Легкость доступа к эмбрион позволило эксперименты по карте ячейки судьбы, используя несколько подходов, в том числе куриных перепела химеры и координационные маркировке краской. В этой статье мы показываем, одно яйцо подготовки метод, который был оптимизирован в течение долгого времени выживания.
Abstract
Изучение развития был значительно способствовало использование куриного эмбриона в качестве экспериментальной модели. Легкость доступа к эмбрион позволило эксперименты по карте ячейки судьбы, используя несколько подходов, в том числе куриных перепела химеры и координационные маркировке краской. Кроме того, оно позволяет для молекулярных возмущения нескольких типов, в том числе размещение белка покрытием бисером и введение плазмидной ДНК с использованием в ово электропорации. Эти эксперименты были получены важные данные о развитии центральной и периферической нервной систем. Для многих из этих исследований, необходимо, чтобы открыть яичной скорлупы и повторного его, не возмущающие роста эмбриона. Эмбриона могут быть рассмотрены на последующих стадиях развития путем повторного открытия яичной скорлупы. Хотя Есть несколько отличных методов для открытия куриных яиц, в этой статье мы покажем один метод, который был оптимизирован в течение долгого времени выживания. В этом методе, яйцо лежит на боку и маленькое окошко режется в оболочке. После экспериментальной процедуры, оболочка используется для покрытия яйца в течение всего срока его развития. Прозрачная пластиковая лента вышележащих яичная скорлупа защищает эмбрион и помогает сохранить увлажнение в течение оставшейся части инкубационного периода. Этот метод был использован, начиная с двух дней инкубации и позволило выживание через зрелые эмбриональных возрастов.
Protocol
1. Удалить яйца из инкубатора Поддерживать при 37 ° С при относительной влажности установлен выше 60%. Удалить яйца; свою очередь, яйца 90 ° так, чтобы большая база лежит горизонтально. 2. Тампон яйца для стерилизации Пропитайте стек нестерильных марлевых с…
Discussion
Этот метод позволяет в течение долгого времени выживания следующих экспериментальных манипуляций. Например, краска маркировки исследования позволили выживание E10 или поздно в исследование судьбы отображения (1). Кроме того, он был использован для исследований в ово электропорации, которые обесп?…
Materials
Material Name
Type
Company
Catalogue Number
Comment
Rotating incubator
Profi
Maintain at 37° Degrees with relative humidity set above 60%