Summary
Denne protokol beskriver en simpel enhed, der efterligner Dings rullemetode, etablerer en rottemodel af skeletmuskelskade og bruger hæmatoxylin-eosinfarvning til at observere patologien for beskadiget væv og enzymbundet immunosorbentassay til at detektere ændringer i serumskademarkører.
Abstract
Dings rullemetode er en af de mest almindeligt anvendte manipulationer i traditionelle kinesiske massageklinikker (Tuina) og en af de mest indflydelsesrige nutidige Tuina-manipulationer i Kina. Den er baseret på den traditionelle rullemetode, der almindeligvis anvendes i Zen-genren med én finger og hedder Dings rullemetode. På grund af dets antiinflammatoriske og blodcirkulationsfremmende virkninger har Dings rullemetode sunde terapeutiske virkninger på myopati. På grund af det store kraftområde, der påføres menneskelig hud, er Dings rullemetode udfordrende at udføre på forsøgsdyr med små hudområder, såsom rotter og kaniner. Derudover adskiller styrken af Tuina påført menneskekroppen sig fra den, der anvendes på forsøgsdyr, så det kan ske, at styrken er for høj eller for lav til at opnå den terapeutiske virkning af Tuina under eksperimentet. Dette eksperiment sigter mod at skabe et simpelt massageapparat, der er egnet til rotter baseret på Dings rullende manipulationsparametre (styrke, frekvens, Tuina-varighed). Enheden kan standardisere manipulation i dyreforsøg og reducere variationen i Tuina-kraft, der påføres forskellige dyr på grund af subjektive faktorer. En rottemodel af notexin-induceret skeletmuskelskade blev etableret, og plasmaskademarkører kreatinkinase (CK) og fedtsyrebindende protein 3 (FABP3) blev brugt til at vurdere den terapeutiske virkning af Tuina på skeletmuskelskade. Resultaterne viste, at denne Tuina massager kunne reducere niveauerne af CK og FABP3 ekspression og bremse graden af skeletmuskelskade. Derfor bidrager Tuina-massageapparatet, der er beskrevet her, efterligner Dings rullemetode, til standardisering af Tuina-manipulation i eksperimentel forskning og er til stor hjælp for efterfølgende forskning i Tuinas molekylære mekanisme for myopati.
Introduction
Muskelskader er almindelige traumatiske skader i klinisk og dagligdag forårsaget af eksterne slag (kontusioner) eller kronisk overbelastning af muskelfibre (stammer) osv., Hvilket resulterer i muskeldysfunktion og smerte, der endda alvorligt påvirker patientens livskvalitet1. At starte genoptræning så tidligt som muligt efter en akut belastningsskade er nøglen til at reducere tiden til at vende tilbage til sport2 og reducere smerter 3,4. I moderne vestlig medicin følger klinisk førstehjælp til muskelskader principperne om hvile, is, kompression og højde (RICE) for at stoppe skadelig blødning i muskelvævet5 og ikke-steroide antiinflammatoriske lægemidler til at lindre smerter6. Opdagelsen af nye terapier som exosomer7 og vævsteknik8 blev potentielle behandlingsstrategier for skeletmuskelsygdomme, der kompenserede for tidligere farmakologiske behandlingers mangler. Det kan imidlertid også øge behandlingsomkostningerne for patienterne og sætte dem under et enormt økonomisk pres9. Derfor anbefales alternative og komplementære terapier til behandling af muskuloskeletale problemer10. Tuina er meget udbredt klinisk i Kina som en traditionel medicinsk metode og er populær blandt patienter for sin effektivitet og færre bivirkninger. Tuina terapi for muskuloskeletale lidelser kan lindre smerter og forbedre funktionen11,12,13. Mr. Ding Jifeng, en berømt Shanghai Tuina-udøver, grundlagde Dings rullemetode14. Det er en unik rulle- og knuseteknik med et stort kraftområde, ensartet og blid kraft og intens penetration.
Forskellige dyremodeller er baseret på forskellige ætiologier. De har fordele og ulemper, og udvælgelsen af korrekte og passende dyremodeller er af stor betydning for grundlæggende eksperimenter, hvilket hjælper med at forstå de cellulære og molekylære signalveje til regenerering og reparation efter skeletmuskelskade for at udvikle nye terapier til behandling af skeletmuskelsygdomme. Kemisk inducerede modeller af muskelskade anvendes i vid udstrækning, med injektioner af skeletmuskulatur, der forårsager myofibernekrose og producerer regenererede områder, der effektivt kan regenerere inden for 2 uger15. Både notexin og bupivacain kan forårsage muskelskader. Imidlertid kan notexin forårsage mere alvorlig myotoksisk skade på skeletmuskulatur end bupivacain, og naturlig funktionel genopretning er relativt langsommere16. Lægemiddel intramuskulær sprøjtestøbning tager ikke kun mindre tid, men har også kontrollerede virkninger og omfang af skeletmuskelskader. Denne kvantificerbare kontrol gør vellykket støbning mindre vanskelig15,17.
Inflammatorisk respons er et essentielt biologisk respons, der er blevet grundigt undersøgt i forbindelse med myopati18,19. I de tidlige stadier af skeletmuskelskade forstyrrer myofibernekrose lokal muskelhomeostase, og mange inflammatoriske celler infiltrerer skadestedet og udskiller mange proinflammatoriske cytokiner19. Kreatinkinase (CK) er en traditionel serumbiomarkør til vurdering af skeletmuskelskade. Det mangler imidlertid vævsspecificitet20 og følsomhed21, hvilket begrænser dets evne til at vurdere omfanget af lægemiddelinduceret muskelskade og indirekte rapportere omfanget af muskelgendannelse efter skade. Nye biomarkører, herunder fedtsyrebindende protein 3 (FABP3), har for nylig vist relativt høj vævsspecificitet og følsomhed i gnavermodeller af skeletmuskelskade. FABP3 er en familie af bindende proteiner, der primært udtrykkes i hjerte- og skeletmuskelceller og impliceres i fedtsyremetabolisme, transport og signalering22. Derfor valgte vi en kombination af to biomarkører, CK og FABP3, for at vurdere omfanget af notexin-induceret skeletmuskelskade og genopretning efter behandling.
Hos gnavere er musklerne overfladiske, og hudområdet er lille, hvilket også bestemmer, at de forskellige parametre for massage hos gnavere ikke vil være de samme som hos mennesker, såsom i dyreterapi, bør massageterapeuten behandle dem med mindre kraft ved hjælp af Dings rullemetode og må ikke være befordrende for driften af denne teknik på grund af den lille størrelse af det skadede område, hvilket i sidste ende kan føre til en reduktion i effektiviteten af massage. Derfor brugte eksperimentet den rullende massager fremstillet internt, som er i overensstemmelse med egenskaberne ved Dings rullemetode, til at gribe ind og evaluere den terapeutiske virkning af den notexin-inducerede skeletmuskelskademodel hos rotter, hvilket hjælper med at standardisere parametrene for Tuina i eksperimentelle dyreforsøg for dybt at undersøge Tuinas molekylære virkningsmekanisme, en traditionel kinesisk medicin behandlingsmetode, på muskuloskeletale sygdomme.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Procedurer, der involverer dyr, er blevet godkendt af Institutional Care and Use Committee ved Hunan University of Chinese Medicine.
1. Montering af rullemassageapparatet
- Vælg et massageapparat, der består af en gummirulle, gaffelholder, fjeder, grænseplade, justeringsskinne, skrue og akrylhåndtag (figur 1). Sørg for, at gummirullen måler 3 cm lang og 1,6 cm i diameter, fjederen måler 3 cm lang og 0,9 cm i diameter, grænsepladen er 3 cm lang og 2 cm bred, og håndtaget måler 12 cm lang og 0,9 cm i diameter.
- Kraftkontrol: Ifølge litteraturresultaterne23 viste Dings rullemetode nedadgående tryk sig at være ca. 10% af kropsvægten, så det tryk, der påføres under udformningen af fremadgående rulning, er ca. 10% af rottens kropsvægt (0,2-0,3 N). Massageapparatets maksimale tryk på vejeregulatoren testes til ca. 0,3 N ved at justere grænsepladens vinkel. Dette trykkrav opfylder rottens behov.
- Sørg for, at minimumstrykket er ca. 0,08 N, når du ruller tilbage (figur 2). Sørg for, at trykket er nøjagtigt i overensstemmelse med kravet i Dings rullemetode om, at forholdet mellem fremad- og bagudkræfter er 3: 1.
- Før behandling skal du bede operatøren om at arbejde med metronomsoftwaren for at styre rullefrekvensen til 140 ruller / min og øve dette mere end 3x i foreksperimentet for at sikre, at operationen er standardiseret.
2. Etablering af en rottemodel af skeletmuskelskade
- Opdel tilfældigt 24 hanrotter, Sprague-Dawley rotter (vejer 200-250 g) i tre grupper på otte rotter hver, herunder kontrol (C), notexin (NTX) og notexin med Tuina (NTX + Tuina), og foder på en standard kost. Hold på en 12 timers lys / 12 timers mørk cyklus, hus ved 20-25 ° C og 50% -70% fugtighed.
- Bedøv med 1% pentobarbitalnatrium (40 mg / kg) ved intraperitoneal injektion og fjern derefter hår fra højre underekstremitet med hårfjerningscreme. Når du har fjernet pelsen, skal du tørre den resterende creme med saltvand. Bekræft tilstrækkelig anæstesi ved tå-pinch respons. Påfør oftalmisk salve for at fugte øjnene, mens dyret er under anæstesi. Giv termisk støtte under hele proceduren.
- Alternativ huddesinfektion til højre underekstremitet med iodophor desinfektionsopløsning og 75% alkohol før injektion. Berør en vatpind gennemblødt i iodophor desinfektionsopløsning til midten af huden i underekstremiteten og påfør i en cirkulær bevægelse udad. Gentag med en ethanol-gennemblødt vatpind.
- Der opstilles modeller for skeletmuskulatur i overensstemmelse med referencemetode24. Injicer notexin i kun et ben (for at forhindre dobbelt notexin injektion). Træk 200 μL notexinopløsning (10 μg / ml notexinopløsning fremstillet ved tilsætning af 100 μg notexin til 10 ml normalt saltvand i et 15 ml centrifugerør) i en 1 ml sprøjte med en 30G nål og injicer notexinopløsningen intramuskulært i gastrocnemius muskel for at producere muskelskade.
- Injicer notexin langsomt og vent i 3 sekunder, før du trækker nålen ud (skal injiceres helt).
BEMÆRK: Notexin er et giftigt kemikalie, der kræver øjeblikkelig skylning med rigeligt vand ved kontakt med et åbent sår og hurtig lægehjælp, hvis det er nødvendigt. - Injicer rotterne i kontrolgruppen med 200 μL saltopløsning. Flyt bedøvede rotter til tomme bur med rent strøelse. Sørg for at fjerne polstringen omkring rotternes næse og mund for at holde deres vejrtrækning klar. Visuelt observere vævsfarve og respirationsfrekvens i slutningen af injektionen, indtil rotterne genvinder tilstrækkelig bevidsthed.
- Sæt rotterne tilbage i hjemmeburet og opdræt dem typisk i 24 timer.
3. Tuina terapi
- Placer en SD-rotte i en udsat position med hovedet dækket af en sort klud på forsøgsplatformen desinficeret med 75% alkohol for at udsætte gastrocnemius-musklen. Dæk ikke for tæt.
- Brug af Tuina-massageapparatet til NTX+Tuina-gruppen: Hold massageapparatet, og placer rullen på rottens gastrocnemiusmuskel, og rul fremad, indtil fjederen kommer i kontakt med grænsepladen. Træk derefter kraften tilbage og vend tilbage til sin oprindelige position, hvorved frem- og tilbagegående bevægelse (figur 3).
- Rul massageapparatet med en hastighed på 140 ruller pr. minut, og udfør hver operation i 3 minutter. Udfør massagerne en gang om morgenen og en gang om eftermiddagen i 3 på hinanden følgende dage.
- Returner rotter til hjemmeburet efter hver behandling og hurtigt i 8 timer efter den sidste behandling.
4. Indsamling af blod og væv fra rotter efter forsøget
- I henhold til kravene fra den relevante etiske komité for dyreforsøg bedøves rotter ved intraperitoneal injektion af 1% pentobarbitalnatrium (40 mg / kg, intraperitoneal injektion). Bekræft tilstrækkelig anæstesi ved tå-pinch respons. Aflive rotter ved abdominal aorta blodudgydelse efter blodindsamling.
- Alternativ huddesinfektion med iodophor desinfektionsopløsning og 75% alkohol før injektion. Rør en vatpind gennemblødt i povidon-jod til midten af mavehuden og påfør i en cirkulær bevægelse udad. Gentag med en ethanol-gennemblødt vatpind. Gentag desinfektion 3x.
- Bed assistenten om at bruge to hæmostater til at løfte huden midt i maven. Som operatør skal du bruge en skalpel til at skære gennem mavehuden og musklerne fra raphe til pubic symphysis.
- Efter åbning af bukhulen adskilles tarmen med sterile bomuldskugler for at udsætte abdominal aorta i den bageste abdominalvæg.
- Find abdominal aorta, tag 5 ml rotteblod i blodopsamlingsrør, og få plasmaet i 1,5 mikrorør ved centrifugering ved 3000 x g i 10 minutter efter stående blod i 1 time. Opbevares ved -80 °C.
- Skær huden op med kirurgisk saks langs den nedre abdominalåbning mod det laterale aspekt af højre underekstremitet, udsæt musklerne i underekstremiteterne, og efter omhyggeligt at have adskilt fascia med tang, skal du skære skalpellen for at fjerne den intakte gastrocnemiusmuskel.
- Vask gastrocnemius muskel i sterilt saltvand for at fjerne klæbende hår og blod.
- Placer den fjernede gastrocnemius muskel i et 15 ml centrifugerør indeholdende 4% paraformaldehyd.
5. Påvisning af plasma-CK- og FABP 3-niveauer ved ELISA
- Beregn og bestem antallet af færdigpakkede plader, der kræves til et eksperiment. Fjern de nødvendige plader, læg dem i rammen med 96 brønde, læg de resterende mikroplader tilbage i aluminiumsfolieposen til forsegling, og opbevar dem ved 4 °C.
- Kits og prøver afbalanceres ved stuetemperatur (25-28 °C) i 120 min, fuldt ud i ligevægt til stuetemperatur.
BEMÆRK: Ligevægt mellem sættet og prøven er kritisk og skal ekvilibreres i tilstrækkelig tid. - Angiv standard-, prøve- og tomme felter. Der tilsættes 50 μL CK- eller FABP3-standard i forskellige koncentrationer (100, 50, 25, 12,5, 6,25, 0 ng/ml) til standardhullerne. Gentag hver standard en gang og besætter i alt 12 brønde.
- Prøvehullerne fyldes med 40 μL prøvefortyndingsmiddel (0,8 g NaCl, 0,02 g KH2PO 4, 0,29 gNa2HPO412H2O, 0,02 g KCl, 0,01 gNaN3i 100 ml dobbeltdestilleret vand, pH7,4) efterfulgt af 10 μL af den prøve, der skal testes. Gentag hver prøve en gang og besætter i alt 48 brønde.
- Bortset fra de tomme huller, der er placeret to brønde bag den sidste prøvebrønd, tilsættes 100 μL HRP-mærket anti-humant CK- eller FABP3-antistof (enzymmærket antistof) til hver standard og prøvebrønd.
- Brøndene forsegles med tætningsfilm og inkuberes i et 37 °C vandbad eller termostat i 60 min.
- Kassér væsken, dup den tør på absorberende papir, fyld hver brønd med vaskevæske, lad den stå i 20 sekunder, ryst vaskevæsken af, dup den tør på blottingpapir, og gentag vask af pladen 5x (eller brug en pladevasker).
- Der tilsættes 50 μL kromogenopløsning A (20 mg tetramethylbenzidin 10 ml ethanol i 100 ml dobbeltdestilleret vand) og 50 μL kromogenopløsning B (0,1 M/L citronsyre, 0,2 M/L natriumdihydrogenphosphatbuffer, pH 5,0-5,4) til hvert hul. Opbevares væk fra lys i 15 minutter ved 37 °C.
- For standardbrønde, prøvebrønde og blindhuller tilsættes 50 μL termineringsopløsning til hvert hul, og den optiske densitetsværdi af hvert hul måles ved 450 nm inden for 15 min.
6. Histologisk analyse af notexin-induceret gastrocnemius muskelskade hos rotter
- Der fremstilles 5 μm tykke paraffinsektioner farvet med hæmatoxylin og eosin til let mikroskopisk undersøgelse som beskrevet i25.
7. Billedbehandling og dataanalyse
- Læs og analyser de billeder, der er taget af billedbehandlingssystemet, med analysesoftware. Flyt det markerede billedfelt til midten af skærmbilledet med musen, klik på 40x, og klik derefter på Tag snapshot.
- OD-værdierne fra ELISA'en registreres i et regneark, og rotteniveauerne CK- og FABP3-niveauerne beregnes i prøverne ved hjælp af standardkurven.
- Brug statistisk analysesoftware til de statistiske analyser. Ekspressér målinger som gennemsnit ± standardafvigelse (
), og analyser sammenligningerne mellem grupper ved envejs ANOVA, med LSD-testen, når variansen var ensartet, og Tamhane T2-metoden, når variansen ikke var ensartet. Forskellen blev betragtet som statistisk signifikant ved en p-værdi mindre end 0,05.
), og analyser sammenligningerne mellem grupper ved envejs ANOVA, med LSD-testen, når variansen var ensartet, og Tamhane T2-metoden, når variansen ikke var ensartet. Forskellen blev betragtet som statistisk signifikant ved en p-værdi mindre end 0,05.Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
For at observere de morfologiske egenskaber af rotteskeletmuskulatur efter skade blev gastrocnemius-musklen farvet med hæmatoxylin og eosin, og de farvede billeder blev læst med en analysesoftware som beskrevet i protokollen for 8 rotter pr. Gruppe. Hos rotter med gastrocnemius muskelskade induceret af notexin (NTX-gruppe) blev mange muskelceller bristet, atrofisk, nekrotisk og uregelmæssigt arrangeret. Der var også en høj infiltration af neutrofiler og lymfocytter omkring det berørte område (figur 4B). Efter Tuina-behandling med den rullende massager blev muskelcellernes patologiske tilstand i NTX + Tuina-gruppen imidlertid forbedret med færre bristede, atrofiske og nekrotiske celler og kun et lille antal inflammatoriske celler, der infiltrerede sammenlignet med NTX-gruppen (figur 4C). I kontrolgruppen var muskelcellerne hos rotter jævnt store, tæt arrangeret og uden inflammatorisk celleinfiltration (figur 4A).
For yderligere at bekræfte den terapeutiske virkning af Tuina på gastrocnemius-skade hos rotter ved hjælp af Dings rullende massageapparat brugte vi ELISA til at detektere niveauerne af skeletmuskelskademarkører CK og FABP3 for 8 rotter pr. Gruppe. Sammenlignet med kontrolgruppen blev CK- og FABP3-niveauerne signifikant øget i NTX-gruppen, og både CK- og FABP3-niveauerne blev markant reduceret i NTX+Tuina-gruppen sammenlignet med NTX-gruppen (figur 5). Disse resultater tyder på, at injektion af notexin forårsagede alvorlig skade på gastrocnemius muskel hos rotter, mens Tuina kan reducere denne skade.
Figur 1: Rullende massager fysisk kort. Det består hovedsageligt af en gummirulle, gaffelholder, fjeder, grænseplade, justeringsskinne, skrue og akrylhåndtag. Vægtstang = 1 cm. Klik her for at se en større version af denne figur.
Figur 2: Måling af rullende massageapparatkraft. Det maksimale tryk for fremadgående rulning er 0,3 N, og minimumstrykket er ca. 0,08 N, når det rulles tilbage. Klik her for at se en større version af denne figur.
Figur 3: Tuina-terapi ved hjælp af rullende massager. Placer rullen på rottens gastrocnemius muskel og rul fremad, indtil fjederen kommer i kontakt med grænsepladen, træk derefter kraften tilbage og vend tilbage til sin oprindelige position og derved frem- og tilbagegående bevægelsen. Klik her for at se en større version af denne figur.
Figur 4: Repræsentative billeder af HE-farvet tværsnit af rotte gastrocnemius muskel. (A) Gastrocnemiusmusklen hos kontrolrotterne (C) blev ikke skadet signifikant efter injektion med saltvand. (B) Notexininjektion i gastrocnemius muskel hos rotter i notexin (NTX) gruppen forårsagede alvorlig muskelskade, hvilket resulterede i myocytatrofi, nekrose og varierende størrelser ledsaget af en massiv infiltration af neutrofiler og lymfocytter. (C) Gastrocnemius muskelskade blev svækket i notexin og Tuina (NTX+Tuina) gruppen af rotter, og antallet af atrofiske og nekrotiske myocytter, neutrofiler og lymfocytter blev reduceret. Skalabjælke = 100 μm. Klik her for at se en større version af denne figur.
Figur 5: CK- og FABP3-udtryk. Plasma blev høstet efter færdiggørelsen af Tuina, og koncentrationerne af CK og FABP3 i plasma fra rotter i kontrol (C), notexin (NTX) og notexin og Tuina (NTX+Tuina) blev påvist af ELISA. *P < 0,05, **P < 0,01 ved hjælp af envejs ANOVA med post-hoc LSD-test. Værdier er middelværdi ± SEM, n = 8 i alle grupper. Klik her for at se en større version af denne figur.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Her beskrev vi en protokol for Tuina-behandling af skeletmuskelskade hos rotter og analyserede derefter graden af skeletmuskelskade efter behandling for at verificere metodens effektivitet. Især kan rotteskeletmuskelskademodeller, herunder men ikke begrænset til lægemiddelinduktion (notexin, bupivacain)16, stump kontusion 26, knus 27 og iskæmi-reperfusion28, interveneres med Tuina. Gennem HE-farvning for at observere de histopatologiske ændringer og ELISA-detektion for at bestemme markørerne for skeletmuskelskader, vises det intuitivt, at notexin forårsager alvorlig skade på gastrocnemius-musklen hos rotter, mens massageapparatet, der simulerer Dings rullemetode, kan reducere muskelskaden. Disse giver overbevisende beviser for effektiviteten af Tuina til behandling af skeletmuskelskader.
Der er flere nødvendige procedurer, der bør overvejes, når du udfører Tuina på rotter, der efterligner Dings rullemetode. Før behandlingen skal Tuina-operatøren på forhånd trænes i at bruge rullemassageren mindst 3x, justere badens vinkel ved hjælp af tryksensoren for korrekt kraftkontrol og styre frekvensen af Tuina ved 140 ruller / min. I mellemtiden skal du holde rotterne stille ved at dække deres hoveder med en sort bandana uden at være unødigt stramme for at sikre, at de kan trække vejret frit. Hvis rotten pludselig kæmper for at være aktiv i Tuina-processen, skal du vente, indtil den er stille, før du fortsætter Tuina.
Begrænsningen ved dette eksperiment er, at dette massageapparat er velegnet til rotter snarere end mindre dyr, såsom mus. For andre dyr end rotter kan nogle instrumentkonfigurationer ændres. Såsom rullernes størrelse, bafflens vinkel, fjederens styrke og naturligvis skal tryksensoren bruges til at teste rullekraften. Vi har kun lavet en Tuina massager, der simulerer Dings rullemetode her. Som en ikke-farmakologisk behandling af traditionel kinesisk medicin er der imidlertid forskellige Tuina-manipulationer, såsom at skubbe, fugte, trykke og ælte. Alle disse manipulationer kan foretages i henhold til driftsparametrene for relevante berømte Tuina-mestre for at producere et instrument, der er mere egnet til dyreforskning, standardisere den eksperimentelle operation og gøre det muligt for de eksperimentelle resultater at være mere præcise og troværdige.
Afslutningsvis giver vi en detaljeret beskrivelse af fremstillingsmetoden for rullemassageapparatet, der effektivt simulerer Dings rullemetode under dyreforsøg. Massageapparatet har betydelig terapeutisk effekt på skeletmuskelskade hos rotter og lægger grundlaget for yderligere forskning i standardisering af Tuina.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Forfatterne har intet at afsløre.
Acknowledgments
Denne forskning blev støttet af bevillinger fra National Natural Science Foundation of China (bevilling nr. 82174521), Innovation Project for Graduate Students of Hunan University of Chinese Medicine (2022CX109)
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 1 mL syringe | JIANGXI FENGLIN | 20220521 | |
| 1.5 microtubes | Servicebio | EP-150X-J | |
| 15 mL centrifuge tube | Servicebio | EP-1501-J | |
| 30G needle | CONPUVON | 220318 | |
| 5 mL blood collection tube | Servicebio | QX0023 | |
| Acrylic handle | Guangdong Guangxingwang Plastic Materials Co., Ltd | 65643645 | |
| Adjustment splint | CREROMEM | 20220729 | |
| Cotton Swab | INOHV | 22080215 | |
| Enzyme-labeled Instrument | Rayto | RT-6100 | |
| Ethanol | INOHV | 211106 | |
| Fork holder | Yongkang Kangzhe Health Technology Co., Ltd | JL001 | |
| Hair removal cream | Veet, France | LOTC190922002 | |
| Hematoxylin dyeing solution set | Wuhan Google Biotech | G1005 | |
| Imaging system | Nikon, Japan | Nikon DS-U3 | |
| IODOPHOR disfecting solution | Hale&Hearty | 20221205 | |
| Light microscope | Nikon, Japan | Nikon Eclipse E100 | |
| Limit baffle | CREROMEM | 20220724 | |
| Notexin | Latoxan S.A.S. | L8104-100UG | |
| Pentobarbital sodium | Merck KGaA | P3761 | |
| Rat creatine kinase (CK) ELISA kit | LunChangShuoBiotech | YD-35237 | |
| Rat fatty acid-binding protein 3 (FABP3) ELISA kit | LunChangShuoBiotech | YD-35730 | |
| Rubber roller | Hebei Mgkui Chemical Technology Co.,Ltd | 202207 | |
| Screw | Weiyan Hardware | B05Z122 | |
| Sprague Dawley rats | Hunan Slake Kingda Laboratory Animal Co. | SYXK2019-0009 | |
| Spring | Bingzhang Hardware | TH001 | |
| Surgical blade | Covetrus | #23 | |
| Weigh controller | Iyoys | HY-XSQ |
References
- Lempainen, L., et al. Management of anterior thigh injuries in soccer players: practical guide. BMC Sports Science, Medicine and Rehabilitation. 14 (1), 41 (2022).
- Bayer, M. L., Mackey, A., Magnusson, S. P., Krogsgaard, M. R., Kjær, M. Treatment of acute muscle injuries (in Danish). Ugeskrift for Laeger. 181 (8), V11180753 (2019).
- Serner, A., et al. Progression of Strength, Flexibility, and Palpation Pain During Rehabilitation of Athletes with Acute Adductor Injuries: A Prospective Cohort Study. The Journal of Orthopaedic and Sports Physical Therapy. 51 (3), 126-134 (2021).
- Gozubuyuk, O. B., Koksal, C., Tasdemir, E. N. Rehabilitation of a patient with bilateral rectus abdominis full thickness tear sustained in recreational strength training: a case report. Physiotherapy Theory and Practice. 38 (13), 3216-3225 (2022).
- Hotfiel, T., et al. Current Conservative Treatment and Management Strategies of Skeletal Muscle Injuries. Zeitschrift für Orthopädie und Unfallchirurgie. 154 (3), 245-253 (2016).
- de Sire, A., et al. Pharmacological Treatment for Acute Traumatic Musculoskeletal Pain in Athletes. Medicina. 57 (11), 1208 (2021).
- Connor, D. E., et al. Therapeutic potential of exosomes in rotator cuff tendon healing. Journal of Bone and Mineral Metabolism. 37 (5), 759-767 (2019).
- Martins, A. L. L., Giorno, L. P., Santos, A. R. Jr Tissue Engineering Applied to Skeletal Muscle: Strategies and Perspectives. Bioengineering. 9 (12), 744 (2022).
- Horgan, D., et al. Clouds across the new dawn for clinical, diagnostic and biological data: accelerating the development, delivery and uptake of personalized medicine. Diagnosis. , (2023).
- Urits, I., et al. A Comprehensive Review of Alternative Therapies for the Management of Chronic Pain Patients: Acupuncture, Tai Chi, Osteopathic Manipulative Medicine, and Chiropractic Care. Advances in Therapy. 38 (1), 76-89 (2021).
- Lee, N. W., et al. Chuna (or Tuina) Manual Therapy for Musculoskeletal Disorders: A Systematic Review and Meta-Analysis of Randomized Controlled Trials. Evidence-based Complementary and Alternative Medicine: eCAM. 2017, 8218139 (2017).
- Xie, J., Deng, D. X., Chen, Y., Peng, L. Progress in the intervention of massage techniques on skeletal muscle injury. Hunan Journal of Traditional Chinese Medicine. 34 (04), 199-201 (2018).
- Yuan, Y., Zhang, H., Zhang, G. H., Xue, X. N. Research progress on microstructure changes and rehabilitation treatment of exercise-induced skeletal muscle injury. Massage and Rehabilitation Medicine. 14 (6), 29-33 (2023).
- Zhao, Y. The Establishment of Famous Tuina Master Ding Jifeng and Wei Fa - Commemorating the 100th Anniversary of Mr. Ding Jifeng's Birthday. Traditional Chinese Medicine Culture. 9 (6), 18-21 (2014).
- Hardy, D., et al. Comparative Study of Injury Models for Studying Muscle Regeneration in Mice. PloS one. 11 (1), e0147198 (2016).
- Plant, D. R., Colarossi, F. E., Lynch, G. S. Notexin causes greater myotoxic damage and slower functional repair in mouse skeletal muscles than bupivacaine. Muscle & Nerve. 34 (5), 577-585 (2006).
- Tierney, M. T., Sacco, A. Inducing and Evaluating Skeletal Muscle Injury by Notexin and Barium Chloride. Methods in Molecular Biology. 1460, 53-60 (2016).
- Torres-Ruiz, J., Alcalá-Carmona, B., Alejandre-Aguilar, R., Gómez-Martín, D. Inflammatory myopathies and beyond: The dual role of neutrophils in muscle damage and regeneration. Frontiers in Immunology. 14, 1113214 (2023).
- Tu, H., Li, Y. L. Inflammation balance in skeletal muscle damage and repair. Frontiers in Immunology. 14, 1133355 (2023).
- Castro, C., Gourley, M. Diagnosis and treatment of inflammatory myopathy: issues and management. Therapeutic Advances in Musculoskeletal Disease. 4 (2), 111-120 (2012).
- Dabby, R., et al. Asymptomatic or minimally symptomatic hyperCKemia: histopathologic correlates. The Israel Medical Association Journal: IMAJ. 8 (2), 110-113 (2006).
- Khodabukus, A., et al. Tissue-Engineered Human Myobundle System as a Platform for Evaluation of Skeletal Muscle Injury Biomarkers. Toxicological Sciences. 176 (1), 124-136 (2020).
- Zhou, X. W., Jin, W. D., Zhu, L., Liu, X. H., Zhou, B. H. Experimental observation on the influence of different frequency, intensity and action time of Ding rolling manipulation on hemodynamics. Shanghai Journal of Traditional Chinese Medicine. (06), 42-44 (1998).
- Pablos, A., et al. Protective Effects of Foam Rolling against Inflammation and Notexin Induced Muscle Damage in Rats. International Journal of Medical Sciences. 17 (1), 71-81 (2017).
- Wisner, L., Larsen, B., Maguire, A. Enhancing Tumor Content through Tumor Macrodissection. Journal of Visualized Experiments: JoVE. (180), e62961 (2022).
- Deng, P., et al. Contusion concomitant with ischemia injury aggravates skeletal muscle necrosis and hinders muscle functional recovery. Experimental Biology and Medicine. 247 (17), 1577-1590 (2022).
- Dobek, G. L., Fulkerson, N. D., Nicholas, J., Schneider, B. S. Mouse model of muscle crush injury of the legs. Comparative Medicine. 63 (3), 227-232 (2013).
- Armstrong, D. M., et al. Sildenafil citrate protects skeletal muscle of ischemia-reperfusion injury: immunohistochemical study in rat model. Acta Cirúrgica Brasileira. 28 (4), 282-287 (2013).
