神経損傷を調べるための器官型海馬スライス培養モデル
Summary
organoptypic海馬スライス培養モデルは、<em> in vitroで</em>モデルは、パラダイムの様々な神経損傷を調べるために使用。この記事では、スライス培養を生成し、神経損傷を定量化するための方法を説明します。
Abstract
器官海馬スライス培養では、海馬の基本的なアーキテクチャとコンポジションが相対的に1を保存されている神経細胞傷害のメカニズムを調べるためにin vitro法です。器官培養系は、神経細胞のアストロサイトやミクログリアの効果の検査は可能ですが、ex vivoでの準備として、血流、または末梢炎症性細胞の動員の影響には対応していません。そのために、この培養法は、頻繁に海馬の錐体ニューロンに興奮毒性と低酸素障害を調べるために使われるだけでなく、炎症反応を調べるために使用されています。ここで我々は、出生後の齧歯類の脳から海馬スライス培養を生成する神経細胞傷害を誘発する有毒な刺激を投与し、海馬神経細胞死を測定すると定量化するための方法を説明します。
Protocol
1。準備開始する前に、必要な手術器具、解剖や文化、メディア、および7日齢のラットまたはマウスの仔を組み立てる。プロトコルは、マウスやラットの準備のための同じです。 （ⅰ）材料および機器営業ハサミ（ストレート長さ6"、猫＃RS6818、Roboz、ゲイサーズバーグ、MD） Microは、ハサミ、解剖（長さ4'"、猫＃RS5910を。Roboz…
Discussion
実験を複製するときに再現性と一貫性のある結果を確保するために実行するには、2つの重要なポイントがあります。最初に、実験前に12-14日のために海馬スライスの年齢を聞かせすることが重要です。スライスの分離により、大幅なミクログリアの応答がある、とミクログリアをin vitroで 3,6 で 10日目で発生安静分岐し状態に戻ると、しばらくの間有効なまま。第二に、P…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
NINDS、米国心臓協会、老化研究のためのアメリカ連合、ダイムの月によって資金を供給
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Tags
Organotypic Hippocampal Slice CultureNeuronal InjuryIn Vitro MethodHippocampusNeuronal ArchitectureCompositionOrganotypic Culture SystemAstrocytic EffectsMicroglial EffectsEx Vivo PreparationBlood Flow EffectsPeripheral Inflammatory CellsExcitotoxic InjuryHypoxic InjuryPyramidal NeuronsInflammatory ResponseMethods For Generating Hippocampal Slice CulturesToxic StimuliAssaying And Quantifying Neuronal Death
Cite This Article
Wang, Q., Andreasson, K. The Organotypic Hippocampal Slice Culture Model for Examining Neuronal Injury. J. Vis. Exp. (44), e2106, doi:10.3791/2106 (2010).