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घुटने के पुराने ऑस्टियोआर्थराइटिस के खरगोश मॉडल में ट्यूना हस्तक्षेप

Published: August 25, 2023 doi: 10.3791/65763
Automatic Translation
*1, *2, 3, 1, 1, 3, 1, 3, 3
1Shandong University of Traditional Chinese Medicine, 2Liaoning University of Traditional Chinese Medicine, 3Shandong University of Traditional Chinese Medicine Affiliated Hospital
* These authors contributed equally

Summary

प्रोटोकॉल घुटने के पुराने ऑस्टियोआर्थराइटिस के खरगोश मॉडल में ट्यूना हस्तक्षेप के लिए एक विधि का वर्णन करता है।

Abstract

घुटने के पुराने ऑस्टियोआर्थराइटिस (केओए) मुख्य रूप से घुटने के जोड़ के उपास्थि और आसपास के नरम ऊतकों में अपक्षयी परिवर्तनों की विशेषता है। केओए के इलाज में तुइना की प्रभावकारिता की पुष्टि की गई है, लेकिन अंतर्निहित तंत्र की जांच करने की आवश्यकता है। इस अध्ययन का उद्देश्य अंतर्निहित तंत्र को प्रकट करने के लिए ट्यूना के साथ इलाज किए गए वैज्ञानिक रूप से व्यवहार्य केओए खरगोश मॉडल की स्थापना करना है। इसके लिए, 18, 6 महीने के सामान्य-ग्रेड नर न्यूजीलैंड खरगोशों को यादृच्छिक रूप से शाम, मॉडल और ट्यूना समूहों में विभाजित किया गया था, जिसमें प्रत्येक समूह में 6 खरगोश थे। केओए मॉडल को घुटने के संयुक्त गुहा में 4% पपैन समाधान इंजेक्ट करके स्थापित किया गया था। टुइना समूह को 4 सप्ताह के लिए घुटने के संयुक्त रोटरी सुधार विधि के साथ संयुक्त टुइना के साथ हस्तक्षेप किया गया था। केवल मानक समझ और निर्धारण दिखावटी और मॉडल समूहों में किए गए थे। 1 सप्ताह के हस्तक्षेप के अंत में, घुटने की संयुक्त गति सीमा (ROM) देखी गई, और उपास्थि हेमटोक्सिलिन-ईओसिन (एचई) धुंधला हो गया। अध्ययन से पता चलता है कि ट्यूना चोंड्रोसाइट्स एपोप्टोसिस को रोक सकता है, उपास्थि ऊतक की मरम्मत कर सकता है, और घुटने के संयुक्त रोम को बहाल कर सकता है। अंत में, यह अध्ययन केओए मॉडल खरगोशों के लिए ट्यूना उपचार की वैज्ञानिक व्यवहार्यता को प्रदर्शित करता है, जो केओए और इसी तरह के घुटने के संयुक्त से संबंधित स्थितियों के अध्ययन में इसके संभावित अनुप्रयोग पर प्रकाश डालता है।

Introduction

घुटने का ऑस्टियोआर्थराइटिस (केओए) घुटने के जोड़ की एक अपक्षयी बीमारी है, जो मुख्य रूप से घुटने के दर्द, सूजन, विरूपण और प्रतिबंधित आंदोलन से प्रकट होती है, जिसमें उच्च विकलांगता दर और महिलाओं में उच्च प्रसार होता है, 2019 में दुनिया भर में ऑस्टियोआर्थराइटिस के 527.81 मिलियन रोगी और इसका वैश्विक प्रसार ओए1 के कुल वैश्विक प्रसार का 60.6% है।. नैदानिक रूप से, केओए का उपचार आमतौर पर गैर-शल्य चिकित्सा और शल्य चिकित्सा उपचारों में विभाजित होता है। गैर-सर्जिकल उपचारों में फिजियोथेरेपी, फार्माकोथेरेपी और प्लेटलेट-समृद्ध प्लाज्मा इंजेक्शन थेरेपी 2,3 शामिल हैं। तुइना चीनी चिकित्सा में एक आम, सुरक्षित, विश्वसनीय और प्रभावी उपचार विधि है। यह अध्ययन केओए के इलाज के लिए घुटने के संयुक्त रोटरी सुधार विधि के साथ संयुक्त ट्यूना का उपयोग करता है। रोटेटरी गूंधने और दबाने की विधि जैसी ट्यूना तकनीक मांसपेशियों के ऊतकों को संतुलित कर सकती है, दर्द को कम कर सकती है, भड़काऊ कारक के स्तर को समायोजित कर सकती है, ऊतक चयापचय में सुधार कर सकती है, और आर्टिकुलर कार्टिलेज अपघटनको रोक सकती है4,5. घुटने के संयुक्त रोटरी सुधार विधि निचले अंग की हड्डियों और जोड़ों के संरेखण को समायोजित कर सकती है, घुटने के जोड़ के अंतर में सुधार कर सकती है, सामान्य बल रेखा को बहाल कर सकती है, और निचले अंग बायोमैकेनिक्स 6,7,8,9 को संतुलित कर सकती है। प्रतिरोध अभ्यास मांसपेशियों और ताकत को बढ़ा सकते हैं और उपास्थि ऊतक नवीकरण को बढ़ावा दे सकते हैं10,11. एक प्रारंभिक अध्ययन में पाया गया कि यह ट्यूना प्रोटोकॉल केओए के इलाज में मौखिक ग्लूकोसामाइन सल्फेट कैप्सूल की तुलना में काफी अधिक प्रभावी है, कार्रवाई की तेज शुरुआत और चोंड्रोसाइट्स अपघटन के महत्वपूर्ण अवरोध और क्षतिग्रस्त उपास्थि ऊतककी मरम्मत 12। केओए के उपचार में, ट्यूना थेरेपी की तुलना में, गैर-स्टेरायडल विरोधी भड़काऊ दवाओं के प्रतिकूल प्रभाव और असंतोषजनक दीर्घकालिक प्रभावकारिता, अपेक्षाकृत उच्च शल्य चिकित्सा जोखिम और लागत होती है, और शल्य चिकित्सा उपचार के लिए कुछ संकेतों की आवश्यकता होती है, पोस्टऑपरेटिव समस्याओं और पेरिप्रोस्थेटिक जटिलताओंके साथ 13,14,15।. जब दवा चिकित्सा और सर्जरी की तुलना में, केओए के लिए ट्यूना उपचार कई फायदे प्रदान करता है, जिसमें कम दुष्प्रभाव, कम जोखिम, बढ़ी हुई सुरक्षा, लागत-प्रभावशीलता और लंबे समय तक चलने वाली प्रभावकारिता शामिल है। इसके अतिरिक्त, यह घुटने के जोड़ों के दर्द, सूजन, पॉपिंग और प्रतिबंधित आंदोलन 6,13,16,17 को प्रभावी ढंग से कम कर सकता है।

हालांकि, केओए के उपचार के लिए तुइना के तंत्र को स्पष्ट करने की आवश्यकता है, जो केओए के लिए उपचार प्रोटोकॉल के सुधार और पूर्णता को सीमित करता है। इसलिए, पशु प्रयोगों के माध्यम से केओए में तुइना हस्तक्षेप के तंत्र का अध्ययन करना एक प्रभावी तरीका है। चूहों की तुलना में खरगोशों में एक विनम्र स्वभाव और बड़े घुटने के जोड़ होते हैं। शारीरिक संरचना और उपास्थि जैव रासायनिक सूचकांक मनुष्यों के समान हैं, इसलिए यह ट्यूना18 द्वारा घुटने के संयुक्त रोग के तंत्र का अध्ययन करने के लिए एक उपयुक्त विषय है। खरगोशों के घुटने के संयुक्त गुहा में पपैन इंजेक्ट करके स्थापित केओए मॉडल में कम मॉडलिंग समय, कम आघात, उच्च सफलता दर, उच्च जीवित रहने की दर और केओए19 के समान रोग तंत्र के फायदे हैं। इस अध्ययन का उद्देश्य केओए में तुइना हस्तक्षेप के लिए वैज्ञानिक रूप से व्यवहार्य पशु प्रयोगात्मक प्रोटोकॉल स्थापित करना और तुइना के तंत्र की जांच करना है।

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Protocol

अध्ययन को शेडोंग यूनिवर्सिटी ऑफ ट्रेडिशनल चाइनीज मेडिसिन (अनुमोदन संख्या: 2020-29) के संबद्ध अस्पताल की आचार समिति द्वारा अनुमोदित किया गया था।

1. प्रायोगिक जानवर

  1. मानक एकल पिंजरों (12 घंटे प्रकाश / अंधेरे चक्र, तापमान 20-24 डिग्री सेल्सियस, वायु आर्द्रता 40% -60%) में 18, 6 महीने ± सामान्य ग्रेड नर न्यूजीलैंड खरगोशों (2.75 0.25 किलोग्राम) को बढ़ाएं।

2. समूहीकरण विधि

  1. यादृच्छिक संख्या विधि का उपयोग करके शाम समूह के रूप में 18 न्यूजीलैंड खरगोशों में से 6 का चयन करें और शेष 12 खरगोशों को मॉडलिंग समूह को असाइन करें।
  2. सफल मॉडलिंग के बाद, मॉडलिंग समूह खरगोशों को मॉडल और ट्यूना समूहों को यादृच्छिक संख्या विधि के अनुसार विभाजित करें, प्रत्येक समूह में 6 खरगोश हों।
  3. तुइना समूह में तुइना हस्तक्षेप करें। तुइना के बिना शाम और मॉडल समूह में एक ही समझ और निर्धारण करें। 4 सप्ताह के लिए हर दूसरे दिन काम करें (चित्रा 1)।

3. केओए मॉडल की स्थापना

  1. सप्ताह 1 में मानक स्थिति में खरगोशों को अनुकूली भोजन करें। पानी और भोजन तक पहुंच की आवश्यकता है। खरगोश निर्धारण बक्से में उनके दाईं ओर खरगोशों को रखें ताकि उन्हें दिन में 15 मिनट के लिए शांत किया जा सके। उनके सिर को सिर फिक्सिंग प्लेटों पर रखें। फास्टनिंग प्लेटों और स्क्रू को ठीक करें ताकि खरगोश हिल न सकें। खरगोशों को पकड़ते और ठीक करते समय सुरक्षात्मक दस्ताने पहनें (चित्रा 1)।
  2. सप्ताह 2 के 1, 4 और 7 दिनों में, सभी 18 खरगोशों को खरगोश निर्धारण बक्से में उनके दाईं ओर रखें (चित्र 1)। नीचे उल्लिखित कार्रवाई करें।
  3. खरगोश की सीमांत कान की नस में 3% पेंटोबार्बिटल सोडियम (1 मिलीलीटर / किग्रा) इंजेक्ट करें। खरगोश के बाएं घुटने के जोड़ को एक पशु शेवर के साथ शेव करें, जिसके परिणामस्वरूप उजागर त्वचा पर कोई बाल नहीं होता है।
  4. चिकित्सा आयोडोफोर और 75% अल्कोहल का उपयोग करके खरगोश के बाएं घुटने के जोड़ को अंदर से कीटाणुरहित करें (चित्रा 2 ए)।
  5. खरगोश के बाएं घुटने के जोड़ को 60 ° पर फ्लेक्स करें। वैक्सियन से एक सुई (22 ग्राम, 0.7 मिमी x 30 मिमी) डालें। मॉडलिंग समूह के घुटने के संयुक्त गुहा में 4% पपैन समाधान (0.1 एमएल / किग्रा, औसतन 2.5 किलोग्राम जानवर के लिए 0.275 एमएल) इंजेक्ट करें। शाम समूह में 0.9% सोडियम क्लोराइड समाधान की समान मात्रा इंजेक्ट करें। यह इंजेक्शन खुराक दर्द या संकट के सबूत के बिना जानवर द्वारा अच्छी तरह से सहन की जाती है (चित्रा 2 बी)।
    नोट: वैक्सियन (एक्स-एलई 5) पेटेलर लिगामेंट के पार्श्व अवकाश में स्थित है, और नीक्सियन (एक्स-एलई 4) पेटेलर लिगामेंट20,21,22 के मध्यवर्ती अवकाश में स्थित है।
  6. घोल के फैलाव से बचने के लिए पिनहोल को 2 मिनट के लिए दबाएं।
  7. अपने हाथों को खरगोश के बाएं घुटने के जोड़ के ऊपर और नीचे रखें। खरगोश के घुटने के जोड़ को धीरे से और निष्क्रिय रूप से फ्लेक्स करें और गति की शारीरिक सीमा (ROM) के भीतर 10 बार विस्तारित करें ताकि घोल को घुटने के जोड़ गुहा में समान रूप से15 बार घुसपैठ किया जा सके। मॉडलिंग की अवधि के लिए हर 8 घंटे में खरगोश का निरीक्षण करें। बुप्रेनोर्फिन एसआर (0.18 मिलीग्राम / किग्रा) का प्रबंधन करें जब खरगोश छिपने, अंगों के कांपने, उथले और तेजी से सांस लेने, या यहां तक कि काटने और खरोंच के लक्षण दिखाते हैं।
  8. सप्ताह 7 में, खरगोश के बाएं घुटने को सूजन के रूप में एक लचीली स्थिति में देखें, जिसमें नोड्यूल ्स और स्ट्रिया के साथ घुटने के चारों ओर मांसपेशियों की टोन बढ़ गई है, स्थानीय दर्दनाक जलन प्रतिक्रिया में वृद्धि हुई है, घुटने के रोम में कमी आई है, लंगड़ा चाल और गुरुत्वाकर्षण के केंद्र को स्वस्थ पक्ष में स्थानांतरित किया गया है। यह केओए मॉडल (चित्रा 1, चित्रा 2 सी) 23,24 की सफलता निर्धारित करता है।

4. तुइना हेरफेर

  1. तुइना हेरफेर से पहले तुइना तकनीक पैरामीटर निर्धारण उपकरण का उपयोग करके प्रशिक्षण करें। एक ही पेशेवर द्वारा 1 महीने के लिए दिन में 1 घंटे के लिए ट्रेन करें।
    1. 5 एन के बल और 60 बार / मिनट की आवृत्ति के साथ ट्यूना मैनिपुलेशन सिमुलेशन प्लेटफॉर्म पर अंगूठे के साथ रोटेटरी गूंधने और दबाने की विधि का प्रदर्शन करें (चित्रा 3 ए, सी)।
    2. ट्यूना मैनिपुलेशन पैरामीटर प्रोसेसिंग सॉफ्टवेयर द्वारा एक्स, वाई और जेड अक्षों की तीन दिशाओं में बल का विश्लेषण करें और स्क्रीन पर प्रदर्शित बल के परिमाण, आवृत्ति और कार्रवाई के समय की जांच करें (चित्रा 3 बी, डी)।
    3. ट्यूना हेरफेर के यांत्रिक मापदंडों का मूल्यांकन करें और प्रशिक्षण के दौरान सॉफ्टवेयर का उपयोग करके ट्यूना हेरफेर को मानकीकृत करें। 5 एन के बल, 60 बार / मिनट की आवृत्ति और 10 मिनट के निरंतर ऑपरेटिंग समय के साथ अंगूठे के साथ मानकीकृत रोटेटरी गूंधने और दबाने की विधि को बनाए रखें। चित्रा 3 बी, डी25,26,27 में हेरफेर के मानकीकृत मात्रात्मक तरंग देखें।
  2. खरगोश निर्धारण बॉक्स में खरगोश को उसके दाईं ओर रखें। खरगोश को शांत करने और आराम करने के लिए खरगोश को 10 सेकंड के लिए धीरे से स्ट्रोककरें। फिर तुइना हस्तक्षेप करें।
  3. खरगोश के बाएं पेरी-घुटने की मांसपेशियों की कठोरता, कण्डरा गांठ और पेटेला पर अंगूठे के साथ रोटेटरी गूंधने की विधि का प्रदर्शन करें, जिसमें 5 एन के बल पर ऊपर और नीचे राउंड-ट्रिप हेरफेर और 5 मिनट के लिए 60 बार / मिनट की आवृत्ति हो।
  4. यांगलिंगक्वान (जीबी 34), यिनलिंगक्वान (एसपी 9), वैक्सियन (ईएक्स-एलई 5), नीक्सियन (ईएक्स-एलई 4), हेडिंग (ईएक्स-एलई 2), जुहाई (एसपी 10), लियांगकिउ (एसटी 34), और वीझोंग (बीएल 40) 20,21,22 को 5 एन के बल और 60 बार / मिनट की आवृत्ति के साथ दबाने के लिए अंगूठे के अंत का उपयोग करें, और प्रत्येक बिंदु पर 30 सेकंड के लिए संचालित करें।
  5. खरगोश घुटने के जोड़ पर रोटरी सुधार विधि का प्रदर्शन करें और समूह में प्रत्येक जानवर के लिए इस 3x को अलग से करें।
    1. एक हाथ से फीमर को ठीक करें। दूसरे हाथ को पहले घुटने के जोड़ के पीछे रखें, फिर क्रमशः अंगूठे और अनामिका उंगलियों के साथ पार्श्व और मध्यवर्ती टिबियल कोंडिल को ठीक करें। इंडेक्स और मध्य उंगलियों के साथ पॉपलाइटल फोसा को ठीक करें। कर्षण और घुमावदार बल लागू करें।
    2. एक हाथ से फीमर को ठीक करें। दूसरे हाथ के अंगूठे और छोटी उंगलियों से पेटेला के मध्यवर्ती और पार्श्व किनारों को ठीक करें। इंडेक्स, मध्य और रिंग उंगलियों के साथ पेटेलर बेस को ठीक करें। घुमावदार बल लागू करें।
    3. कर्षण बल की दिशा को टिबिया की लंबी धुरी के समानांतर रखें, और मरोड़ बल की दिशा को निचले शियान की दिशा के अनुरूप रखें। त्वचा और उंगलियों के बीच घर्षण से बचने के लिए त्वचा को पकड़ने के लिए उंगलियों का उपयोग करें।

5. घुटने के जोड़ ROM का माप

नोट: माप से पहले, खरगोश को शांत करें। माप सांख्यिकीविद् और ऑपरेटर एक दूसरे से अलग हैं।

  1. प्रयोग की शुरुआत और प्रत्येक सप्ताह के अंत में प्रत्येक समूह के खरगोशों के बाएं घुटने के जोड़ की गतिशीलता को मापें।
  2. खरगोश निर्धारण बॉक्स में खरगोश को अपनी दाईं ओर रखें और एक हाथ से इसकी बाईं फीमर को ठीक करें।
  3. खरगोश के बाएं घुटने के जोड़ के पार्श्व केंद्र के साथ चिकित्सा आर्थ्रोस्कोप के सर्कल के केंद्र को संरेखित करें। फिक्सेशन आर्म को इस तरह से बढ़ाएं कि यह सर्कल के केंद्र को ग्रेटर ट्रॉचंटर से जोड़ने वाले लाइन एक्सटेंशन के समानांतर हो। मोबाइल बांह का विस्तार करें जैसे कि यह टिबिया के अनुदैर्ध्य अक्ष के समानांतर हो।
  4. दूसरे हाथ को टिबिया के अनुदैर्ध्य अक्ष पर रखें, घुटने के जोड़ से लगभग 9 सेमी। मैन्युअल रूप से 3 ° /सेकंड 28 के कोणीय वेग पर लगभग 750-850 ग्राम टोक़ लागू करें।
  5. ऐसा तब तक करें जब तक कि खरगोश के घुटने का जोड़ अब हिल न रहा हो। जब जोड़ चलना बंद हो जाता है तो गोनोमीटर प्रदर्शित होने वाली डिग्री की संख्या रिकॉर्ड करें; यह घुटने का जोड़ ROM है। पढ़ते समय, सुनिश्चित करें कि दृष्टि की रेखा शासक की सतह के लंबवत है।
  6. प्रत्येक घुटने के लिए ROM को 3x मापें और औसत मान28 लें।

6. हेमटोक्सीलिन-ईओसिन (एचई) धुंधला होना।

  1. नमूना संग्रह
    1. हस्तक्षेप के अंत से 1 सप्ताह (चित्रा 1), खरगोश को खरगोश निर्धारण बॉक्स में अपनी दाईं ओर रखें (खरगोशों को उनके दाईं ओर लेटने पर आराम रहने की अधिक संभावना है)। मानवीय इच्छामृत्यु के लिए खरगोश के कान की सीमांत नस में पेंटोबार्बिटोन (100 मिलीग्राम / किग्रा) इंजेक्ट करें।
    2. डिस्टल फीमर के उपास्थि के चारों ओर जुड़े नरम ऊतक को हटाने के लिए बाएं घुटने की गुहा को स्केलपेल, कैंची और हेमोस्टैटिक बल के साथ जल्दी से खोलें।
    3. डिस्टल फीमर के लगभग 1 सेमी x 1 सेमी उपास्थि-हड्डी के नमूने को काटने के बल के साथ इकट्ठा करें और इसे सफाई के लिए खारा में रखें।
  2. निर्धारण और विघटन।
    1. उपास्थि को 4% पैराफॉर्मलडिहाइड घोल में रखें और इसे 72 घंटे के लिए ठीक करें।
    2. 12 घंटे के लिए बहते पानी में धो लें। 6 सप्ताह के लिए एथिलीनडायमाइनटेट्राएसेटिक एसिड (ईडीटीए) डीकैल्सीफिकेशन समाधान में डिकैल्सीफाइ। हर 3 दिनों में ईडीटीए डीकैल्सीफिकेशन समाधान बदलें। डीकैल्सीफिकेशन का अंतिम बिंदु निर्धारित करें जब हड्डी के ऊतक नरम और लचीले हो जाते हैं, आसानी से मोड़े जा सकते हैं, और सुई31 के साथ आसानी से छेददिए जा सकते हैं।
  3. एम्बेडेड वर्गों का निर्जलीकरण
    1. निर्जलीकरण के लिए नमूना को एक स्वचालित डिहाइड्रेटर में रखें।
    2. मोम और छंटनी किए गए ऊतक को 1 घंटे के लिए घुलित पैराफिन मोम के साथ एक चौकोर कंटेनर के तल पर रखें। उन्हें ठंडा होने तक एक ठंडा ओवन में रखें और कठोर ब्लॉकों में जम जाएं। पैराफिन-एम्बेडेड ऊतक ब्लॉक को एक स्लाइसर में 4 μm की मोटाई तक स्लाइस करें।
    3. ब्लीच मशीन में अनुभागों को उजागर करें, फिर उन्हें चिपकने वाली स्लाइड पर रखें, उन्हें नंबर दें, और उन्हें स्लाइस बेकिंग मशीन और ओवन के साथ सुखाएं।
  4. डी-वैक्सिंग और हाइड्रेशन
    1. 60 मिनट के लिए 65 डिग्री सेल्सियस पर अनुभागों को बेक करें।
    2. खंडों को 7 मिनट के लिए जाइलीन में भिगोएं, इसके बाद 7 मिनट के लिए ताजा जाइलीन में भिगोने के 2 और राउंड करें।
    3. स्लाइस को निर्जल इथेनॉल में 5 मिनट के लिए भिगोएं, इसके बाद 95% इथेनॉल, 85% इथेनॉल और 75% इथेनॉल में 2 मिनट के लिए भिगोएं।
    4. अनुसुत जल में अनुभागों को 2 मिनट के लिए भिगोएँ।
  5. हेमटोक्सीलिन धुंधला: 20 सेकंड के लिए हेमटोक्सीलिन के साथ दाग अनुभाग। बहते पानी में अनुभागों को धोएं। हाइड्रोक्लोरिक एसिड इथेनॉल फ्रैक्शनेशन में 3 सेकंड के लिए अनुभाग भिगोएं। 5 मिनट के लिए नल के पानी में अनुभागों को धो लें।
  6. ईओसिन फिर से धुंधला होना: 30 सेकंड के लिए ईओसिन के साथ दाग अनुभाग। नल के पानी से अनुभागों को धो लें।
  7. नमूने की पारदर्शिता के लिए निर्जलीकरण
    1. प्रत्येक 3 सेकंड के लिए दो बार 95% इथेनॉल में अनुभाग रखें, इसके बाद 3 एस के लिए निर्जल इथेनॉल में रखें।
    2. फिर, स्लाइस को निर्जल इथेनॉल में 1 मिनट के लिए रखें, इसके बाद 1 मिनट के लिए जाइलीन धोने के 2 राउंड करें।
  8. स्लाइस की सीलिंग: स्लाइस को बाहर निकालें, न्यूट्रल गम सीलर को छोड़ दें, कवरस्लिप के साथ कवर करें, और स्लाइस को गंधहीन होने तक फ्यूम हुड में सूखने के लिए छोड़ दें।
  9. नमूने की तस्वीर: 100x पर प्रकाश माइक्रोस्कोप के दृश्य क्षेत्र के तहत निरीक्षण और फोटोग्राफ करें।
  10. मूल्यांकन: प्रत्येक समूह32 के लिए मैनकिन के स्कोर द्वारा उपास्थि ऊतक का मूल्यांकन करें।

7. डेटा विश्लेषण

  1. विश्लेषण सॉफ्टवेयर का उपयोग करके प्रयोगात्मक डेटा का सांख्यिकीय विश्लेषण करें। जब डेटा को सामान्य वितरण के अधीन किया गया था, तो टी-टेस्ट द्वारा नमूनों के दो समूहों और एक-तरफा एनोवा द्वारा कई समूहों की तुलना करें।
  2. परिणामों को मानक विचलन (एसडी) ± रूप में व्यक्त करें। वाणिज्यिक सॉफ्टवेयर का उपयोग करके सांख्यिकीय भूखंडों के रूप में परिणामों का प्रतिनिधित्व करें। पी < 0.05 पर अंतर सांख्यिकीय रूप से महत्वपूर्ण थे।

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Representative Results

प्रतिबंधित घुटने की गति और उपास्थि ऊतक क्षति की डिग्री केओए की गंभीरता को दर्शाती है। घुटने के जोड़ का ROM घुटने के जोड़ों की गति के प्रतिबंध की डिग्री को दर्शाता है। घुटने का जोड़ रोम जितना छोटा होता है, घुटने के जोड़ों की गति की सीमा उतनी ही गंभीर होती है। इसके विपरीत, घुटने का जोड़ रोम जितना बड़ा होता है, घुटने की गति की डिग्री उतनी ही सामान्य होती है। उपास्थि ऊतक की आकृति विज्ञान और संरचना का निरीक्षण करने के लिए एचई धुंधला उपास्थि ऊतक क्षति की डिग्री को दर्शाता है। उपास्थि ऊतक की सतह जितनी अनियमित होती है, दरारें और दोषों का उच्च अस्तित्व होता है, चोंड्रोसाइट्स की संख्या कम होती है, उपास्थि परत की मोटाई उतनी ही पतली होती है, कोशिकाओं की व्यवस्था उतनी ही अधिक अव्यवस्थित होती है, कोशिकाओं का वितरण उतना ही असमान होता है, परतें उतनी ही अस्पष्ट होती हैं, ज्वार रेखा उतनी ही कम स्पष्ट और पूर्ण होती है, मैनकिन का स्कोर जितना अधिक होता है, घुटने के जोड़ के उपास्थि ऊतक को नुकसान उतना ही गंभीर होता है, और दूसरे तरीके से, उपास्थि ऊतक32 जितना अधिक सामान्य होता है। केओए मॉडल की स्थापना करते समय, मॉडलिंग की सफलता खरगोश घुटने के संयुक्त आंदोलन23,24 के प्रतिबंध की डिग्री को देखकर निर्धारित की जा सकती है। ट्यूना की प्रभावकारिता को घुटने के संयुक्त गति की सीमा की डिग्री और उपास्थि ऊतक क्षति की डिग्री में सुधार को देखकर निर्धारित किया जा सकता है जब खरगोश घुटने के जोड़ को टुइना12 द्वारा हस्तक्षेप किया जाता है।

सप्ताह 7 के बाद, खरगोशों के दो समूहों के बाएं घुटने के जोड़ की तुलना करने से पता चला कि मॉडलिंग समूह में मांसपेशियां कठोर थीं और आंदोलन सीमित था, जिसमें 74.67 ° ± 1.21 ° का ROM था, जो शाम समूह में 140.17 ° ± 1.33 ° से कम था, जो सफल मॉडलिंग का सुझाव देता है (चित्रा 2 सी, चित्रा 4)।

माप और विश्लेषण के 12 वें सप्ताह के बाद, शाम समूह, मॉडल समूह और तुइना समूह के घुटने के संयुक्त रोम क्रमशः 140.33 ° ± 1.37 °, 76.33 ° ± 1.37 ° और 134.33 ° ± 1.51 ° थे, और ट्यूना समूह की घुटने की संयुक्त गतिशीलता मॉडल समूह (पी < 0.01) की तुलना में काफी अधिक थी, यह दर्शाता है कि टुइना केओए खरगोशों के घुटने के संयुक्त कार्य में सुधार कर सकता है (चित्र 5)।

प्रत्येक समूह में खरगोशों के बाएं घुटने के जोड़ के उपास्थि के धुंधला होने से पता चला कि शाम समूह की उपास्थि ऊतक की सतह चिकनी और बरकरार थी, चोंड्रोसाइट्स की संख्या 331.67 ± 13.98 थी, उपास्थि परत की मोटाई 259.42 ± 41.97 μm थी, कोशिकाओं को अच्छी तरह से व्यवस्थित और समान रूप से वितरित किया गया था, स्तर स्पष्ट थे, ज्वार रेखाएं स्पष्ट, निरंतर और पूर्ण थीं, और मैनकिन का स्कोर 0.33 ± 0.52 था। शाम समूह की तुलना में, मॉडल समूह की उपास्थि ऊतक की सतह दोषों और विदर के साथ अनियमित थी, चोंड्रोसाइट्स की संख्या 29.50 ± 8.04 थी, उपास्थि परत की मोटाई 103.15 ± 24.64 μm थी, कोशिकाएं अव्यवस्थित थीं, असमान रूप से वितरित थीं, परतें स्पष्ट नहीं थीं, ज्वार रेखाएं स्पष्ट और अधूरी थीं, और मैनकिन का स्कोर 9.33 ± 1.03 था। मॉडल समूह की तुलना में, ट्यूना समूह के उपास्थि में एक नियमित सतह थी, जिसमें कम दोष और विदर थे, चोंड्रोसाइट्स की संख्या 291.83 ± 8.18 थी, उपास्थि परत की मोटाई 183.58 ± 15.34 μm थी, कोशिकाएं अधिक व्यवस्थित रूप से व्यवस्थित थीं, थोड़ी असमान रूप से वितरित की गई थीं, परतें स्पष्ट थीं, और ज्वार रेखाएं अपेक्षाकृत स्पष्ट और पूर्ण थीं, और मैनकिन का स्कोर 3.00 ± 0.63 (चित्रा 6) 15,23,33 था। टुइना समूह में कोशिकाओं की संख्या, उपास्थि परत की मोटाई, और मैनकिन का स्कोर मॉडल समूह (पी < 0.001) की तुलना में काफी बेहतर था, यह दर्शाता है कि ट्यूना क्षतिग्रस्त उपास्थि ऊतक की मरम्मत कर सकता है।

Figure 1
चित्रा 1: केओए मॉडल खरगोशों की स्थापना और तुइना के लिए प्रोटोकॉल। 1 सप्ताह के लिए खरगोशों के अनुकूली भोजन के बाद, मॉडलिंग की शुरुआत के दिन 1, 4 और 7 पर 4% पपैन समाधान के इंजेक्शन के साथ, 6 सप्ताह के लिए खरगोशों के बाएं घुटने के जोड़ पर केओए मॉडल का निर्माण करें। 4 सप्ताह के लिए टुइना द्वारा खरगोशों के बाएं घुटने के जोड़ में हस्तक्षेप करें, हर दूसरे दिन 1 बार। खिलाने के 1 सप्ताह के बाद, खरगोशों के बाएं घुटने के जोड़ के रोम को मापें और नमूने लें। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

Figure 2
चित्रा 2: केओए मॉडल की स्थापना । (ए) खरगोशों के बाएं घुटने के जोड़ को तैयार किया गया और कीटाणुरहित किया गया। (बी) सुई को वैक्सियन से डाला गया था, और 4% पपैन समाधान और 0.9% सोडियम क्लोराइड समाधान क्रमशः मॉडलिंग और खरगोशों के शाम समूहों के घुटने के संयुक्त गुहा में इंजेक्ट किया गया था। (सी) बाएं घुटने के जोड़ की सीमित गति के साथ केओए मॉडल खरगोशों को सफलतापूर्वक ढाला गया। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

Figure 3
चित्रा 3: तुइना तकनीक पैरामीटर निर्धारण उपकरण का उपयोग करके तुइना तकनीकों के लिए प्रशिक्षण। (ए) अंगूठे से रोटेटरी गूंधने की विधि के लिए प्रशिक्षित करें। (बी) अंगूठे से रोटनेटरी गूंधने की विधि का वक्र। (सी) अंगूठे के अंत के साथ दबाने की विधि को प्रशिक्षित करें। (डी) अंगूठे के अंत के साथ दबाने की विधि का वक्र। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

Figure 4
चित्रा 4: मॉडलिंग से पहले और बाद में खरगोशों में बाएं घुटने के जोड़ रॉम। डेटा को शाम और मॉडलिंग समूहों के बारे में टी-टेस्ट द्वारा संसाधित किया गया था, और परिणामों को एसडी एनएस पी > 0.05, ***पी < 0.001 ± रूप में व्यक्त किया गया था। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

Figure 5
चित्र 5: खरगोशों के बाएं घुटने के जोड़ रॉम। शाम, मॉडल और ट्यूना समूहों के लिए, डेटा को एनोवा द्वारा संसाधित किया गया था, और परिणामों को एसडी ± औसत के रूप में व्यक्त किया गया था। सप्ताह 1 में, ROM सभी तीन समूहों में थोड़ा बढ़ गया। शाम समूह की तुलना में, मॉडलिंग के समय मॉडल और ट्यूना समूहों में ROM धीरे-धीरे कम हो गया (पी < 0.001)। मॉडल समूह के विपरीत, टूइना समूह (पी < 0.001) में हस्तक्षेप के बाद रोम धीरे-धीरे बढ़ गया। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

Figure 6
चित्र 6: खरगोश के घुटने के जोड़ के उपास्थि का धुंधला होना। (ए) दिखावटी समूह का धुंधला होना। (बी) मॉडल समूह का एचई धुंधला होना। (ग) तुइना समूह का धुंधला होना। (डी) समूहों के बीच चोंड्रोसाइट्स की संख्या की तुलना। (ई) समूहों के बीच उपास्थि परत मोटाई की तुलना। (एफ) समूहों के बीच मैनकिन के स्कोर की तुलना। डेटा को एनोवा द्वारा संसाधित किया गया था, और परिणामों को एसडी ± औसत के रूप में व्यक्त किया गया था। 12 सप्ताह के बाद, जैसा कि एचई धुंधला द्वारा देखा गया था, समूह के उपास्थि ऊतक संरचनात्मक रूप से सामान्य सेल संख्या और व्यवस्था के साथ बरकरार थे; मॉडल समूह के उपास्थि ऊतक को संरचनात्मक रूप से कम कोशिका संख्या और अव्यवस्थित व्यवस्था के साथ नष्ट कर दिया गया था; ट्यूना समूह के उपास्थि ऊतक अपेक्षाकृत सामान्य सेल संख्या और व्यवस्था के साथ बरकरार थे। *** पी < 0.001. स्केल बार = 100 μm. N = 6. कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

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Discussion

प्रयोगात्मक प्रोटोकॉल का डिजाइन केओए के इलाज में ट्यूना के तंत्र की जांच करने के लिए विशेष रूप से महत्वपूर्ण है। केओए मॉडलिंग वैक्सियन में पपैन के इंजेक्शन द्वारा खरगोशों पर किया गया था। वैक्सियन पेटेलर लिगामेंट के पार्श्व क्रिप्ट में स्थित है, जिसका पता लगाना आसान है, और घुटने के फ्लेक्सन के दौरान फीमर और टिबिया के बीच संयुक्त स्थान यहां बड़ा है, जिससे घुटने के संयुक्त गुहा में इंजेक्ट करना आसान हो जाता है और आसपास के ऊतकों को नुकसान से बचाता है, इसलिए केओए मॉडल34 स्थापित करना आसान है। केओए खरगोशों में ट्यूना हस्तक्षेप के दौरान, मॉडल खरगोशों को ट्यूना प्रशासन की सुविधा के लिए उचित रूप से तैनात किया गया था। खरगोशों को उनके स्वस्थ पक्ष पर खरगोश निर्धारण बॉक्स में रखा गया था, उनके सिर को ठीक किया गया था, और उनकी भावनाओं को उनके पूरे शरीर को आराम देने और संघर्ष नहीं करने के लिए शांत किया गया था। तुइना की ताकत और आवृत्ति को मानकीकृत करने और तुइना हस्तक्षेप की एकरूपता में सुधार करने के लिए, टुइना एक ऑपरेटर द्वारा किया जाता है जिसने ट्यूना तकनीक पैरामीटर निर्धारण उपकरण द्वारा ट्यूना हेरफेर में कठोर प्रशिक्षण लिया है।

इस प्रोटोकॉल में महत्वपूर्ण कदम केओए के इलाज के लिए घुटने के संयुक्त रोटरी सुधार विधि के साथ संयुक्त ट्यूना का उपयोग कर रहा है। ऑपरेशन से पहले, खरगोश के प्रभावित निचले सिरा को कूल्हे से टखने तक झुकाया गया था, घुटने के जोड़ के आसपास के क्षेत्र पर ध्यान केंद्रित किया गया था, कण्डरा गांठ और मांसपेशियों की कठोरता की जांच की गई थी, और फिर घुटने के जोड़ को फ्लेक्स और विस्तारित किया गया था ताकि सटीक ट्यूना हेरफेर के लिए नीक्सियन और वैक्सियन की ऊंचाई का निरीक्षण किया जा सके। रोटेटरी गूंधने और दबाने की विधि मांसपेशियों में तनाव और ऐंठन को छोड़ सकती है, घुटने के जोड़ में रक्त परिसंचरण में सुधार कर सकती है, भड़काऊ पदार्थों के चयापचय को बढ़ावा दे सकती है, और सूजन और दर्द को कम कर सकती है35,36. एक्यूपंक्चर बिंदु रोग की प्रतिक्रिया और उपचार बिंदु हैं, और जीबी 34 और ईएक्स-एलई 2 केओए के उपचार के लिए उच्च संवेदनशीलता वाले बिंदु हैं, और उन्हें उत्तेजित करके, वे मस्तूल कोशिकाओं पर कार्य कर सकते हैं, इस प्रकार 5-हाइड्रॉक्सीट्रिप्टामाइन, ट्रिप्टाज़ और हिस्टामाइन37 की रिहाई को प्रभावित कर सकते हैं। डेटा माइनिंग से पता चला है कि जीबी 34, एसपी 9, एक्स-एलई 5, एक्स-एलई 4, एक्स-एलई 2, एसपी 10, एसटी 34, और बीएल 40 सभी नैदानिक अभ्यास38,39 में आमतौर पर उपयोग किए जाने वाले एक्यूपंक्चर बिंदु हैं। इन बिंदुओं में कण्डरा और गांठों से राहत, रक्त परिसंचरण को सक्रिय करने और दर्द से राहत देने के प्रभाव होते हैं38,39. अध्ययनों से पता चला है कि उपरोक्त एक्यूपॉइंट्स की उत्तेजना ट्यूमर नेक्रोसिस फैक्टर -α और इंटरल्यूकिन -1 जैसे भड़काऊ कारकों के सीरम स्तर को कम कर सकती है और चोंड्रोसाइट्स कंकाल के विनाश को रोक सकती है, इस प्रकार केओए 39,40,41 का इलाज करती है।

समायोज्य बल स्तर के साथ सक्रिय प्रतिरोध अभ्यास के तहत की जाने वाली घुटने की संयुक्त रोटरी सुधार विधि प्रदर्शन करना आसान है और फ्लेक्सन और संपीड़न जैसी निष्क्रिय आंदोलन तकनीकों की तुलना में घुटने की संरचना को विनियमित करने में चोट के संभावित जोखिम से बचता है। कोण टोक़ को प्रभावित करता है, और घुटने के जोड़ के आंतरिक समापन टोक़ और अपहरण टोक़ के बीच असंतुलन असामान्य संयुक्त लोडिंग को बढ़ा सकता है, जो केओए42,43,44,45 को ट्रिगर कर सकता है। कुछ अध्ययनों से पता चला है कि नियमित प्रतिरोध व्यायाम के साथ तुइना हस्तक्षेप हड्डियों के घनत्व में सुधार कर सकता है, मांसपेशियों की ऐंठन को छोड़ सकता है, मांसपेशियों और ताकत को बहाल कर सकता है, दर्द को कम कर सकता है, और प्रभावी ढंग से केओए 46,47,48,49,50 का इलाज कर सकता है। चूंकि खरगोश का घुटना मानव घुटने से छोटा होता है और स्वैच्छिक प्रतिरोध आंदोलनों का प्रदर्शन नहीं कर सकता है, इसलिए प्रतिरोध12 के तहत घुटने के संयुक्त रोटरी सुधार विधि की बेहतर प्रभावकारिता और संचालन में आसानी सुनिश्चित करने के लिए मूल दो-व्यक्ति ट्यूना को एक-व्यक्ति, दो-हाथ वाले ट्यूना में बदल दिया गया था। अब, प्रतिरोध आंदोलन का अनुकरण करने के लिए एक हाथ से खरगोश की फीमर को ठीक करके, दूसरे हाथ का उपयोग निचले शियान पर घुमाव और कर्षण बल लागू करके घुटने के जोड़ रोटरी सुधार विधि को करने के लिए किया जाता है ताकि वैक्सियन और नीक्सियन एक ही ऊंचाई पर हों और औसत दर्जे के और पार्श्व टिबियल पठार की सापेक्ष ऊंचाई समायोजित हो। घुटने के जोड़ को इसके अंदर और बाहर के टोक़ को विनियमित करने, अक्षीय संरेखण को बढ़ावा देने, फेमोरोटिबियल और फेमोरोपेटेलर जोड़ों के संरेखण को समायोजित करने, घुटने के जोड़ की सामान्य बल संरचना को बहाल करने, घुटने के संयुक्त भार को कम करने, घुटने के संयुक्त स्थिरता को बढ़ाने और घुटनेके जोड़ की सामान्य गतिशीलता और शारीरिक कार्य को बहाल करने के लिए अंदर और बाहर समायोजित किया जा सकता है। 43,44,45.

टीम के पिछले नैदानिक अध्ययनों ने केओए के इलाज में इस पद्धति की प्रभावकारिता दिखाई है, और जानवरों के अध्ययन से पता चला है कि यह केओए12 के इलाज में ग्लूकोसामाइन सल्फेट से अधिक प्रभावी है। ट्यूना इंटरल्यूकिन 1 (आईएल -1 ) और बाह्य संकेत-विनियमित काइनेज 1/2 (ईआरके 1/2) -परमाणु प्रतिलेखन कारक κB (एनएफ-3बी) सिग्नलिंग मार्गों को मध्यस्थ कर सकता है, खरगोश परिधीय सीरम और संयुक्त तरल पदार्थ में आईएल -1 की एकाग्रता को कम कर सकता है, बी-सेल लिम्फोमा -2 (बीसीएल -2) के अभिव्यक्ति स्तर को बढ़ा सकता है, और ईआरके 1/2, बीसीएल -2 से जुड़े एक्स प्रोटीन, एनएफ-2 से जुड़े एक्स प्रोटीन, एनएफ-2 पी 65 और सिस्टीन के अभिव्यक्ति स्तर को कम कर सकता है। यह चोंड्रोसाइट्स के एपोप्टोसिस और प्रसार को विनियमित करने और अव्यवस्थित चोंड्रोसाइट्स आंतरिक वातावरण को संतुलित करने में मदद करता है, इस प्रकार उपास्थि12 में रोग संबंधी परिवर्तनों में सुधार करता है।

इस विधि की सीमा यह है कि तुइना का हस्तक्षेप एक मशीन के बजाय एक मानव द्वारा किया जाता है, और ऑपरेटर के लिए ट्यूना की ताकत और आवृत्ति में पूर्ण समरूपता प्राप्त करना मुश्किल है।

अंत में, ट्यूना घुटने के जोड़ों की सूजन को प्रभावी ढंग से कम कर सकता है, घुटने के उपास्थि के अध: पतन को रोक सकता है, और धीरे-धीरे सामान्य शारीरिक गतिशीलता को बहाल कर सकता है, और यह अध्ययन घुटने के जोड़ों के रोगों के ट्यूना उपचार के तंत्र के लिए एक वैज्ञानिक और व्यवहार्य अनुसंधान प्रोटोकॉल प्रदान कर सकता है।

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Disclosures

लेखक ों ने हितों के किसी संभावित टकराव की घोषणा नहीं की है।

Acknowledgments

इस काम को शेडोंग प्रांतीय पारंपरिक चीनी चिकित्सा विज्ञान और प्रौद्योगिकी परियोजना (2021Q080) और पारंपरिक चीनी चिकित्सा अकादमिक स्कूल इनहेरिटेंस प्रोजेक्ट [लू-वेई-लेटर (2022) 93] के किलू स्कूल द्वारा समर्थित किया गया था।

Materials

Name Company Catalog Number Comments
0.9 % sodium chloride injection Sichuan Keren Pharmaceutical Co. Z22121903
-20°C refrigerator Haier BD-328WL
4 % fixative solution Solarbio P1110
4°C refrigerator Haier SC-315DS
Anhydrous ethanol Sinopharm
Automatic tissue dewatering machine Dakowei (Shenzhen) Medical Equipment Co. HP30
Blast drying oven Shanghai Yiheng Scientific Instruments Co. DHG-9070A
Coverslip Biyuntian FCGF50
Electric thermostat water bath Shanghai Yiheng Scientific Instruments Co. HWS-26
Embedding freezing table Changzhou Paishijie Medical Equipment Co. BM450
Embedding machine Changzhou Paishijie Medical Equipment Co. BM450A
Ethylenediaminetetraacetic acid decalcification solution Servicebio G1105-500ML
Fluorescent inverted microscope Leica Leica DM IL LED
Hematoxylin-eosin staining kit Cisco Jet EE0012
Hydrochloric acid Laiyang Economic and Technological Development Zone Fine Chemical Plant
Medical joint goniometer KOSLO
Neutral gum Cisco Jet EE0013
Normal-grade male New Zealand rabbit Jinan Xilingjiao Breeding and Breeding Center SCXK (Lu) 2020 0004
Papain(3000 U/mg) Bioss D10366
Pathological tissue bleaching and drying instrument Changzhou Paishijie Medical Equipment Co. PH60
Pet electric clippers Codos CP-3180
Rabbit fixing box any brand
Rotating Slicer Leica 531CM-Y43
Tuina technique parameter determination instrument Shanghai DuKang Instrument Equipment Co. Ltd. ZTC-Equation 1
Ventilator TALY ELECTRIC C32
Xylene Fuyu Reagent

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References

  1. Long, H. B., et al. Prevalence trends of site-specific osteoarthritis from 1990 to 2019: findings from the global burden of disease study 2019. Arthritis & Rheumatology. 74 (7), 1172-1183 (2022).
  2. Tschopp, M., et al. A randomized trial of intra-articular injection therapy for knee osteoarthritis. Investigative Radiology. 58 (5), 355-362 (2023).
  3. Buchanan, W. W., Kean, C. A., Kean, W. F., Rainsford, K. D. Osteoarthritis. Inflammopharmacology. , (2023).
  4. Wang, W. Y., et al. A randomized, parallel control and multicenter clinical trial of evidence-based traditional Chinese medicine massage treatment VS External Diclofenac Diethylamine Emulgel for the treatment of knee osteoarthritis. Trials. 23 (1), 555 (2022).
  5. Wang, M. N., et al. Mechanism of traditional Chinese medicine in treating knee osteoarthritis. Journal of Pain Research. 13, 1421-1429 (2020).
  6. Katz, J. N., Arant, K. R., Loeser, R. F. Diagnosis and treatment of hip and knee osteoarthritis: A review. The Journal of the American Medical Association. 325 (6), 568-578 (2021).
  7. Chang, A., et al. The relationship between toe-out angle during gait and progression of medial tibiofemoral osteoarthritis. Annals of the Rheumatic Diseases. 66, 1271-1275 (2007).
  8. Jenkyn, T. R., Hunt, M. A., Jones, I. C., Giffin, J. R., Birmingham, T. B. Toe-out gait in patients with knee osteoarthritis partially transforms external knee adduction moment into flexion moment during early stance phase of gait: a tri-planar kinetic mechanism. Journal of Biomechanics. 41 (2), 276-283 (2008).
  9. Brouwer, G. M., et al. Association between valgus and varus alignment and the development and progression of radiographic osteoarthritis of the knee. Arthritis & Rheumatism. 56 (4), 1204-1211 (2007).
  10. Liao, C. D., et al. Effects of protein supplementation combined with resistance exercise training on walking speed recovery in older adults with knee osteoarthritis and sarcopenia. Nutrients. 15 (7), 1552 (2023).
  11. Thudium, C. S., et al. Cartilage tissue turnover increases with high-compared to low-intensity resistance training in patients with knee OA. Arthritis Research & Therapy. 25 (1), 22 (2023).
  12. Zheng, L. J., et al. Shutiao Jingjin massage can stabilize intracellular environment of rabbit chondrocytes following knee osteoarthritis-induced cartilage injury. Zhongguo Zuzhi Gongcheng Yanjiu. 27, (2023).
  13. Liu, K. Q., et al. Efficacy and safety of Tuina (Chinese therapeutic massage) for knee osteoarthritis: A randomized, controlled, and crossover design clinical trial. Frontiers in Medicine. 10, 997116 (2023).
  14. Wang, Z., et al. Systematic Review and Network Meta-analysis of Acupuncture Combined with Massage in Treating Knee Osteoarthritis. BioMed Research International. 2022, 4048550 (2022).
  15. Li, Y. Y., et al. Therapeutic effect of acupotomy at Sanheyang for cartilage collagen damage in moderate knee osteoarthritis: a rabbit model. Journal of Inflammation Research. 16, 2241-2254 (2023).
  16. Guo, G. X., et al. Cerebral mechanism of Tuina analgesia in management of knee osteoarthritis using multimodal MRI: study protocol for a randomised controlled trial. Trials. 23 (1), 694 (2022).
  17. Perlman, A., et al. Efficacy and safety of massage for osteoarthritis of the knee: a randomized clinical trial. Journal of General Internal Medicine. 34 (3), 379-386 (2019).
  18. Chen, B. J., et al. Aerobic exercise combined with glucosamine hydrochloride capsules inhibited the apoptosis of chondrocytes in rabbit knee osteoarthritis by affecting TRPV5 expression. Gene. 830, 146465 (2022).
  19. Rasheed, M. S., Ansari, S. F., Shahzadi, I. Formulation, characterization of glucosamine loaded transfersomes and in vivo evaluation using papain induced arthritis model. Scientific Reports. 12 (1), 19813 (2002).
  20. Li, Z. R. Experimental acupuncturology. Beijing: China Press of Traditional Chinese Medicine. 2003, 314-319 (2003).
  21. Hu, Y. L. Manual of practical animal acupuncture. Beijing: China Press of Agriculture. 2003, 286-298 (2014).
  22. Liu, J., et al. Effects of "knot-loosing" of acupotomy on motor function and morphological changes of knee joint in knee osteoarthritis rabbits. Zhen Ci Yan Jiu. 46 (2), 129-135 (2021).
  23. Li, Q., et al. The protective effects and mechanism of Ruyi Zhenbao Pill, a Tibetan medicinal compound, in a rat model of osteoarthritis. Journal of Ethnopharmacology. 308, 116255 (2023).
  24. Kwon, M., Nam, D., Kim, J. Pathological characteristics of monosodium iodoacetate-induced osteoarthritis in rats. Tissue Engineering and Regenerative Medicine. 20 (3), 435-446 (2023).
  25. Wang, J. G., Tang, C. L. Experimental Tuina science. Beijing: China Press of Traditional Chinese Medicine. Chinese. , (2017).
  26. Fang, M., Song, B. L. Tuina science. Beijing: China Press of Traditional Chinese Medicine. , (2016).
  27. Jin, X. Y., Yu, Y. Y., Lin, Y. Y., Yang, J. P., Chen, Z. H. Tendon-regulating and bone-setting manipulation promotes the recovery of synovial inflammation in rabbits with knee osteoarthritis via the TLR4-MyD88-NF-κB signaling pathway. Annals of Translational Medicine. 11 (6), 245 (2023).
  28. Wang, M., Liu, C., Xiao, W. Intra-articular injection of hyaluronic acid for the reduction in joint adhesion formation in a rabbit model of knee injury. Knee Surgery, Sports Traumatology, Arthroscopy: Official Journal of the ESSKA. 22 (7), 1536-1540 (2014).
  29. Xu, C., et al. Bacterial cellulose membranes used as artificial substitutes for dural defection in rabbits. International Journal of Molecular Sciences. 15 (6), 10855-10867 (2014).
  30. Leary, S., et al. AVMA guidelines for the euthanasia of animals: 2020 edition. Schaumburg: American Veterinary Medical Association. 2020, (2020).
  31. Amirtham, S. M., Ozbey, O., Kachroo, U., Ramasamy, B., Vinod, E. Optimization of immunohistochemical detection of collagen type II in osteochondral sections by comparing decalcification and antigen retrieval agent combinations. Clinical Anatomy. 33 (3), 343-349 (2020).
  32. Niazvand, F., et al. Curcumin-loaded poly lactic-co-glycolic acid nanoparticles effects on mono-iodoacetate-induced osteoarthritis in rats. Veterinary Research Forum: An International Quarterly Journal. 8 (2), 155-161 (2017).
  33. Liu, A., et al. Intra-articular injection of umbilical cord mesenchymal stem cells loaded with graphene oxide granular lubrication ameliorates inflammatory responses and osteoporosis of the subchondral bone in rabbits of modified papain-induced osteoarthritis. Frontiers in Endocrinology. 12, 822294 (2022).
  34. Hall, M. M. The accuracy and efficacy of palpation versus image-guided peripheral injections in sports medicine. Current Sports Medicine Reports. 12 (5), 296-303 (2013).
  35. Xing, L., et al. Traditional Chinese medicine ointment combined with Tuina therapy in treatment of pain and swelling after total knee arthroplasty. World Journal of Orthopedics. 13 (10), 932-939 (2022).
  36. Xu, H., et al. The effectiveness of Tuina in relieving pain, negative emotions, and disability in knee osteoarthritis: a randomized controlled trial. Pain Medicine. 24 (3), 244-257 (2023).
  37. Ding, N., et al. Mast cells are important regulator of acupoint sensitization via the secretion of tryptase, 5-hydroxytryptamine, and histamine. The Public Library of Science One. 13 (3), e0194022 (2018).
  38. Cai, F. H., Li, F. L., Zhang, Y. C., Li, P. Q., Xiao, B. Research on electroacupuncture parameters for knee osteoarthritis based on data mining. European Journal of Medical Research. 27 (1), 162 (2022).
  39. Mei, Z. G., Cheng, C. G., Zheng, J. F. Observations on curative effect of high-frequency electric sparkle and point-injection therapy on knee osteoarthritis. Journal of Traditional Chinese Medicine. 31 (4), 311-315 (2011).
  40. Xiao, G., et al. Effect of manipulation on cartilage in rats with knee osteoarthritis based on the Rho-associated protein kinase/LIM kinase 1/Cofilin signaling pathways. Journal of Traditional Chinese Medicine. 42 (2), 194-199 (2022).
  41. Wu, M. X., et al. Clinical study on the treatment of knee osteoarthritis of Shen-Sui insufficiency syndrome type by electroacupuncture. Chinese Journal of Integrative Medicine. 16 (4), 291-297 (2010).
  42. Richards, R. E., Andersen, M. S., Harlaar, J., van den Noort, J. C. Relationship between knee joint contact forces and external knee joint moments in patients with medial knee osteoarthritis: effects of gait modifications. Osteoarthritis Cartilage. 26 (9), 1203-1214 (2018).
  43. Shull, P. B., et al. Toe-in gait reduces the first peak knee adduction moment in patients with medial compartment knee osteoarthritis. Journal of Biomechanics. 46 (1), 122-128 (2013).
  44. Adouni, M., Shirazi-Adl, A. Partitioning of knee joint internal forces in gait is dictated by the knee adduction angle and not by the knee adduction moment. Journal of Biomechanics. 47 (7), 1696-1703 (2014).
  45. Kutzner, I., Trepczynski, A., Heller, M. O., Bergmann, G. Knee adduction moment and medial contact force--facts about their correlation during gait. The Public Library of Science One. 8 (12), e81036 (2013).
  46. Camacho-Cardenosa, A., et al. Resistance circuit training combined with hypoxia stimulates bone system of older adults: a randomized trial. Experimental Gerontology. 169, 111983 (2022).
  47. Babur, M. N., Siddiqi, F. A., Tassadaq, N., Arshad Tareen, M. A., Osama, M. Effects of glucosamine and chondroitin sulfate supplementation in addition to resistance exercise training and manual therapy in patients with knee osteoarthritis: A randomized controlled trial. The Journal of the Pakistan Medical Association. 72 (7), 1272-1277 (2022).
  48. Wang, H. N., et al. Effect of low-load resistance training with different degrees of blood flow restriction in patients with knee osteoarthritis: study protocol for a randomized trial. Trials. 23 (1), 6 (2022).
  49. Cheon, Y. H., et al. Relationship between decreased lower extremity muscle mass and knee pain severity in both the general population and patients with knee osteoarthritis: Findings from the KNHANES V 1-2. The Public Library of Science One. 12 (3), e0173036 (2017).
  50. Murton, A. J., Greenhaff, P. L. Resistance exercise and the mechanisms of muscle mass regulation in humans: acute effects on muscle protein turnover and the gaps in our understanding of chronic resistance exercise training adaptation. The International Journal of Biochemistry & Cell Biology. 45 (10), 2209-2214 (2013).

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टुइना हस्तक्षेप खरगोश मॉडल घुटने के पुराने ऑस्टियोआर्थराइटिस (केओए) अपक्षयी परिवर्तन उपास्थि नरम ऊतक ट्यूना की प्रभावकारिता अंतर्निहित तंत्र वैज्ञानिक रूप से व्यवहार्य केओए खरगोश मॉडल घुटने के संयुक्त रोटरी सुधार विधि के साथ संयुक्त ट्यूना घुटने की संयुक्त सीमा गति (ROM) चोंड्रोसाइट्स एपोप्टोसिस उपास्थि ऊतक की मरम्मत घुटने के संयुक्त ROM बहाली संभावित अनुप्रयोग
घुटने के पुराने ऑस्टियोआर्थराइटिस के खरगोश मॉडल में ट्यूना हस्तक्षेप
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Zhang, S., Zhang, X., Sun, G., Wang, … More

Zhang, S., Zhang, X., Sun, G., Wang, K., Qiao, Y., He, Y., Li, M., Li, H., Zheng, L. Tuina Intervention in Rabbit Model of Knee Osteoarthritis. J. Vis. Exp. (198), e65763, doi:10.3791/65763 (2023).

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