Indução de aloantígenos específicos de anergia em células mononucleares do sangue periférico por Estimulação com aloantígenos Co-estimulatórias bloqueio de sinal

Summary

Este artigo descreve uma técnica simples para induzir aloantígenos específicos de anergia em células mononucleares do sangue periférico. A técnica pode ser aplicada clinicamente para gerar células não-alorreativas doador. Infusão dessas células poderia melhorar a reconstituição imunológica e reduzir a toxicidade após o transplante alogênico de células-tronco hematopoiéticas.

Abstract

Alogênico de células tronco hematopoiéticas transplante (TACTH) oferece a melhor chance de cura para muitos pacientes com doenças congênitas e adquiridas hematológicas. Infelizmente, o transplante de células do doador alorreativas T que reconhecem e danificar os tecidos do paciente saudável pode resultar em Graft-versus-hospedeiro (GVHD) ^1. Um desafio para TACTH sucesso é a prevenção de DECH sem comprometimento associado aos efeitos benéficos das células T do doador, a reconstituição particularmente imunológico e prevenção de recaída. DEvH pode ser prevenida por não-específicas depleção de células T do doador de enxertos de células-tronco ou por administração de imunossupressão farmacológica. Infelizmente, estas infecções aumentam abordagens e doença recaída ^2-4. Uma estratégia alternativa é seletivamente destroem as células T do doador após alorreativas allostimulation por células do receptor apresentadoras de antígenos (APC) antes do transplante. Os primeiros estudos clínicos dessas estratégias allodepletion melhor reconstituição imunológica após o transplante HLA-incompatíveis, sem excesso de DEvH ^{5, 6.} No entanto, algumas técnicas exigem allodepletion especializados destinatário produção APC ^{6, 7} e algumas abordagens podem ter efeitos fora do alvo, incluindo a depleção de células de doadores de patógenos específicos T ⁸ e T CD4 células regulatórias ^9. Uma abordagem alternativa é a inativação de células T do doador alorreativas através da indução de aloantígenos específicos hiporeactividade. Isto é conseguido através estimulando células do doador com o receptor APC, proporcionando bloqueio de CD28 mediada co-estimulação sinais ^10. Este "alloanergization" abordagem reduz alloreactivity por 1-2 logs preservando patógeno e tumor associado antígeno respostas de células T in vitro ¹¹ . A estratégia tem sido empregada com sucesso em 2 concluídas e 1 em curso estudos-piloto clínicos nos quais as células T do doador alloanergized foram infundidos durante ou após o transplante HLA-incompatíveis, resultando em rápida reconstituição imune, infecções poucos e menos grave DECH aguda e crônica do que os destinatários de controle histórico não-manipulado HLA-incompatíveis transplante ^12. Aqui nós descrevemos nosso protocolo atual para a geração de células mononucleares do sangue periférico (PBMC), que foram alloanergized para HLA-incompatíveis PBMC estimulador não relacionados. Alloanergization é conseguido através allostimulation na presença de anticorpos monoclonais para os ligantes B7.1 e B7.1 para bloquear CD28 mediada costimulation. Esta técnica não requer a produção de estimulador especializados APC e é simples de executar, requerendo apenas um único e relativamente breve ex passo de incubação vivo. Como tal, a abordagem pode ser facilmente padronizado para uso clínico para gerar células T do doador com alloreactivity reduzida, mas mantendo a imunidade de patógenos específicos para transferência adotiva na definição de TACTH para melhorar a reconstituição imune sem DEvH excessiva.

Protocol

Discussion