तकनीक लार्वा और वयस्क में दिल की धड़कन visualizing के लिए आवश्यक<em> ड्रोसोफिला</em> प्रस्तुत कर रहे हैं. प्रत्येक जीवन स्तर में एक अलग पद्धति की आवश्यकता है.
Abstract
<em> ड्रोसोफिला</em> दिल हाल ही में आनुवंशिक, सेलुलर और आणविक myogenic दिल में समारोह अंतर्निहित तंत्र की जांच के लिए एक अच्छा मॉडल प्रणाली के रूप में उभरा है. मक्खी में दिल समारोह की जांच में एक महत्वपूर्ण कदम तरीके से दिल है कि इसके myogenic समारोह को बरकरार रखता है, जबकि अभी भी दिल की धड़कन अंग मनाया जा करने के लिए और दर्ज की अनुमति का उपयोग करने का रास्ता खोजने है. दोनों लार्वा और वयस्क में दिल की धड़कन को देख और रिकॉर्डिंग के लिए दो अलग अलग तरीकों<em> ड्रोसोफिला</em> यहाँ वर्णित हैं. हमारे अर्द्ध बरकरार वयस्क मक्खियों का उपयोग कर तैयारी pigmented छल्ली से हस्तक्षेप और वसा शरीर overlying के बिना पेट दिल का स्पष्ट दृश्य की अनुमति देता है. लार्वा दिल रिकॉर्ड करने के लिए धड़कता है यह लार्वा, जो शरीर दीवार आंदोलनों जिससे कि दौरे संकुचन के साथ जुड़े रहे हैं नहीं दिल आंदोलनों को कम करने minimizes स्थिर करने के लिए आवश्यक है. हमारे तरीके स्थिर वयस्क और लार्वा दिल तैयारी है कि घंटों के लिए 1-3 हर्ट्ज की दरों पर हरा सकते हैं उपज.
Protocol
इससे पहले कि आप शुरू वयस्क दिल हौसले से कृत्रिम (आह) hemolymph 108mM ना युक्त समाधान + कश्मीर 5mm +, 2mm 2 Ca +, 8mm 2 MgCl, 1mm नाह से 2 4 पीओ, 4mm 3 NaHCO, 10mm sucrose, 5mm Trehalose, 5mm HEPES (7.1 पीएच, सभी अभिकर्मकों तैयार सिग्?…
Discussion
ड्रोसोफिला मॉडल के लिए एक शक्तिशाली आनुवंशिक उपकरण है कि वैज्ञानिक embryological विकास से सीखने और स्मृति को लेकर सवालों की एक किस्म का पता करने के लिए इस्तेमाल किया गया है साबित हो गया है. हाल ही में इस बहुमुखी…
Acknowledgements
को अमेरिकन हार्ट एसोसिएशन से एक अनुदान द्वारा समर्थित है.
Materials
Material Name
Type
Company
Catalogue Number
Comment
Micro Dissecting Spring Scissors (curved)
Roboz
RS-5611
Good for gross cuts (Step 3)
Micro Dissecting Spring Scissors (straight)
Roboz
RS-5620
Dumont #55 forceps
Fine Science Tools
11295-51
Dumont #5 forceps
Fine Science Tools
11295-10
Glass Capillaries, 100ul
VWR
53432-921
Glass Capillaries, fine
Science Products
GB100T8P
Pipette Puller
Sutter Equipment
P-97
Both horizontal and vertical pipette pullers will work