В этом протоколе, мы демонстрируем изготовление microactuator массив вертикально перемещенных сообщений, на котором основана технология, и как это технологическая база может быть изменена для проведения высокой пропускной способностью механически динамических клеточных культур в обоих двумерных и трехмерных культуры парадигм.
Способность систематически зонда в пробирке клеточного ответа на комбинации mechanobiological стимулы для тканевой инженерии, лекарств или фундаментальные исследования клеточной биологии ограничено современными технологиями биореактора, которые не могут одновременно применяться различные механические стимулы к культуре клеток. Для того, чтобы решить эту проблему, мы разработали серию microfabricated платформы предназначены для выявления последствий механических раздражителей в высокой пропускной формате. В этом протоколе, мы демонстрируем изготовление microactuator массив вертикально перемещенных сообщений, на котором основана технология, а в дальнейшем продемонстрировать, как базовой технологии могут быть модифицированы для проведения высокой пропускной способностью механически динамических клеточных культур в обоих двумерных и трех- мерных парадигмы культуры.
Хотя концептуально просты, устройство изготовления требуется некоторое экспериментальных навыков и практики. В частности, в случае 2D культуре клеток, выравнивание несколько слоев в устройстве может быть сложным, особенно на большой площади массива. С практической точки зрения, мы мож…
The authors have nothing to disclose.
Мы признаем, финансовая поддержка со стороны естествознания и техники Научно-исследовательский совет Канады и Канадского института исследований в области здравоохранения (CHRPJ 323533-06), стипендию Онтарио Высшей программы СМ и Канаде исследования кафедры в микро-и нано-технических систем к Ю.С., и в Mechanobiology в CAS.
Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
---|---|---|---|---|
Sylgard 184 PDMS Monomer and Crosslinker Kit | Dow Corning | |||
SU-8 masters | ||||
Silanization agent: (tridecafluoro-1, 1, 2, 2-tetrahydrooctyl)-1-trichlorosilane | United Chemical Technologies | |||
Foam pads | Craft supply stores, 1-2 mm thick | |||
Overhead inkjet transparencies | Grand & Toy | |||
Plexiglass plates | ||||
C-clamp | hardware store | |||
Micromanipulator system | Siskiyou | |||
Custom-made vaccum mount | ||||
Vision system, Navitar 12x zoom | Navitar | |||
Connecting tubes | VWR International | Clay Adam Intramedic PE190 | ||
Blunt 18G needles | Smallparts.com / Amazon Inc. | |||
Eccentric diaphragm micropump | Schwarzer Precision | SP 500 EC-LC4.5V DC | ||
Solenoid valves | Pneumadyne | S10MM-30-12-3 | ||
Solenoid manifold | Pneumadyne | MSV10-1 | ||
Function generator | ||||
3-(trimethoxysilyl) propyl methacrylate | Sigma | |||
Polyethylene glycol diacrylate 3.4 kDa | Laysan Bio | |||
Polyethylene glycol 8 kDa | Sigma | |||
Irgacure 2959 | Ciba Specialty Chemicals | |||
1-vinyl-2-pyrolidinone | Sigma | |||
Standard cell culture reagents |