Техника, необходимые для визуализации бьющееся сердце в личинок и взрослых<em> Drosophila</em> Представлены. Каждая стадия развития требует иной методологии.
Abstract
<em> Drosophila</em> Сердце недавно стала хорошей модельной системой для изучения генетических, клеточных и молекулярных механизмов, лежащих в мышечной функции сердца. Ключевым шагом в изучении функции сердца в лету находит способ получить доступ к сердцу таким образом, который сохраняет свою функцию миогенной то же время позволяя бьющееся сердце органов, которые должны соблюдаться и зарегистрированы. Две различные методы наблюдения и записи бьющееся сердце в обоих личинки и взрослых<em> Drosophila</em> Описаны здесь. Наши полу-нетронутыми подготовки использованием взрослых мух позволяет четкой визуализации органов брюшной сердца без вмешательства со стороны пигментированные кутикулу и вышележащих жира тела. Для записи личиночной сердце бьется необходимо обездвижить личинка, которая минимизирует стенки тела движений тем самым снижая сердце движений, которые не связаны с инфарктом сокращений. Наши методики производить стабильный имаго и личинок подготовку сердце, что может победить в течение нескольких часов со скоростью 1-3 Гц.
Protocol
Перед тем как начать Взрослые сердца Недавно подготовить искусственные гемолимфы (АГ) раствор, содержащий 108 Na +, 5 мМ К +, 2 мМ Ca 2 +, 8 мм MgCl 2, 1 мМ NaH 2 4 PO, 4мм NaHCO 3, 10 мМ сахарозы, 5 мМ трегалозы, 5 мМ HEPES (рН 7,1, все реагенты из Sigma Chemicals). Сахарозы и тр?…
Discussion
Модель Drosophila оказался мощный генетический инструмент, который был использован для решения различных научных вопросов, начиная от эмбрионального развития к обучению и память. В последнее время этот универсальный организм модели был использован для исследования генетики функции серд?…
Acknowledgements
КО проводится при поддержке гранта от Американской ассоциации сердца.
Materials
Material Name
Type
Company
Catalogue Number
Comment
Micro Dissecting Spring Scissors (curved)
Roboz
RS-5611
Good for gross cuts (Step 3)
Micro Dissecting Spring Scissors (straight)
Roboz
RS-5620
Dumont #55 forceps
Fine Science Tools
11295-51
Dumont #5 forceps
Fine Science Tools
11295-10
Glass Capillaries, 100ul
VWR
53432-921
Glass Capillaries, fine
Science Products
GB100T8P
Pipette Puller
Sutter Equipment
P-97
Both horizontal and vertical pipette pullers will work