Summary
Utvikling av farmasøytisk tørt pulver krever pålitelig in vivo-testing , ofte ved bruk av en murinmodell. Enhetsteknologi for nøyaktig og reproduserbar levering av tørrpulveraerosoler til mus er begrenset. Denne studien presenterer engangsdosatorer for levering av lungemedisin ved muserelevante doser, noe som hjelper til med innledende proof-of-concept-forskning.
Abstract
Tørrpulverinhalatorer gir mange fordeler for å levere medisiner til lungene, inkludert stabile solid-state legemiddelformuleringer, enhetsportabilitet, bolusmåling og dosering, og en drivmiddelfri spredningsmekanisme. For å utvikle farmasøytiske tørrpulver aerosolprodukter er robust in vivo-testing avgjørende. Vanligvis innebærer innledende studier bruk av en murinmodell for foreløpig evaluering før man gjennomfører formelle studier på større dyrearter. En betydelig begrensning i denne tilnærmingen er imidlertid mangelen på egnet enhetsteknologi for nøyaktig og reproduserbart å levere tørre pulver til små dyr, noe som hindrer slike modellers nytteverdi. For å møte disse utfordringene ble engangssprøytedosatorer utviklet spesielt for intrapulmonal tilførsel av tørre pulver i doser som passer for mus. Disse dosatorene laster og leverer en forhåndsbestemt mengde pulver hentet fra en jevn pulverseng med bulkdensitet. Denne diskrete kontrollen oppnås ved å stikke en butt nål til en fast dybde (tamping) inn i pulversengen, og fjerne en fast mengde hver gang. Spesielt har dette doseringsmønsteret vist seg å være effektivt for en rekke spraytørkede pulver. I eksperimenter som involverte fire forskjellige spraytørkede pulvermodeller, demonstrerte dosatorene evnen til å oppnå doser innenfor området 30 til 1100 μg. Den oppnådde dosen ble påvirket av faktorer som antall tamper, størrelsen på dosatornålen og den spesifikke formuleringen som ble brukt. En av de viktigste fordelene med disse dosatorene er at de er enkle å produsere, noe som gjør dem tilgjengelige og kostnadseffektive for levering av tørrpulver til mus under innledende proof-of-concept-studier. Dosatorenes engangsbruk forenkler bruken i rom for dyreprosedyrer, der rengjøring og påfylling av gjenbrukbare systemer og veiematerialer er upraktisk. Dermed har utvikling av engangssprøytedosatorer adressert en betydelig hindring i levering av murine tørt pulver for proof-of-concept-studier, slik at forskere kan gjennomføre mer nøyaktige og reproduserbare foreløpige studier i små dyremodeller for lungemedikamentlevering.
Introduction
Bruken av tørrpulverinhalatorer (DPI) for levering av lungemedisin har fått betydelig interesse de siste tre tiårene på grunn av den globale utfasingen av klorfluorkarbondrivmidler 1,2. DPI gir mange fordeler i forhold til andre lungeleveringssystemer, for eksempel doseringsinhalatorer og forstøvere, inkludert formuleringsstabilitet, bærbarhet, brukervennlighet og drivstofffrie spredningsmekanismer2. Før DPI-produkter beveger seg mot klinisk oversettelse, må det imidlertid gjennomføres flere prekliniske studier, hvorav mange i utgangspunktet er fullført ved hjelp av en murinmodell. Likevel er tilgjengelige teknologier for å levere tørt pulver nøyaktig og reproduserbart til små dyr begrenset.
Vanlige metoder for å levere tørre pulver til små dyr, som mus, inkluderer passiv innånding 3,4,5,6,7 og direkte administrering 8,9,10,11,12,13. Passiv innånding krever vanligvis et tilpasset kammer som bruker store doser spraytørket pulver for å forberede en tilstrekkelig aerosolsky. Siden mus er obligatoriske nesepustere14, krever levering ved passiv innånding at pulveret beveger seg gjennom nese og hals for å nå lungene, noe som nødvendiggjør vedlikehold av en aerosolsky med tilstrekkelige partikkelaerodynamiske egenskaper 7,8. Selv om det er en nyttig teknikk som er mer fysiologisk relevant enn direkte levering på grunn av innånding som følge av normal pust14, kan det ikke være egnet for innledende studier der pulvermassen er begrenset.
Alternativt er det rapportert en rekke intratrakeale leveringsenheter for direkte tørrpulverlevering 8,9,10,11,12,13. Intratrakeale enheter omgår nese og hals, leverer pulveret direkte til lungene og gir bedre kontroll over den avgitte dosen14. I tillegg kan noen enheter, spesielt de som er fremstilt ved hjelp av en tampingbelastningsprosedyre9, fremstilles med mindre mengder, noe som er en viktig faktor for innledende proof-of-concept-studier. Mangelen på universelt tilgjengelige intratrakeale leveringsenheter har hindret deres potensial for bruk, begrenset tilgjengelighet og ført til forskjeller mellom laboratorier14. I denne studien foreslår vi en enkel, billig, engangsdosator for intratrakeal levering som kan brukes til proof-of-concept murine studier i utviklingen av tørrpulver aerosoler.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Alle dyreforsøk ble gjennomført i henhold til dyrevelferdsloven og Statens helsetjenestepolicy for humant stell og bruk av forsøksdyr. Studieprotokollen ble godkjent av Institutional Animal Care and Use Committee ved University of Tennessee Health Science Center. Friske kvinnelige BALB / c-mus, ~ 6-8 uker gamle, ble administrert tørrpulverinnholdet i en dosator ved intrapulmonal aerosoltilførsel for en farmakokinetisk studie ved bruk av spektrinamid 1599 tørrpulver9. Dyrene ble hentet fra en kommersiell kilde (se Materialfortegnelse).
1. Klargjøring av dosatoren og fyllingskomponentene
- Trim plastluerdelen av en 2,54 cm (1 tomme) butt nål i rustfritt stål (21-25 G) ved hjelp av enten en presisjonssnittsag (se materialfortegnelse) eller en båndsliper til 2-3 mm av plastlueren gjenstår (figur 1A og figur 2A).
MERK: Hvis en båndsliper brukes, kan det hende at nålen i rustfritt stål må rengjøres med en mindre nål eller ledning for å fjerne mulige hindringer som oppstår. - Klipp av spissen (1-1,5 cm) av et 0,6 ml konisk sentrifugerør. Fyll spissen av røret med 30-35 mg pulver.
MERK: Se representative resultater for detaljer om eksempelpulverene som ble brukt i denne studien. Aerosolytelsen i pulveret bør evalueres før bruk i dette programmet i henhold til standardmetodikk som beskrevet i USP General kapittel <601> (se materialfortegnelse). - Hvis du oppbevarer og/eller transporterer pulveret, bruk beskyttelseshetten (avskåret) for å lukke hetteglasset. Forsegl med parafinfilm for å minimere pulvereksponering for omgivelsesfuktighet ved lagring og/eller transport.
2. Lasting og montering av dosatorer
- Tamp den trimmede kanylen i rustfritt stål inn i pulversengen i den koniske sentrifugerørspissen på 0,6 ml så mange ganger som nødvendig for å oppnå ønsket dose (figur 2B). Tørk forsiktig av sidene av nålen i rustfritt stål med en visker med lite lo for å fjerne overflødig pulver (figur 3).
- Stikk forsiktig den lastede kanylen i rustfritt stål inn i en 3,81 cm (1,5") polypropylen eller 5,08 cm (2 tommer) polytetrafluoretylen (PTFE) nål (16-20 G) (se materialfortegnelsen) for å unngå å løsne pulver (figur 1B, C og figur 2C).
3. Aktivering av dosatorer
- Trekk engangssprøyten tilbake til ønsket volum, som kan variere avhengig av påføring.
MERK: For intrapulmonal administrering hos mus er 0,15-0,6 ml vanligvis passende 8,9. - Fest sprøyten til luerlåsen på polypropylen- eller PTFE-nålen (figur 2D).
- Sett nålenden av dosatoren inn i ønsket mål. For å analysere pulverinnhold og reproduserbarhet, stikk nålen gjennom en perforert gummiseptum eller parafinfilm i et hetteglass som inneholder en liten mengde (f.eks. 1-5 ml) vann og/eller organisk løsningsmiddel (f.eks. etanol), med løsningsmiddelidentitet og volum avhengig av aktive farmasøytiske ingredienser (API) fysiske egenskaper og kvantifiseringsmetoden.
- For levering til mus, stikk nålen opp til første bronkialbifurkasjon av luftrøret hos bedøvede mus etter etablerte protokoller 9,15.
- Trykk sprøyten kraftig ned og støt pulveret ut av anordningen og inn i oppsamlingshetteglasset (figur 2E).
MERK: Den samme teknikken må følges for å levere pulveret til murine lungene. - For å analysere innhold og reproduserbarhet fra hetteglasset, bruk en egnet analysemetode for den spesifikke API-en, for eksempel UV-synlig (UV-Vis) spektrofotometri eller høyytelses væskekromatografi (HPLC).
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Aerosolytelsen til forskjellige spraytørkede pulver ble fastslått før bruk i denne studien. Den aerodynamiske partikkelstørrelsesfordelingen (APSD) ble beskrevet ved massemedian aerodynamisk diameter (MMAD), som representerer størrelsen som deler fordelingen i to ved 50-prosentilen (d50), og det geometriske standardavviket (GSD), som gjenspeiler bredden av fordelingen. GSD er definert av kvadratroten av den aerodynamiske diameteren ved 80-prosentilen dividert med den ved 16-persentilen (d84/d16) 1/2,med persentilene som representerer ett standardavvik på hver side av gjennomsnittet for en log-normal fordeling av masse med hensyn til partikkelstørrelse.
Fire representative spraytørkede pulver ble vurdert for levering ved bruk av dosatorene beskrevet her. De spraytørkede (SD) pulverene, inkludert tigecyklin (SD-1)3, capreomycinsulfat (SD-2)16, spectinamid 1599 (SD-3)9 og albuterolsulfat (SD-4) APIer med hjelpestoffer, representerer en rekke antibakterielle og bronkodilatorformuleringer som er utviklet for en rekke applikasjoner. Før bruk i dosatorene ble den aerodynamiske partikkelstørrelsesfordelingen bestemt for de fire pulverene ved bruk av en tørrpulverinhalator med lav motstand og en kaskadekollisjon med høy ytelse i henhold til USP General kapittel <601> (se materialfortegnelse). MMADene for SD-1, SD-2, SD-3 og SD-4 var henholdsvis 2,6 ± 0,1 μm (GSD = 2,1 ± 0,1), 1,7 ± 0,1 μm (GSD = 2,4 ± 0,1), 1,7 ± 0,4 μm (GSD = 2,7 ± 0,5) og 2,2 ± 0,2 μm (GSD = 2,1 ± 0,3). De fire pulverene viste fine partikkelfraksjoner (<4,46 μm), med hensyn til utsendt dose, på 68% ± 1%, 82% ± 1%, 77% ± 1% og 68% ± 2% for SD-1, SD-2, SD-3 og SD-4, henholdsvis. De fire pulverene visualiseres ved hjelp av scanning elektronmikroskopi i figur 4.
Hvert pulver ble fremstilt i separate 30-35 mg alikoter, og nålen i rustfritt stål (21 G) av dosatoren ble tampet inn i pulversengen 1 til 4 ganger. Dosatoren (21 G innerkanyle i rustfritt stål og 16 G ytre kanyle av polypropylen) ble aktivert i et forseglet hetteglass inneholdende 5 ml vann. Etter forsiktig blanding ble oppløsningen analysert via UV-synlig spektrofotometri (λ = 351 nm, 268 nm, 271 nm og 230 nm for henholdsvis SD-1, SD-2, SD-3 og SD-4) for å overvåke dosen av pulver frigjort fra dosatoren. Den avgitte dosen som funksjon av antall tamper i pulversengen er vist i figur 5. Spesielt viste alle spraytørket pulver en lineær dose-respons (R2 > 0,97) fra 1 til 4 tamper med disse dosatorene. For SD-1 førte en tamp til en pulvertilførsel på 209 ± 99 μg, med hver påfølgende tamp som tilsatte ~ 130 μg (figur 5A). De andre pulverene viste lignende trender, med den første tampen som pådro seg en større dose pulver enn påfølgende tamper. For SD-2 (figur 5B), SD-3 (figur 5C) og SD-4 (figur 5D) førte en tamp til en leveranse på 268 ± 88 μg, 332 ± 95 μg og 412 ± 72 μg, med hver påfølgende tamp som tilførte en mindre mengde på 170-230 μg. Den lineære responsen for hvert pulver tillater kontroll i legemiddelbelastning, med de fire pulverene, SD-1, SD-2, SD-3 og SD-4, som viser oppnåelige områder på henholdsvis 210-570 μg, 270-780 μg, 330-870 μg og 410-1120 μg. Selv om alt er lineært og reproduserbart, fremhever forskjellene sett fra ett spraytørket pulver til et annet nødvendigheten av å karakterisere dosen som frigjøres fra dosatorene for det spesifikke tørrpulveret av interesse.
Dosatorer med mindre diameter ble også forberedt på å evaluere bruken i mindre/yngre mus. Den opprinnelige utformingen beskrevet i forrige avsnitt ble utarbeidet ved bruk av en 16 G polypropylen ytre nål (ytre diameter = 1,7 mm). 21 G nålen i rustfritt stål som brukes i disse dosatorene er også kompatibel med en 20 G PTFE ytre nål (ytre diameter = 1,2 mm) som rapportert av Stewart et al.9 Figur 6A viser bruken av 21 G rustfritt stål / 20 G PTFE dosatorer med pulverformulering SD-1. En liten reduksjon i oppnåelig dose er observert sammenlignet med 21 G rustfritt stål / 16 G polypropylen dosatorer, med den første tampen som resulterer i en dose på 111 ± 62 μg og hver påfølgende tamp tilsetter ~ 96 μg (figur 6A). Den økte lengden på PTFE-nålen (5,08 cm) sammenlignet med polypropylennålen (3,81 cm) og nålens fleksibilitet kan føre til pulvertap. Mindre diameter polypropylen ytre nåler ble også vurdert, men krevde mindre diameter rustfritt stål indre nåler. 18 G (ytre diameter = 1,3 mm) og 20 G (ytre diameter = 1,0 mm) polypropylen nåler kreves henholdsvis 22 G og 25 G rustfritt stål indre nåler. Som forventet reduserte reduksjonen av den indre kanylediameteren den oppnåelige dosen. 22 G polypropylendosatorer i rustfritt stål/18 G, vist i figur 6B, viste en SD-1-dose på 82 ± 31 μg med én tamp, der hver påfølgende tampe økte dosen med ~41 μg. 25 G polypropylendosatorer i rustfritt stål/20 G, vist i figur 6C, viste en mindre SD-1-dose på 29 ± 17 μg, med ytterligere tamper som minimalt økte den avgitte dosen (~4 μg/tamp). Figur 6D viser en sammenligning av de fire dosatorsystemene som er evaluert her ved bruk av 4 tamper pulverformulering SD-1, og fremhever at dosatorsystemet kan tilpasses for å møte dyrets doseringsbehov og alder/størrelse.
Figur 1: Modifisert kanyleklargjøring. (A) Modifisert nål i rustfritt stål med plastluerlåsporsjon trimmet til 2-3 mm. (B-C) Innsetting av modifisert nål i rustfritt stål i polypropylennål. Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.
Figur 2: Skjematisk fremstilling av pulverbelastning og aktivering. (A-E) Skjematisk fremstilling av pulverlasting, dosatormontering og aktivering fra montert dosator. Luft presses gjennom den indre nålen i rustfritt stål, og pulveret slippes ut av dosatoren. Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.
Figur 3: Fjerning av pulverrester fra utsiden av den indre kanylen. (A) Modifisert kanyle i rustfritt stål med pulver som holdes på utsiden av kanylen etter tamping i pulverseng. (B) Modifisert kanyle i rustfritt stål med ren overflate etter forsiktig tørking med vindusvisker med lite lo. (C) Visualisering av innsiden av kanylen som inneholder pulver. Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.
Figur 4: Spray tørket pulver. Representative skanningselektronmikroskopibilder av spraytørket pulver fremstilt fra fire forskjellige APIer. Tørre pulver inkluderer (A) SD-1, (B) SD-2, (C) SD-3 og (D) SD-4. All avbildning ble utført ved en 10 000x forstørrelse, med skalastangen lik 5 μm. Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.
Figur 5: Kvantifisering av levert pulver. Masse pulver levert fra dosatorer (21 G innerkanyle i rustfritt stål og 16 G ytre kanyle av polypropylen) som funksjon av tamper i en pulverseng av fire spraytørkede pulver, inkludert (A) SD-1, (B) SD-2, (C) SD-3 og (D) SD-4 (n ≥ 3, gjennomsnitt ± standardavvik). Skråningen, som viser massen av pulver dispergert per lastetampe, og tilpasningsgodheten (R2) til en lineær kurve er inkludert. Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.
Figur 6: Kvantifisering av pulver levert med kanyler med mindre diameter. Masse SD-1 pulver levert fra dosatorer fremstilt ved bruk av nåler med mindre diameter, inkludert (A) 21 G innerkanyle i rustfritt stål med 20 G PTFE ytre nål, (B) 22 G innerkanyle i rustfritt stål med 18 G ytre kanyle av polypropylen og (C) 25 G innerkanyle i rustfritt stål med 20 G ytre kanyle av polypropylen (n ≥ 3, gjennomsnitt ± standardavvik). Skråningen, som viser massen av pulver dispergert per lastetampe, og tilpasningsgodheten (R2) til en lineær kurve er inkludert. Y-aksen skaleres slik at den passer til dataene i hver figur. En sammenligning av dose SD-1 levert fra alle dosatortyper etter 4 tamper i pulversengen er vist i (D). Forkortelser inkluderer: SS, rustfritt stål; PP, polypropylen; PTFE, polytetrafluoretylen. Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Siden mus er obligatoriske nesepustere, gjør levering via passiv inhalasjon for innledende proof-of-concept-studier effektivitet og doseestimering utfordrende da pulveret må passere nese og hals på en måte avhengig av partikkelegenskaper og pulverdispersjonseffektivitet 7,8,14. Bruken av dosatorene utviklet her omgår nese og hals, med dosatoren satt inn i den første bronkialbifurkasjonen9, og leverer full dose direkte til lungene til mus, noe som muliggjør mer presis dosekontroll for innledende studier. Disse dosatorene representerer en reproduserbar og tilpassbar tilførselsmetode for intratrakeal administrering til mus og in vitro-evaluering av pulverytelse.
Dosatorer som brukte 21 G rustfritt stål og 16 G polypropylen nåler var i stand til å laste og levere 200-1100 μg avhengig av formulering og antall tamper, som vanligvis er en passende dose for mus. Lasting utover 4 tamps var mulig for visse formuleringer, for eksempel SD-1 og SD-2, som beholdt pulverdispersjon opp til minst 5 tamper, men lasting utover 4 tamps ble utfordrende for formuleringer som SD-3 og SD-4. Hvis pulveret ble for pakket i den indre nålen etter ytterligere tamping, var en bolus på 0,15-0,6 ml luft utilstrekkelig til å løsne og spre pulveret. Mens et større volum på 1-2 ml kan være i stand til å spre disse lastede pulverene, kan disse volumene forårsake traumer for mus og bør unngås 8,15. I alle tilfeller bør tamping utføres forsiktig for å minimere denne effekten. Som et resultat begrenser denne effekten belastning over 600-1100 mg, avhengig av formuleringen. Selv om det er egnet for mus, bør en større doseringspumpe av reservoartypen brukes til dyr som trenger en større dose10. Dosatorer med mindre diameter (1,0-1,3 mm ytre diameter) ble også utviklet og evaluert med SD-1. Den største dosen for en dosator av redusert størrelse ble observert ved kombinasjon av en 21 G innerkanyle i rustfritt stål med en 20 G PTFE ytre nål. Farmakokinetiske studier på mus har tidligere blitt utført av Stewart et al. med dette doseringssystemet, og fremhever vellykket bruk9. Mindre dosatorer var også mulig ved bruk av polypropylen ytre nåler, men resulterte i lavere oppnåelige doser, noe som fremhever en begrensning i systemet. Dosen er sterkt påvirket av kanylediameter, og de høyere dosene som er rapportert for 21 G rustfritt stål/16 G polypropylendoseatorer, er kanskje ikke mulig å bruke på mus som er for små/unge.
Dosatorsystemene er bekreftet å fungere på tvers av de fire spraytørkede pulverene som er omtalt her. Imidlertid er alle partikkelsystemer i denne studien konstruerte partikler med lav tetthet som har jevn bulkdensitet. Effekt i andre partikkelsystemer hvor ensartethet i pulversengen ikke kan garanteres, er ennå ikke evaluert og kan ikke resultere i reproduserbar levering. Ytterligere evaluering vil være nødvendig i hvert enkelt tilfelle før bruk av dosatorsystemet.
Vi beskriver bruk av presisjonssnittsag for klargjøring av de indre dosatornålene, men en båndsliper kan brukes på plass. Hvis en båndsliper brukes, er det viktig å skyve en mindre nål eller ledning gjennom den indre nålen i rustfritt stål for å sikre at nålen er åpen og ikke ble okkludert i prosessen. Dette har ikke blitt lagt merke til som et problem ved bruk av presisjonssnittsagen.
Den lave kostnaden og enkle klargjøringen av dosatorene letter bruken som engangsleveringsutstyr til engangsbruk, der det ikke er nødvendig å laste inn enheten på nytt og rengjøre / sterilisere mellom bruk. Senger av det tørre pulveret kan forhåndsfylles og lagres basert på API- og formuleringsoppbevaringskravene, slik at brukeren bare må tampe nålen inn i pulveret før montering og aktivering. Fylling av pulversengrøret kan utføres i en laboratorieinnstilling der en balanse og hette er tilgjengelig, noe som krever minimalt utstyr som skal være til stede i dyreprosedyrelaboratoriet10. Dosatorene er designet for foreløpige, proof-of-concept-studier på mus og demonstrerer nøyaktig og reproduserbar lasting.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Forfatterne erklærer at de ikke har noen interessekonflikt.
Acknowledgments
Forfatterne ønsker å anerkjenne finansiering fra National Institutes of Health (R01AI155922). Mikroskopi ble utført ved Chapel Hill Analytical and Nanofabrication Laboratory (CHANL), medlem av North Carolina Research Triangle Nanotechnology Network, RTNN, som støttes av National Science Foundation, Grant ECCS-1542015, som en del av National Nanotechnology Coordinated Infrastructure, NNCI.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 0.6 mL microcentrifuge tubes | Fisher Scientific | 05-408-120 | |
| Analytical balance | Mettler Toledo | AR1140 | Any analytical balance with sufficient range can be used |
| Blunt stainless-steel needle, 1 inch, 21 G | McMaster-Carr | 75165A681 | |
| Blunt stainless-steel needle, 1 inch, 22 G | McMaster-Carr | 75165A683 | |
| Blunt stainless-steel needle, 1 inch, 25 G | McMaster-Carr | 75165A687 | |
| Disposable syringe with luer lock (1 mL) | Fisher Scientific | 14-823-30 | 3-mL syringes can also be used |
| Female BALB/c mice | Charles River, Wilmington, MA, USA | ||
| High-performance cascade impactor | Next Generation Impactor | Apparatus 5 | |
| Lab film (e.g., Parafilm) | Fisher Scientific | S37440 | |
| Low-lint wiper (e.g., Kimwipes) | Kimberly-Clark Professional | 34133 | |
| Low-resistance dry powder inhaler | RS01 mod 7 | ||
| Polypropylene needle, 1.5 inch, 16 G | McMaster-Carr | 6934A111 | |
| Polypropylene needle, 1.5 inch, 18 G | McMaster-Carr | 6934A53 | |
| Polypropylene needle, 1.5 inch, 20 G | McMaster-Carr | 6934A55 | |
| Precision sectioning saw | TedPella | 812-300 | Belt sander can be used as an alternative |
| PTFE needle, 2 inch, 20 G | McMaster-Carr | 75175A694 | |
| USP General Chapter <601> | http://www.uspbpep.com/usp31/v31261/usp31nf26s1_c601.asp |
References
- Wu, X., Li, X., Mansour, H. M. Surface analytical techniques in solid-state particle characterization for predicting performance in dry powder inhalers. KONA Powder and Particle Journal. 28, 3-18 (2010).
- Maloney, S. E., Mecham, J. B., Hickey, A. J. Performance testing for dry powder inhaler products: towards clinical relevance. KONA Powder and Particle Journal. 40, 172-185 (2023).
- Maloney, S. E., et al. Spray dried tigecycline dry powder aerosols for the treatment of nontuberculous mycobacterial pulmonary infections. Tuberculosis. 139, 102306 (2023).
- Kaur, J., et al. A hand-held apparatus for "nose-only" exposure of mice to inhalable microparticles as a dry powder inhalation targeting lung and airway macrophages. European Journal of Pharmaceutical Sciences. 34 (1), 56-65 (2008).
- Yi, J., et al. Whole-body nanoparticle aerosol inhalation exposures. Journal of Visualized Experiments. (75), e50263 (2013).
- Chung, Y. H., Han, J. H., Lee, Y. -H. A study on subchronic inhalation toxicology of 1-chloropropane. Toxicological Research. 31 (4), 393-402 (2015).
- Kuehl, P. J., et al. Regional particle size dependent deposition of inhaled aerosols in rats and mice. Inhalation Toxicology. 24 (1), 27-35 (2012).
- Manser, M., et al. Design considerations for intratracheal delivery devices to achieve proof-of-concept dry powder biopharmaceutical delivery in mice. Pharmaceutical Research. 40, 1165-1176 (2023).
- Stewart, I. E., et al. Development and characterization of a dry powder formulation for anti-tuberculosis drug spectinamide 1599. Pharmaceutical Research. 36 (9), 136 (2019).
- Durham, P. G., et al. Disposable dosators for pulmonary insufflation of therapeutic agents to small animals. Journal of Visualized Experiments. (121), e55356 (2017).
- Miwata, K., et al. Intratracheal administration of siRNA dry powder targeting vascular endothelial growth factor inhibits lung tumor growth in mice. Molecular Therapy: Nucleic Acids. 12, 698-706 (2018).
- Duret, C., et al. Pharmacokinetic evaulation in mice of amorphous itraconazole-based dry powder formulations for inhalation with high bioavailability and extended lung retention. European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics. 86 (1), 46-54 (2014).
- Maloney, S. E., et al. Preparation strategies of the anti-mycobacterial drug bedaquiline for intrapulmonary routes of administration. Pharmaceuticals. 16 (5), 729 (2023).
- Price, D. N., Kunda, N. K., Muttil, P. Challenges associated with the pulmonary delivery of therapeutic dry powders for preclinical testing. KONA Powder and Particle Journal. 36, 129-144 (2019).
- Qiu, Y., Liao, Q., Chow, M. Y. T., Lam, J. K. W. Intratracheal administration of dry powder formulation in mice. Journal of Visualized Experiments. (161), e61469 (2020).
- Fiegel, J., et al. Preparation and in vivo evaluation of a dry powder for inhalation of capreomycin. Pharmaceutical Research. 25 (4), 805-811 (2008).
