Summary
Detta protokoll beskriver en enkel anordning som efterliknar Dings rollmetod, etablerar en råttmodell av skelettmuskelskada och använder hematoxylin-eosinfärgning för att observera patologin hos skadad vävnad och enzymkopplad immunadsorberande analys för att upptäcka förändringar i serumskademarkörer.
Abstract
Dings rollmetod är en av de mest använda manipulationerna i traditionella kinesiska massagekliniker (Tuina) och en av de mest inflytelserika samtida Tuina-manipulationerna i Kina. Den är baserad på den traditionella rullningsmetoden som vanligtvis används i zen-genren med ett finger och kallas Dings rullningsmetod. På grund av dess antiinflammatoriska och blodcirkulationsfrämjande effekter har Dings rullningsmetod goda terapeutiska effekter på myopati. På grund av det stora kraftområdet som appliceras på mänsklig hud är Dings rullningsmetod utmanande att utföra på försöksdjur med små hudområden, såsom råttor och kaniner. Dessutom skiljer sig styrkan hos Tuina applicerad på människokroppen från den som appliceras på försöksdjur, så det kan hända att styrkan är för hög eller för låg för att uppnå den terapeutiska effekten av Tuina under experimentet. Detta experiment syftar till att skapa en enkel massageapparat som är lämplig för råttor baserat på Dings rullande manipulationsparametrar (styrka, frekvens, Tuina-varaktighet). Enheten kan standardisera manipulation i djurförsök och minska variationen i Tuina-kraften som appliceras på olika djur på grund av subjektiva faktorer. En råttmodell av notexin-inducerad skelettmuskelskada etablerades, och plasmaskademarkörerna kreatinkinas (CK) och fettsyrabindande protein 3 (FABP3) användes för att bedöma den terapeutiska effekten av Tuina på skelettmuskelskada. Resultaten visade att denna Tuina-massageapparat kunde minska nivåerna av CK- och FABP3-uttryck och bromsa graden av skelettmuskelskada. Därför bidrar Tuina-massageapparaten som beskrivs här, som efterliknar Dings rullningsmetod, till att standardisera Tuina-manipulation i experimentell forskning och är till stor hjälp för efterföljande forskning om Tuinas molekylära mekanism för myopati.
Introduction
Muskelskador är vanliga traumatiska skador i det kliniska och dagliga livet, orsakade av yttre slag (kontusioner) eller kronisk överbelastning av muskelfibrer (stammar) etc., vilket resulterar i muskeldysfunktion och smärta, som till och med allvarligt påverkar patientens livskvalitet1. Att påbörja rehabilitering så tidigt som möjligt efter en akut belastningsskada är nyckeln till att minska tiden för återgång till idrott2 och för att minska smärta 3,4. I modern västerländsk medicin följer klinisk första hjälpen för muskelskador principerna vila, is, kompression och höjning (RICE) för att stoppa skadlig blödning i muskelvävnaden5 och icke-steroida antiinflammatoriska läkemedel för att lindra smärta6. Upptäckten av nya terapier som exosomer7 och vävnadsteknik8 blev potentiella behandlingsstrategier för skelettmuskelsjukdomar, vilket kompenserade för tidigare farmakologiska behandlingars brister. Men det kan också öka behandlingskostnaderna för patienterna, vilket sätter dem under enorm ekonomisk press9. Därför rekommenderas alternativa och kompletterande terapier för behandling av muskuloskeletala problem10. Tuina används i stor utsträckning kliniskt i Kina som en traditionell medicinsk metod och är populär bland patienter för sin effektivitet och färre biverkningar. Tuina-terapi för muskuloskeletala sjukdomar kan lindra smärta och förbättra funktionen11,12,13. Ding Jifeng, en berömd Tuina-utövare från Shanghai, grundade Dings kastmetod14. Det är en unik rullnings- och krossteknik med ett stort kraftområde, enhetlig och skonsam kraft och intensiv penetration.
Olika djurmodeller är baserade på olika etiologier. De har för- och nackdelar, och valet av korrekta och lämpliga djurmodeller är av stor betydelse för grundläggande experiment, som hjälper till att förstå de cellulära och molekylära signalvägarna för regenerering och reparation efter skelettmuskelskada för att utveckla nya terapier för behandling av skelettmuskelsjukdomar. Kemiskt inducerade modeller av muskelskada används i stor utsträckning, med injektioner av skelettmuskulatur som orsakar myofibernekros och producerar regenererade områden som effektivt kan regenerera inom 2 veckor15. Både notexin och bupivakain kan orsaka muskelskador. Notexin kan dock orsaka allvarligare myotoxiska skador på skelettmuskulaturen än bupivakain, och den naturliga funktionella återhämtningen är relativt långsammare16. Läkemedel intramuskulär formsprutning tar inte bara mindre tid utan har också kontrollerade effekter och omfattning av skelettmuskelskada. Denna kvantifierbara kontroll gör det mindre svårt att lyckas med gjutningen15,17.
Inflammatorisk respons är en essentiell biologisk respons som har studerats utförligt i samband med myopati18,19. I de tidiga stadierna av skelettmuskelskada stör myofibernekros lokal muskelhomeostas, och många inflammatoriska celler infiltrerar skadestället och utsöndrar många proinflammatoriska cytokiner19. Kreatinkinas (CK) är en traditionell serumbiomarkör för bedömning av skelettmuskelskada. Den saknar dock vävnadsspecificitet20 och sensitivitet21, vilket begränsar dess förmåga att bedöma omfattningen av läkemedelsinducerad muskelskada och indirekt rapportera omfattningen av muskelåterhämtning efter skada. Nya biomarkörer, inklusive fettsyrabindande protein 3 (FABP3), har nyligen visat relativt hög vävnadsspecificitet och känslighet i gnagarmodeller av skelettmuskelskada. FABP3 är en familj av bindande proteiner som främst uttrycks i hjärt- och skelettmuskelceller och är inblandade i fettsyrametabolism, transport och signalering22. Därför valde vi en kombination av två biomarkörer, CK och FABP3, för att bedöma omfattningen av notexin-inducerad skelettmuskelskada och återhämtning efter behandling.
Hos gnagare är musklerna grunda och hudområdet är litet, vilket också avgör att de olika parametrarna för massage hos gnagare inte kommer att vara desamma som hos människor, såsom vid djurterapi, massageterapeuten bör behandla dem med mindre kraft med Dings rullningsmetod, och kanske inte bidrar till denna teknik på grund av det skadade områdets lilla storlek, vilket i slutändan kan leda till en minskning av massagens effektivitet. Därför använde experimentet den rullande massageapparaten som gjorts internt, som överensstämmer med egenskaperna hos Dings rullmetod, för att ingripa och utvärdera den terapeutiska effekten av den notexin-inducerade skelettmuskelskademodellen hos råttor, vilket hjälper till att standardisera parametrarna för Tuina i experimentella djurstudier för att grundligt undersöka den molekylära verkningsmekanismen för Tuina, en traditionell kinesisk medicinbehandlingsmetod, på muskuloskeletala sjukdomar.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Procedurer som involverar djur har godkänts av Institutional Care and Use Committee vid Hunan University of Chinese Medicine.
1. Montering av den rullande massageapparaten
- Välj en massageapparat som består av en gummirulle, gaffelhållare, fjäder, gränsbaffel, justeringsskena, skruv och akrylhandtag (Figur 1). Se till att gummirullen är 3 cm lång och 1,6 cm i diameter, fjädern är 3 cm lång och 0,9 cm i diameter, att gränsbaffeln är 3 cm lång och 2 cm bred och att handtaget är 12 cm långt och 0,9 cm i diameter.
- Kraftkontroll: Enligt litteraturresultaten23 visade sig Dings rullningsmetod vara ett nedåtriktat tryck på cirka 10 % av kroppsvikten, så trycket som appliceras under utformningen av framåtrullning är cirka 10 % av råttans kroppsvikt (0,2-0,3 N). Testa massageapparatens maximala tryck på vägningsregulatorn till cirka 0.3 N genom att justera vinkeln på gränsbaffeln. Detta tryckkrav uppfyller råttans behov.
- Se till att minimitrycket är cirka 0.08 N när du rullar bakåt (Figur 2). Se till att trycket är exakt i överensstämmelse med kravet på Dings rullningsmetod att förhållandet mellan krafterna framåt och bakåt är 3:1.
- Före behandling, be operatören att arbeta med metronomprogramvaran för att styra rullningsfrekvensen till 140 rullar/min och öva på detta mer än 3x i förexperimentet för att säkerställa att operationen är standardiserad.
2. Etablering av en råttmodell av skelettmuskelskada
- Dela slumpmässigt upp 24 hanråttor av släktet Sprague-Dawley (som väger 200-250 g) i tre grupper med åtta råttor i varje, inklusive kontroll (C), notexin (NTX) och notexin med Tuina (NTX + Tuina), och ät en standarddiet. Håll på en 12 timmars ljus/12 timmars mörk cykel, hus vid 20-25 °C och 50%-70% luftfuktighet.
- Bedöva med 1 % pentobarbitalnatrium (40 mg/kg) genom intraperitoneal injektion och ta sedan bort hår från höger nedre extremitet med hårborttagningskräm. Efter att ha tagit bort pälsen, torka av den kvarvarande krämen med koksaltlösning. Bekräfta adekvat anestesi genom att nypa ihop tårna. Applicera oftalmisk salva för att återfukta ögonen medan djuret är under narkos. Ge termiskt stöd under hela proceduren.
- Alternera huddesinfektion för höger nedre extremitet med jodofordesinfektionslösning och 75 % alkohol före injektion. Rör en bomullspinne indränkt i jodofordesinfektionslösning mot mitten av huden i nedre extremiteten och applicera i en cirkulär rörelse utåt. Upprepa med en etanolindränkt bomullspinne.
- Upprätta skelettmuskelskademodeller enligt referensmetod24. Injicera notexin endast i ett ben (för att förhindra dubbel injektion av notexin). Dra upp 200 μl notexinlösning (10 μg/ml notexinlösning beredd genom att tillsätta 100 μg notexin till 10 ml normal koksaltlösning i ett 15 ml centrifugrör) i en 1 ml spruta med en 30 G nål och injicera notexinlösningen intramuskulärt i gastrocnemiusmuskeln för att orsaka muskelskada.
- Injicera notexin långsamt och vänta i 3 sekunder innan du drar ut nålen (som ska injiceras helt).
VARNING: Notexin är en giftig kemikalie som kräver omedelbar spolning med mycket vatten vid kontakt med ett öppet sår och omedelbar läkarvård vid behov. - Injicera råttorna i kontrollgruppen med 200 μl koksaltlösning. Flytta sövda råttor till tomma burar med rent strö. Var noga med att ta bort vadderingen runt råttornas nos och mun för att hålla andningen klar. Observera visuellt vävnadens färg och andningsfrekvens i slutet av injektionen tills råttorna återfår tillräckligt medvetande.
- Sätt tillbaka råttorna i hemburen och föd vanligtvis upp dem i 24 timmar.
3. Tuina-terapi
- Placera en SD-råtta i bukläge med huvudet täckt av en svart trasa på experimentplattformen desinficerad med 75 % alkohol för att exponera gastrocnemius-muskeln. Täck inte för hårt.
- Använda Tuina-massageapparaten för NTX+Tuina-gruppen: Håll massageapparaten och placera rullen på råttans gastrocnemiusmuskel och rulla framåt tills fjädern kommer i kontakt med gränsbaffeln. Dra sedan tillbaka kraften och återgå till sitt ursprungliga läge och därigenom fram- och återgående rörelse (figur 3).
- Rulla massageapparaten med en hastighet av 140 rullar per minut och utför varje operation i 3 minuter. Utför massagen en gång på morgonen och en gång på eftermiddagen i 3 dagar i följd.
- Sätt tillbaka råttorna i hemburen efter varje behandling och fasta i 8 timmar efter den sista behandlingen.
4. Insamling av blod och vävnader från råttor efter försöket
- I enlighet med kraven från den relevanta etiska kommittén för djurförsök, söva råttor genom intraperitoneal injektion av 1 % pentobarbitalnatrium (40 mg/kg, intraperitoneal injektion). Bekräfta adekvat anestesi genom att nypa ihop tårna. Avliva råttor genom åderlåtning av bukaorta efter blodinsamling.
- Alternera huddesinfektionen med jodofordesinfektionslösning och 75 % alkohol före injektion. Rör en bomullspinne indränkt i povidonjod mot mitten av bukhuden och applicera i en cirkulär rörelse utåt. Upprepa med en etanolindränkt bomullspinne. Upprepa desinfektionen 3 gånger.
- Be assistenten att använda två hemostater för att lyfta huden i mitten av buken. Som operatör använder du en skalpell för att skära igenom bukhuden och musklerna från raphe till blygdbenssymfysen.
- Efter att ha öppnat bukhålan, separera tarmen med sterila bomullstussar för att exponera bukaortan i den bakre bukväggen.
- Lokalisera bukaortan, ta 5 ml råttblod i bloduppsamlingsrör och få plasman i 1,5 mikrorör genom centrifugering vid 3000 x g i 10 minuter efter stående blod i 1 timme. Plasma förvaras vid -80 °C.
- Skär upp huden med en kirurgisk sax längs den nedre buköppningen mot den laterala aspekten av den högra nedre extremiteten, exponera musklerna i de nedre extremiteterna, och efter att försiktigt ha separerat fascian med pincett, klipp skalpellen för att ta bort den intakta gastrocnemius-muskeln.
- Tvätta gastrocnemiusmuskeln i steril koksaltlösning för att ta bort hår och blod som fastnat.
- Placera den borttagna gastrocnemiusmuskeln i ett 15 ml centrifugrör som innehåller 4 % paraformaldehyd.
5. Detektion av CK- och FALP 3-nivåer i plasma med ELISA
- Beräkna och bestäm antalet färdigförpackade plåtar som krävs för ett experiment. Ta bort de nödvändiga plattorna, placera dem i ramen med 96 brunnar, sätt tillbaka de återstående mikroplattorna i aluminiumfoliepåsen för försegling och förvara dem vid 4 °C.
- Utjämna satserna och proverna vid rumstemperatur (25–28 °C) i 120 minuter, helt i jämvikt med rumstemperatur.
OBS: Jämvikt mellan satsen och sample är kritisk och måste balanseras till tillräcklig tid. - Ställ in standard-, prov- och tomma brunnar. Tillsätt 50 μl CK- eller FABP3-standard vid olika koncentrationer (100, 50, 25, 12,5, 6,25, 0 ng/ml) till standardbrunnarna. Upprepa varje standard en gång och uppta totalt 12 brunnar.
- Fyll provbrunnarna med 40 μl spädningsmedel (0,8 g NaCl, 0,02 g KH 2 PO 4, 0,29 g Na 2 HPO 4 12H2O,0,02 g KCl, 0,01 g NaN3i 100 ml dubbeldestillerat vatten, pH 7,4), följt av 10 μL av provet som ska testas. Upprepa varje sample en gång, upptar totalt 48 brunnar.
- Med undantag för de tomma brunnarna som är belägna två brunnar bakom den sista provbrunnen, tillsätt 100 μL HRP-märkt anti-human CK eller FABP3-antikropp (enzymmärkt antikropp) till varje standard- och provbrunn.
- Försegla brunnarna med tätningsfilm och inkubera i ett 37 °C vattenbad eller termostat i 60 minuter.
- Kassera vätskan, klappa torrt på absorberande papper, fyll varje brunn med tvättvätska, låt stå i 20 s, skaka av tvättvätskan, klappa torrt på läskpapper och upprepa tvätten av tallriken 5 gånger (eller använd en tallriksbricka).
- Tillsätt 50 μl kromogenlösning A (20 mg tetrametylbensidin, 10 ml etanol i 100 ml dubbeldestillerat vatten) och 50 μl kromogenlösning B (0,1 m/l citronsyra, 0,2 m/l natriumdivätefosfatbuffert, pH 5,0–5,4) till varje brunn. Förvaras åtskilt från ljus i 15 minuter vid 37 °C.
- För standardbrunnar, provbrunnar och tomma brunnar, tillsätt 50 μl termineringslösning till varje brunn och mät det optiska densitetsvärdet för varje brunn vid 450 nm inom 15 minuter.
6. Histologisk analys av notexin-inducerad gastrocnemius muskelskada hos råttor
- Bered 5 μm tjocka paraffinsnitt färgade med hematoxylin och eosin för lättmikroskopisk undersökning enligt beskrivningen ipunkt 25.
7. Bildbehandling och dataanalys
- Läs och analysera bilderna som tagits av bildsystemet med analysprogramvara. Flytta det markerade bildfältet till mitten av skärmen med musen, klicka 40x och klicka sedan på Ta ögonblicksbild.
- Anteckna OD-värdena från ELISA i ett kalkylblad och beräkna råttans CK- och FABP3-nivåer i proverna med hjälp av standardkurvan.
- Använd programvara för statistisk analys för de statistiska analyserna. Uttrycka mätningar som medelvärde ± standardavvikelse (
), och analysera jämförelser mellan grupper med envägs ANOVA, med LSD-testet när variansen var likformig och Tamhane T2-metoden när variansen inte var likformig. Skillnaden ansågs vara statistiskt signifikant vid ett p-värde mindre än 0,05.
), och analysera jämförelser mellan grupper med envägs ANOVA, med LSD-testet när variansen var likformig och Tamhane T2-metoden när variansen inte var likformig. Skillnaden ansågs vara statistiskt signifikant vid ett p-värde mindre än 0,05.Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
För att observera de morfologiska egenskaperna hos råttans skelettmuskulatur efter skada färgades gastrocnemiusmuskeln med hematoxylin och eosin, och de färgade bilderna lästes av med ett analysprogram enligt beskrivningen i protokollet för 8 råttor per grupp. Hos råttor med gastrocnemius muskelskada inducerad av notexin (NTX-gruppen) var många muskelceller brustna, atrofiska, nekrotiska och oregelbundet arrangerade. Det fanns också en hög infiltration av neutrofiler och lymfocyter runt det drabbade området (Figur 4B). Men efter Tuina-behandling med den rullande massageapparaten förbättrades det patologiska tillståndet hos muskelcellerna i NTX+Tuina-gruppen, med färre brustna, atrofiska och nekrotiska celler, och endast ett litet antal inflammatoriska celler som infiltrerade jämfört med NTX-gruppen (Figur 4C). I kontrollgruppen var muskelcellerna hos råttor jämnstora, tätt arrangerade och utan inflammatorisk cellinfiltration (Figur 4A).
För att ytterligare bekräfta den terapeutiska effekten av Tuina på gastrocnemius-skada hos råttor med hjälp av Dings rullande massageapparat, använde vi ELISA för att detektera nivåerna av skelettmuskelskademarkörerna CK och FABP3 för 8 råttor per grupp. Jämfört med kontrollgruppen var CK- och FABP3-nivåerna signifikant förhöjda i NTX-gruppen, och både CK- och FABP3-nivåerna minskade markant i NTX+Tuina-gruppen jämfört med NTX-gruppen (Figur 5). Dessa resultat tyder på att injektion av notexin orsakade allvarliga skador på gastrocnemiusmuskeln hos råttor, medan Tuina kan minska denna skada.
Figur 1: Fysisk karta över rullande massageapparat. Den består huvudsakligen av en gummirulle, gaffelhållare, fjäder, gränsbaffel, justeringsskena, skruv och akrylhandtag. Skalstreck = 1 cm. Klicka här för att se en större version av denna figur.
Figur 2: Kraftmätning av rullande massageapparat. Det maximala trycket för framåtrullning är 0.3 N, och det minsta trycket är cirka 0.08 N vid rullning tillbaka. Klicka här för att se en större version av denna figur.
Figur 3: Tuina-terapi med rullande massageapparat. Placera rullen på råttans gastrocnemiusmuskel och rulla framåt tills fjädern kommer i kontakt med gränsbaffeln, dra sedan tillbaka kraften och återgå till sitt ursprungliga läge, varigenom rörelsen återgår till rörelsen. Klicka här för att se en större version av denna figur.
Figur 4: Representativa bilder av HE-färgat tvärsnitt av råttans gastrocnemiusmuskel. (A) Gastrocnemiusmuskeln hos kontrollgruppen (C) hos råttor i kontrollgruppen skadades inte signifikant efter injektion med koksaltlösning. (B) Notexininjektion i gastrocnemiusmuskeln hos råttor i notexingruppen (NTX) orsakade allvarlig muskelskada, vilket resulterade i myocytatrofi, nekros och varierande storlekar, åtföljd av en massiv infiltration av neutrofiler och lymfocyter. (C) Muskelskadan gastrocnemius försvagades i notexin- och Tuina-gruppen (NTX+Tuina) hos råttor, och antalet atrofiska och nekrotiska myocyter, neutrofiler och lymfocyter minskade. Skalstapel = 100 μm. Klicka här för att se en större version av denna figur.
Bild 5: CK- och FABP3-uttryck. Plasma skördades efter avslutad behandling med Tuina, och koncentrationerna av CK och FABP3 i plasma hos råttor i kontroll (C), notexin (NTX) och notexin och Tuina (NTX+Tuina) detekterades med ELISA. *P < 0,05, **P < 0,01 med envägs ANOVA med post-hoc LSD-test. Värdena är medelvärdet ± SEM, n=8 i alla grupper. Klicka här för att se en större version av denna figur.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Här beskrev vi ett protokoll för Tuina-behandling av skelettmuskelskada hos råtta och analyserade sedan graden av skelettmuskelskada efter behandling för att verifiera metodens effektivitet. Framför allt kan modeller för skelettmuskelskada på råtta, inklusive men inte begränsat till läkemedelsinduktion (notexin, bupivakain)16, trubbig kontusion 26, kross 27 och ischemi reperfusion28, användas med Tuina. Genom HE-färgning för att observera de histopatologiska förändringarna och ELISA-detektion för att bestämma markörerna för skelettmuskelskada, visas det intuitivt att notexin orsakar allvarlig skada på gastrocnemius-muskeln hos råttor, medan massageapparaten som simulerar Dings rullningsmetod kan minska muskelskadan. Dessa ger övertygande bevis för Tuinas effektivitet vid behandling av skelettmuskelskador.
Det finns flera nödvändiga procedurer som bör beaktas när man utför Tuina på råttor som efterliknar Dings rullningsmetod. Före behandlingen bör Tuina-operatören utbildas i förväg att använda den rullande massageapparaten minst 3 gånger, att justera baffelns vinkel med hjälp av trycksensorn för korrekt kraftkontroll och att styra frekvensen av Tuina vid 140 rullar/min. Under tiden kan du hålla råttorna tysta genom att täcka deras huvuden med en svart bandana utan att vara överdrivet hårt åtdragen för att säkerställa att de kan andas fritt. Om råttan plötsligt kämpar för att vara aktiv i Tuina-processen, vänta tills det är tyst innan du fortsätter Tuina.
Begränsningen med detta experiment är att denna massageapparat är lämplig för råttor snarare än mindre djur, som möss. För andra djur än råttor kan vissa instrumentkonfigurationer ändras. Såsom storleken på rullarna, vinkeln på baffeln, fjäderns styrka och naturligtvis måste trycksensorn användas för att testa rullkraften. Vi har bara gjort en Tuina-massageapparat som simulerar Dings rullningsmetod här. Som en icke-farmakologisk behandling av traditionell kinesisk medicin finns det dock olika Tuina-manipulationer, såsom att trycka, fukta, pressa och knåda. Alla dessa manipulationer kan göras enligt driftsparametrarna för relevanta kända Tuina-mästare för att producera ett instrument som är mer lämpat för djurförsök för att standardisera den experimentella operationen och göra de experimentella resultaten mer exakta och trovärdiga.
Sammanfattningsvis ger vi en detaljerad beskrivning av tillverkningsmetoden för den rullande massageapparaten som effektivt simulerar Dings rullmetod under djurförsök. Massageapparaten har en betydande terapeutisk effekt på skelettmuskelskador hos råttor och lägger grunden för vidare forskning om standardisering av Tuina.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Författarna har inget att avslöja.
Acknowledgments
Denna forskning stöddes av bidrag från National Natural Science Foundation of China (Grant Nos.82174521), innovationsprojekt för doktorander vid Hunan University of Chinese Medicine (2022CX109)
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 1 mL syringe | JIANGXI FENGLIN | 20220521 | |
| 1.5 microtubes | Servicebio | EP-150X-J | |
| 15 mL centrifuge tube | Servicebio | EP-1501-J | |
| 30G needle | CONPUVON | 220318 | |
| 5 mL blood collection tube | Servicebio | QX0023 | |
| Acrylic handle | Guangdong Guangxingwang Plastic Materials Co., Ltd | 65643645 | |
| Adjustment splint | CREROMEM | 20220729 | |
| Cotton Swab | INOHV | 22080215 | |
| Enzyme-labeled Instrument | Rayto | RT-6100 | |
| Ethanol | INOHV | 211106 | |
| Fork holder | Yongkang Kangzhe Health Technology Co., Ltd | JL001 | |
| Hair removal cream | Veet, France | LOTC190922002 | |
| Hematoxylin dyeing solution set | Wuhan Google Biotech | G1005 | |
| Imaging system | Nikon, Japan | Nikon DS-U3 | |
| IODOPHOR disfecting solution | Hale&Hearty | 20221205 | |
| Light microscope | Nikon, Japan | Nikon Eclipse E100 | |
| Limit baffle | CREROMEM | 20220724 | |
| Notexin | Latoxan S.A.S. | L8104-100UG | |
| Pentobarbital sodium | Merck KGaA | P3761 | |
| Rat creatine kinase (CK) ELISA kit | LunChangShuoBiotech | YD-35237 | |
| Rat fatty acid-binding protein 3 (FABP3) ELISA kit | LunChangShuoBiotech | YD-35730 | |
| Rubber roller | Hebei Mgkui Chemical Technology Co.,Ltd | 202207 | |
| Screw | Weiyan Hardware | B05Z122 | |
| Sprague Dawley rats | Hunan Slake Kingda Laboratory Animal Co. | SYXK2019-0009 | |
| Spring | Bingzhang Hardware | TH001 | |
| Surgical blade | Covetrus | #23 | |
| Weigh controller | Iyoys | HY-XSQ |
References
- Lempainen, L., et al. Management of anterior thigh injuries in soccer players: practical guide. BMC Sports Science, Medicine and Rehabilitation. 14 (1), 41 (2022).
- Bayer, M. L., Mackey, A., Magnusson, S. P., Krogsgaard, M. R., Kjær, M. Treatment of acute muscle injuries (in Danish). Ugeskrift for Laeger. 181 (8), V11180753 (2019).
- Serner, A., et al. Progression of Strength, Flexibility, and Palpation Pain During Rehabilitation of Athletes with Acute Adductor Injuries: A Prospective Cohort Study. The Journal of Orthopaedic and Sports Physical Therapy. 51 (3), 126-134 (2021).
- Gozubuyuk, O. B., Koksal, C., Tasdemir, E. N. Rehabilitation of a patient with bilateral rectus abdominis full thickness tear sustained in recreational strength training: a case report. Physiotherapy Theory and Practice. 38 (13), 3216-3225 (2022).
- Hotfiel, T., et al. Current Conservative Treatment and Management Strategies of Skeletal Muscle Injuries. Zeitschrift für Orthopädie und Unfallchirurgie. 154 (3), 245-253 (2016).
- de Sire, A., et al. Pharmacological Treatment for Acute Traumatic Musculoskeletal Pain in Athletes. Medicina. 57 (11), 1208 (2021).
- Connor, D. E., et al. Therapeutic potential of exosomes in rotator cuff tendon healing. Journal of Bone and Mineral Metabolism. 37 (5), 759-767 (2019).
- Martins, A. L. L., Giorno, L. P., Santos, A. R. Jr Tissue Engineering Applied to Skeletal Muscle: Strategies and Perspectives. Bioengineering. 9 (12), 744 (2022).
- Horgan, D., et al. Clouds across the new dawn for clinical, diagnostic and biological data: accelerating the development, delivery and uptake of personalized medicine. Diagnosis. , (2023).
- Urits, I., et al. A Comprehensive Review of Alternative Therapies for the Management of Chronic Pain Patients: Acupuncture, Tai Chi, Osteopathic Manipulative Medicine, and Chiropractic Care. Advances in Therapy. 38 (1), 76-89 (2021).
- Lee, N. W., et al. Chuna (or Tuina) Manual Therapy for Musculoskeletal Disorders: A Systematic Review and Meta-Analysis of Randomized Controlled Trials. Evidence-based Complementary and Alternative Medicine: eCAM. 2017, 8218139 (2017).
- Xie, J., Deng, D. X., Chen, Y., Peng, L. Progress in the intervention of massage techniques on skeletal muscle injury. Hunan Journal of Traditional Chinese Medicine. 34 (04), 199-201 (2018).
- Yuan, Y., Zhang, H., Zhang, G. H., Xue, X. N. Research progress on microstructure changes and rehabilitation treatment of exercise-induced skeletal muscle injury. Massage and Rehabilitation Medicine. 14 (6), 29-33 (2023).
- Zhao, Y. The Establishment of Famous Tuina Master Ding Jifeng and Wei Fa - Commemorating the 100th Anniversary of Mr. Ding Jifeng's Birthday. Traditional Chinese Medicine Culture. 9 (6), 18-21 (2014).
- Hardy, D., et al. Comparative Study of Injury Models for Studying Muscle Regeneration in Mice. PloS one. 11 (1), e0147198 (2016).
- Plant, D. R., Colarossi, F. E., Lynch, G. S. Notexin causes greater myotoxic damage and slower functional repair in mouse skeletal muscles than bupivacaine. Muscle & Nerve. 34 (5), 577-585 (2006).
- Tierney, M. T., Sacco, A. Inducing and Evaluating Skeletal Muscle Injury by Notexin and Barium Chloride. Methods in Molecular Biology. 1460, 53-60 (2016).
- Torres-Ruiz, J., Alcalá-Carmona, B., Alejandre-Aguilar, R., Gómez-Martín, D. Inflammatory myopathies and beyond: The dual role of neutrophils in muscle damage and regeneration. Frontiers in Immunology. 14, 1113214 (2023).
- Tu, H., Li, Y. L. Inflammation balance in skeletal muscle damage and repair. Frontiers in Immunology. 14, 1133355 (2023).
- Castro, C., Gourley, M. Diagnosis and treatment of inflammatory myopathy: issues and management. Therapeutic Advances in Musculoskeletal Disease. 4 (2), 111-120 (2012).
- Dabby, R., et al. Asymptomatic or minimally symptomatic hyperCKemia: histopathologic correlates. The Israel Medical Association Journal: IMAJ. 8 (2), 110-113 (2006).
- Khodabukus, A., et al. Tissue-Engineered Human Myobundle System as a Platform for Evaluation of Skeletal Muscle Injury Biomarkers. Toxicological Sciences. 176 (1), 124-136 (2020).
- Zhou, X. W., Jin, W. D., Zhu, L., Liu, X. H., Zhou, B. H. Experimental observation on the influence of different frequency, intensity and action time of Ding rolling manipulation on hemodynamics. Shanghai Journal of Traditional Chinese Medicine. (06), 42-44 (1998).
- Pablos, A., et al. Protective Effects of Foam Rolling against Inflammation and Notexin Induced Muscle Damage in Rats. International Journal of Medical Sciences. 17 (1), 71-81 (2017).
- Wisner, L., Larsen, B., Maguire, A. Enhancing Tumor Content through Tumor Macrodissection. Journal of Visualized Experiments: JoVE. (180), e62961 (2022).
- Deng, P., et al. Contusion concomitant with ischemia injury aggravates skeletal muscle necrosis and hinders muscle functional recovery. Experimental Biology and Medicine. 247 (17), 1577-1590 (2022).
- Dobek, G. L., Fulkerson, N. D., Nicholas, J., Schneider, B. S. Mouse model of muscle crush injury of the legs. Comparative Medicine. 63 (3), 227-232 (2013).
- Armstrong, D. M., et al. Sildenafil citrate protects skeletal muscle of ischemia-reperfusion injury: immunohistochemical study in rat model. Acta Cirúrgica Brasileira. 28 (4), 282-287 (2013).
