Windowing विकासात्मक अध्ययन के लिए चिकन अंडे
Summary
लड़की बटेर chimeras और फोकल डाई लेबलिंग सहित कई दृष्टिकोण का उपयोग करने के लिए सेल भाग्य नक्शा भ्रूण की पहुंच में आसानी के प्रयोगों के लिए अनुमति दी गई है. इस अनुच्छेद में हम एक अंडे की तैयारी तरीका है कि लंबे समय अस्तित्व समय के लिए ऑप्टिमाइज़ किया गया है प्रदर्शित करता है.
Abstract
विकास के अध्ययन बहुत लड़की भ्रूण के एक प्रयोगात्मक मॉडल के रूप में उपयोग के द्वारा सहायता प्राप्त किया गया है. लड़की बटेर chimeras और फोकल डाई लेबलिंग सहित कई दृष्टिकोण का उपयोग करने के लिए सेल भाग्य नक्शा भ्रूण की पहुंच में आसानी के प्रयोगों के लिए अनुमति दी गई है. इसके अलावा, यह कई प्रकार के प्रोटीन लिपटे मोतियों और ओवो electroporation में प्लास्मिड डीएनए का उपयोग कर की शुरूआत की नियुक्ति सहित आणविक perturbations के लिए अनुमति देता है. इन प्रयोगों मध्य और परिधीय तंत्रिका प्रणाली के विकास पर महत्वपूर्ण डेटा झुकेंगे है. इन अध्ययनों से कई के लिए, यह आवश्यक है eggshell खुला और यह है भ्रूण विकास perturbing के बिना reclose. भ्रूण eggshell पुनः खोलने के द्वारा लगातार विकास के चरणों में जांच की जा सकती है. जबकि वहाँ चिकन अंडे इस लेख में, खोलने के लिए कई उत्कृष्ट तरीके हैं हम एक तरीका है कि लंबे समय अस्तित्व समय के लिए ऑप्टिमाइज़ किया गया है प्रदर्शित करता है. इस विधि में, अंडे अपने पक्ष पर टिकी हुई है और एक छोटी सी खिड़की खोल में कट जाता है. प्रयोगात्मक प्रक्रिया के बाद खोल करने के लिए इसके विकास की अवधि के लिए अंडे को कवर करने के लिए प्रयोग किया जाता है. साफ प्लास्टिक eggshell overlying टेप भ्रूण रक्षा और ऊष्मायन अवधि के शेष के दौरान जलयोजन बनाए रखने में मदद करता है. इस विधि के ऊष्मायन के दो दिनों के में किया गया है शुरुआत इस्तेमाल किया और परिपक्व भ्रूण उम्र के माध्यम से जीवित रहने की अनुमति.
Protocol
Discussion
इस विधि प्रयोगात्मक अभिव्यक्ती के बाद लंबे समय अस्तित्व समय के लिए अनुमति देता है. उदाहरण के लिए, डाई लेबलिंग अध्ययन E10 या बाद में एक भाग्य मानचित्रण अध्ययन (1) में अस्तित्व की अनुमति दी. इसके अलावा, यह ओवो electroporation अ?…
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Rotating incubator | Profi | Maintain at 37° Degrees with relative humidity set above 60% | ||
| 70 % EtOH | ||||
| gauze | ||||
| 3M plastic tape | ||||
| 10cc syringe | 1/egg | |||
| 18G needles | 1½ inch needle, 1/syringe | |||
| Dissection scissors | 4″ sharp straight blades | |||
| Fertilized Eggs |
References
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- Cramer, K. S., Bermingham-McDonogh, O., Krull, C. E., Rubel, E. W. . Dev Biol. 269, 26-35 (2004).
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