-97	Both horizontal and vertical pipette pullers will work
Plastic tubing		Tygon R-3603	1/16” inner diameter	for 100μl capillaries
Plastic tubing		Tygon R-3603	1/32” inner diameter	for small capillaries
Histoacryl® tissue adhesive		B.Braun, Melsungen