Visualizzare il cuore pulsante di Drosophila</em
Summary
Tecnica necessaria per visualizzare il cuore pulsante di larve e adulti<em> Drosophila</em> Sono presentati. Ogni fase della vita richiede una metodologia diversa.
Abstract
Il<em> Drosophila</emCuore> è recentemente emerso come un sistema di buon modello per l'esame dei meccanismi genetici, cellulari e molecolari alla base della funzione nei cuori miogenico. Un passo fondamentale per esaminare la funzione cardiaca in tempo reale è trovare un modo per accedere al cuore in un modo che conserva la sua funzione miogenici pur consentendo l'organo cuore pulsante di essere osservato e registrato. Due diversi metodi per osservare e registrare il cuore pulsante in entrambe le larve e adulti<em> Drosophila</em> Sono descritte qui. Il nostro semi-intatta la preparazione con le mosche adulte consente la visualizzazione chiara del cuore addominali senza interferenze da parte cuticola pigmentate e sovrastanti corpi grassi. Per registrare il cuore batte larvale è necessario immobilizzare la larva, che riduce al minimo i movimenti parete del corpo in modo da ridurre i movimenti cuore che non sono associati a contrazioni del miocardio. Le nostre metodologie di produzione stabile adulti e preparati cuore larvale che può battere per ore a tassi di Hz 1-3.
Protocol
Discussion
Il modello Drosophila ha dimostrato di essere un potente strumento genetico che è stato usato per affrontare una serie di quesiti scientifici che spaziano dallo sviluppo embrionale all'apprendimento e alla memoria. Di recente questo organismo modello versatile è stato utilizzato per studiare la genetica della funzione cardiaca in tempo reale. Un certo numero di tentativi di quantificare fisiologia cardiaca in adulti Drosophila si sono basati sulle osservazioni fatte nei moscerini intatta attraverso la cuticola add…
Acknowledgements
KO è sostenuto da un finanziamento della American Heart Association.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Micro Dissecting Spring Scissors (curved) | Roboz | RS-5611 | Good for gross cuts (Step 3) | |
| Micro Dissecting Spring Scissors (straight) | Roboz | RS-5620 | ||
| Dumont #55 forceps | Fine Science Tools | 11295-51 | ||
| Dumont #5 forceps | Fine Science Tools | 11295-10 | ||
| Glass Capillaries, 100ul | VWR | 53432-921 | ||
| Glass Capillaries, fine | Science Products | GB100T8P | ||
| Pipette Puller | Sutter Equipment | P-97 | Both horizontal and vertical pipette pullers will work | |
| Plastic tubing | Tygon R-3603 | 1/16” inner diameter | for 100μl capillaries | |
| Plastic tubing | Tygon R-3603 | 1/32” inner diameter | for small capillaries | |
| Histoacryl® tissue adhesive | B.Braun, Melsungen |
References
- Ocorr, K., Reeves, N., Wessells, R. J., Fink, M., Chen, H. -. S. V., Akasaka, T., Yasuda, S., Metzger, J., Giles, W., Posakony, J. W., Bodmer, R. KCNQ potassium channel mutations cause cardiac arrhythmias in Drosophila that mimic the effects of aging. Proc Natl Acad Sci U S A. 104, 3943-3948 (2007).
- Broadie, K. S., Bate, M. Development of the embryonic neuromuscular synapse of Drosophila melanogaster. J Neurosci. 13, 144-166 (1993).
