Dimostrazione di un saggio rapido quantitativo di inibizione della coagulazione del sangue dal basso peso molecolare eparina, enoxaparina. Il contributo di enoxaparina è valutata rimuovendo la sua influenza attraverso la digestione con eparinasi. Una descrizione più completa del saggio è presentato in dettaglio nel nostro documento pubblicato.<sup> 1</sup> Il test richiede ancora la conferma clinica.
Vi è la necessità di un dosaggio clinico per determinare la misura in cui il sangue di un paziente è anticoagulato efficacemente dal basso peso molecolare-eparina (LMWH), enoxaparina. Ci sono anche urgenti situazioni cliniche in cui sarebbe importante se questo potrebbe essere determinato rapidamente. Il test attuale è stato progettato per raggiungere questo obiettivo. Abbiamo solo analizzato campioni di sangue umano che sono stati diluiti con concentrazioni note di enoxaparina. La caratteristica essenziale del presente saggio è la quantificazione dell'efficacia di enoxaparina campione di sangue di un paziente degradando per completare inattività con eparinasi. Due campioni di sangue sono stati elaborati in provette Vacutainer (Becton-Dickenson, Franklin Lakes, NJ) che sono stati diluiti con enoxaparina, un campione è stato digerito con eparinasi per 5 min a 37 ° C, l'altro campione rappresentato anticoagulato stato basale del paziente. La riduzione percentuale del tempo di coagulazione in eparinasi campione sottoposto a trattamento, rispetto al bstato aseline, dato il contributo anticoagulante di enoxaparina. Abbiamo usato il portatile, a batteria Hemochron apparato 801 per misurazioni di tempi di coagulazione (International Technidyne Corp., Edison, NJ). L'apparecchio dispone di 2 termostatiche (37 ° C) pozzi tubolari saggio. Abbiamo condotto i saggi in due tipi di cartucce di saggio che sono disponibili presso il produttore dello strumento. Una cartuccia è stato modificato per aumentare la sua sensibilità. Abbiamo rimosso il caolino dal FTK-ACT cartuccia vasta risciacquo con acqua distillata, lasciando solo la superficie di vetro del tubo, e forse il magnete di rilevamento, come attivatori. Abbiamo chiamato questo nostro saggio minimamente attiva (MAA). L'uso di un saggio minimamente attivato è stato studiato da noi e altri. 2-4 La seconda cartuccia che è stato studiato era un tempo di tromboplastina parziale attivata (aPTT) assay (A104). Questo è stato impiegato come fornito dal produttore. I pozzetti termostatati dello strumento were utilizzato sia per la digestione eparinasi e test di coagulazione. Il dosaggio può essere completato entro 10 minuti. Il saggio MAA hanno mostrato cambiamenti robusti in tempo di coagulazione dopo la digestione eparinasi di enoxaparina in un intervallo di concentrazione tipica clinica. A 0,2 anti-Xa UI di enoxaparina per ml di campione di sangue, la digestione eparinasi provocato un calo medio del 9,8% (20,4 sec) in tempo di coagulazione, a 1,0 UI per ml di enoxaparina si è registrato un calo del 41,4% (148,8 sec). Questo rapporto presenta solo l'applicazione sperimentale del test, il suo valore in un contesto clinico deve essere ancora stabilita.
Questo test di efficacia enoxaparina può servire come una soluzione importante per determinare la relativa sicurezza di eseguire una procedura invasiva che ha un conseguente rischio di sanguinamento o lo sviluppo di un ematoma. Questo sarebbe di particolare importanza quando l'iniezione epidurale viene presa in considerazione. La maggior parte delle linee guida raccomandano un periodo di attesa di 12 ore tra l'iniezione di enoxaparina e l'avvio di una procedura invasiva 5 Insufficienza renale, obesità e la gravidanza può influenzare i requisiti di dosaggio di enoxaparina 6,7 Dal momento che il test può essere completato entro un 10.. – periodo min, potrebbe anche essere utilizzato in una clinica o in ufficio medico, dove sarebbe fornire informazioni sull'adeguatezza di anticoagulazione nei pazienti a rischio di sviluppo di tromboembolia venosa. Aggiustamenti posologici immediati potrebbe essere istituito, in base alle esigenze.
La concentrazione nel plasma enoxaparina può essere misurata con un cromogeno unssay del grado di inibizione del fattore della coagulazione, Xa. Tuttavia, questo produce solo la sua concentrazione non, in particolare la sua efficacia anticoagulante, che varia ampiamente tra i singoli pazienti. 6-8
I nostri studi sono stati effettuati solo con enoxaparina. Tuttavia, si può prevedere che il saggio può essere applicato a qualsiasi LMWH che è degradata da eparinasi I. Questo è già noto per essere il caso per dalteparina, nadroparina e tinzaparin. 9-11 Abbiamo progettato il dosaggio in relazione alle caratteristiche di la coagulazione Hemochron strumento tempo. Lo strumento è relativamente poco costoso, inoltre, getta le provette di raccolta del sangue, fiale eparinasi, saggio e cartucce per completare l'analisi per un paziente è di circa 15 dollari USA. Così, ci si aspetterebbe per essere adatto per monitorare lo stato anticoagulante in vari contesti clinici.
The authors have nothing to disclose.
Le indagini sono state condotte esclusivamente con il supporto di risorse dipartimentali e istituzionali. Il coagulatore (Hemochron 801) è stato prestato senza impegno dal produttore. Le cartucce del saggio sono stati acquistati a proprie spese al dettaglio. La figura introduttivo nel video è stato modificato da Sanderink, et al. 12 La seconda figura nel video (digestione corso eparinasi tempo) è stata riprodotta con il permesso di Inchiosa et al. 1
Name of reagent | Company | Catalogue number | Comments |
Hepzyme | Siemens | B4240 | heparinase I |
“MAA” cartridge | Technidyne | FTK-ACT | modified by kaolin removal |
aPTT cartridge | Technidyne | A104 |