Summary
हम सतत या स्पंदित दिखाई लेजर आधारित उपचार से जुड़े एक विकसित जैव चिकित्सा उपकरण एंटीबायोटिक उपचार (gentamycin) की व्यवहार्यता में कमी करने के लिए अग्रणी एक सांख्यिकीय महत्वपूर्ण synergistic प्रभाव में परिणाम के साथ संयुक्त है कि बताते हैं कि
Abstract
हाल ही में प्रकाश दिखाई देता है, उनमें से ज्यादातर विभिन्न रोगजनकों 1-5 की हत्या के लिए जिम्मेदार है स्पेक्ट्रम की कि नीले हिस्सा (400 एनएम 500 एनएम) का दावा है की जीवाणुनाशक प्रभाव पर कई प्रकाशनों थे. हल्के नीले रंग की phototoxic प्रभाव प्रकाश प्रेरित प्रतिक्रियाशील ऑक्सीजन प्रजातियों (ROS) ज्यादातर नीले क्षेत्र 4,6,7 में प्रकाश को अवशोषित जो अंतर्जात बैक्टीरियल photosensitizers द्वारा गठन का एक परिणाम हो सुझाव दिया गया था. लाल और पास बुनियादी लाल 8 के साथ ही हरी प्रकाश 9 की मारक प्रभाव की खबरें भी हैं.
वर्तमान अध्ययन में, हम हमारे Pseudomonas aeruginosa पर उच्च शक्ति हरी (532 एनएम के तरंग दैर्ध्य) निरंतर (सीडब्ल्यू) और स्पंदित क्यू स्विच (क्यूएस) प्रकाश के प्रभाव को चिह्नित करने के लिए अनुमति दी है कि एक विधि विकसित की है. इस पद्धति का उपयोग करके हम भी बैक्टीरिया व्यवहार्यता पर एंटीबायोटिक उपचार (gentamycin) के साथ संयुक्त हरी प्रकाश के प्रभाव का अध्ययन किया. पी. aeruginosa एसी हैommon noscomial अवसरवादी रोगज़नक़ विभिन्न रोगों के कारण. तनाव विभिन्न एंटीबायोटिक दवाओं के लिए काफी प्रतिरोधी है और कई भविष्यवाणी AcrB / मेक्स प्रकार RND तपका सिस्टम 10 बहुऔषध होता है.
मुक्त रहने वाले स्थिर चरण ग्राम नकारात्मक जीवाणुओं (पी. aeruginosa तनाव PAO1), Luria शोरबा (पौंड) के साथ और एंटीबायोटिक gentamycin के अलावा बिना क्यू स्विच और / या सीडब्ल्यू लेज़रों के संपर्क में मध्यम में उगाई उपयोग विधि. सेल व्यवहार्यता अलग समय बिंदुओं पर निर्धारित किया गया था. प्राप्त परिणामों अकेले लेजर उपचार केवल पी. के लिए व्यवहार्य गिनती में 0.5 लॉग कमी के परिणामस्वरूप अनुपचारित नियंत्रण और अकेले कि gentamycin उपचार की तुलना में सेल व्यवहार्यता कम नहीं किया था कि पता चला aeruginosa. संयुक्त लेजर और gentamycin उपचार, तथापि, पी. के एक synergistic प्रभाव और व्यवहार्यता के परिणामस्वरूप aeruginosa 8 लॉग के द्वारा कम हो गया था.
प्रस्तावित विधि आगे लागू किया जा सकता हैएक साथ प्रकाश के साथ क्षेत्र रोशन जबकि संक्रमित अंग में एक एंटीबायोटिक समाधान इंजेक्शन लगाने में सक्षम उपकरण की तरह कैथेटर के विकास के माध्यम से mented.
Protocol
1. बैक्टीरियल संस्कृति
- ग्राम नकारात्मक पी. aeruginosa तनाव PAO1 18 घंटे के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर Luria शोरबा (पौंड) में बड़े हो रहे थे.
- कोशिकाओं की संस्कृति तो 5 मिनट के लिए 7500 आरपीएम (प्रति मिनट दौर) पर centrifuged था और सतह पर तैरनेवाला हटा दिया गया था.
- बैक्टीरिया 10% लेग में resuspended और संस्कृति स्थिर चरण फिर से दर्ज करने की अनुमति देने के लिए एक और 2 घंटे के लिए फिर से बड़े हो रहे थे.
- जीवाणु निलंबन तो दो समूहों में विभाजित किया गया था: पहले समूह (2 ट्यूब) में कोई एंटीबायोटिक दूसरे समूह में हम gentamycin एंटीबायोटिक (50 माइक्रोग्राम / एमएल) जोड़ा गया, जोड़ा गया था.
2. कॉलोनी के गठन इकाइयों का निर्धारण (CFU)
- सेल व्यवहार्यता का निर्धारण करने के लिए 20 μl नमूने 24 घंटे की समय सीमा के भीतर लगभग हर 2 घंटा प्रयोग से लिया गया था. नमूने के सीरियल कमजोर पड़ने बनाया और चढ़ाया लेग अगर प्लेटों पर और 37 डिग्री सेल्सियस पर रातोंरात incubated रहे थे
- प्रत्येक उपचार के लिए, बेनी प्रति CFUsई निर्धारित किया गया था और एक तुलना समय अवधि और विभिन्न उपचार के बीच बनाया गया था. Eq में वर्णित के रूप में CFU में लॉग कमी गणना की गई. (1):
प्रवेश कमी = Logu-LogC [CFU / एमएल]
कहां यू हर समय बिंदु पर इकाइयों मूल्य बनाने कॉलोनी है, CFU कॉलोनी के गठन इकाई है, जबकि करने CFU / एमएल बराबर की इकाइयों:
CFU / एमएल (= कालोनियों एक्स कमजोर पड़ने कारक की संख्या) / (मात्रा टीका)
और सी शुरुआत के समय पर नियंत्रण के नमूने में पाया CFU है. यू माप पल में कारक कॉलोनी बनाने designates ध्यान दें. - उनमें से हर एक में बैक्टीरिया की एकाग्रता 10 का एक पहलू से कम हो गया था, जबकि कमजोर पड़ने कारक dilutions की संख्या है. टीका मात्रा हमेशा 200 माइक्रो लीटर था और यह हमारे टेस्ट ट्यूब के आकार से संबंधित है.
इसलिए देखने की एकाग्रता बिंदु संक्षेप में प्रस्तुत करने के लिए, gentamycin एंटीबायोटिक 50 माइक्रोग्राम / एमएल की एकाग्रता पर था. के अंत तक, बैक्टीरिया के बारे मेंप्रक्रिया हम समग्र 8 dilutions था. प्रत्येक कमजोर पड़ने से 10 का एक पहलू से था और यह 200 μl की नलियों में किया गया था. शुरुआती बिंदु 200 μl ट्यूब में जोड़ा नमूने के 20 μl था (और इस प्रकार प्रारंभिक एकाग्रता 20/200C 0 था सी 0 के साथ = 0.1C0 नमूने के 20 μl में प्रारंभिक एकाग्रता जा रहा है) और अंतिम एकाग्रता 8 से कम हो गया था 8 dilutions के कारण परिमाण के आदेश.
3. रोशनी
- सीडब्ल्यू एन डी: YAG लेजर (532 एनएम और 200 मेगावाट की औसत ऑप्टिकल बिजली की तरंग दैर्ध्य) ऑप्टिकल 50% / 50% बीम फाड़नेवाला का उपयोग कर दो ऑप्टिकल पथ में विभाजित किया गया था. किरण व्यास 10 मिमी के बारे में था. जोखिम अवधि 24 घंटा थी.
- क्यू स्विच स्पंदित एन डी: YAG लेजर (532 एनएम के तरंग दैर्ध्य, 300 मेगावाट और 2.5 मेगावाट की ऑप्टिकल शिखर बिजली की औसत शक्ति) भी ऑप्टिकल 50% / 50% बीम फाड़नेवाला का उपयोग करते हुए दो रास्तों में विभाजित किया गया था. मौके व्यास 6 मिमी था. क्यू स्विच लेजर की पल्स चौड़ाई 6 nsec था और पुनरावृत्ति दर 15Hz था.बिजली की औसत घनत्व 106 मेगावाट / 2 सेमी था और सत्ता शिखर घनत्व 8.83 किलोवाट / 2 मिमी था. जोखिम अवधि 24 घंटा थी.
जीवाणु निलंबन विकिरण के दौरान हड़कंप मच गया और यह बैक्टीरिया विकास (सभी ट्यूबों में Luria रसा मध्यम बैक्टीरिया विकसित करने के लिए अनुमति देने के लिए वहां गया था) के लिए उपयुक्त संस्कृति परिस्थितियों में रखा गया था कि ध्यान दें.
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Representative Results
लेजर आधारित सेटअप रेखाचित्र के रूप में चित्र 1 में प्रस्तुत किया है. पहला प्रयोगात्मक हालत एक स.ग. एन डी का उपयोग: और 200 मेगावाट की औसत ऑप्टिकल शक्ति: YAG लेजर 532 एनएम तरंगदैर्ध्य (डी YAG एन डी की दूसरी हार्मोनिक) कर रही है. यह बीम प्रत्येक विभाजन बीम 100 मेगावाट की शक्ति थी कि इस तरह के ऑप्टिकल 50% / 50% बीम फाड़नेवाला का उपयोग कर दो ऑप्टिकल पथ में विभाजित किया गया था. किरण व्यास 10 मिमी के बारे में था और इस प्रकार शक्ति घनत्व के बारे में 100 मेगावाट / 2 सेमी था. जोखिम अवधि 24 घंटा थी. रोशनी शक्ति अपेक्षाकृत अधिक है हालांकि यह नमूना के ताप पैदा करने के लिए पर्याप्त नहीं है.
एक क्यू स्विच स्पंदित एन डी का उपयोग दूसरे प्रयोगात्मक हालत: YAG लेजर 532 एनएम (हार्मोनिक दूसरे) और 6 मिमी की जगह व्यास की तरंग दैर्ध्य रहा. बिजली की औसत से 300 मेगावाट और 2.5 मेगावाट की ऑप्टिकल सत्ता शिखर था. क्यू स्विच लेजर की पल्स चौड़ाई 6 nsec था और पुनरावृत्ति दर 15Hz था. यह किरण भी ऑप्टिकल का उपयोग करते हुए दो रास्तों में विभाजित किया गया था50% / 50% बीम फाड़नेवाला. बिजली की औसत घनत्व के बारे में 100 मेगावाट / 2 सेमी और सत्ता शिखर घनत्व 8.83 किलोवाट / 2 मिमी था. इस शिखर शक्ति घनत्व 88.3 प्रत्येक नाड़ी समय क्षेत्र में लंबे समय से 10 nsec था के रूप में पल्स प्रति μJ / 2 मिमी का प्रवाह ऊर्जा के बराबर है. जोखिम अवधि 24 घंटा थी. दोनों प्रयोगों एक नियंत्रण के रूप में कार्य किया जो कोई प्रकाश जोखिम (यानी साथ और gentamycin के बिना) के साथ इसी तरह के विकास की स्थिति के तहत बाहर किया गया.
आंकड़े में 2 (एक) और 2 (ख) प्रभाव पी. पर एंटीबायोटिक के साथ और बिना क्रमशः स.ग. लेजर प्रकाश के साथ और क्यू स्विच लेजर के साथ नमूने की रोशनी के कारण प्राप्त aeruginosa प्रस्तुत किया है.
(नियंत्रण) अर्थात् प्रकाश के संपर्क में नहीं थे कि नमूनों में से या gentamycin उपचार के बिना सेल व्यवहार्यता में कोई कमी नहीं थी. इस परिणाम बैक्टीरिया की नकल उतार, gentamycin उपचार के लिए प्रतिरोधी होते हैंस्थिति अक्सर क्लिनिक में सामना करना पड़ा.
अकेले लेजर प्रकाश भी तो किसी की हत्या प्रेरित नहीं था. हालांकि, लेजर प्रकाश और gentamycin के संयोजन परिमाण के कई आदेशों द्वारा बैक्टीरिया व्यवहार्यता कम कर दिया. सबसे प्रमुख प्रभाव CW या क्यू स्विच लेजर या तो के संयोजन नियंत्रण समूह (एंटीबायोटिक अकेले या प्रकाश अकेले) में प्राप्त की माप की तुलना में परिमाण के 8 आदेश द्वारा व्यवहार्यता कम जिसमें 24 घंटे के बाद मापा गया था.
यह एंटीबायोटिक प्रतिरोधी बैक्टीरिया के इस प्रकार के उपचार की एक समाधान का सुझाव हो सकता है कि एक महत्वपूर्ण परिणाम है. प्रस्तावित उपचार कैथेटर और अस्पताल में इस्तेमाल अन्य उपकरणों में शामिल किया जा सकता है के बाद से कई घंटे बैक्टीरिया के प्रभावी हत्या प्राप्त करने के लिए आवश्यक हैं तथ्य यह है कि इस दृष्टिकोण के नैदानिक क्षमता को कम नहीं करता. चित्रा 3 में उदाहरण के लिए हम एक डिजाइन किया कैथेटर का एक उदाहरण प्रस्तुत करते हैं जिसमें में addiएक साथ संक्रमित अंग में उचित रोशनी फैलाना करने के लिए अनुमति छेद की बहुलता वहाँ तरल इंजेक्शन चैनल को देने.
आँकड़ों के लिए इस्तेमाल किया नमूनों की संख्या 6 थी (वहाँ गलती से दूषित थे कि ट्यूबों में से कुछ की एक या दो मामलों था और फिर वे आंकड़े से बाहर ले जाया गया). पी मूल्य से कम 0.05 था.
हम एंटीबायोटिक दवाओं के विभिन्न एकाग्रता स्तर के लिए हमारे प्रयोगों को दोहराने नहीं था कि ध्यान दें. हमारे प्रयोगों के सभी में एकाग्रता बहुत अधिक था. उस के लिए कारण बेहतर बैक्टीरिया अभी भी रोशनी के बिना एंटीबायोटिक दवाओं से प्रभावित नहीं किया गया था और रोशनी के साथ नष्ट हो गया सर्वोच्च एकाग्रता में अगर, यह स्पष्ट रूप से कम सांद्रता के लिए कुछ नहीं होगा के रूप में हमारे दृष्टिकोण की शक्ति का प्रदर्शन किया गया था.
रोशनी तरंगदैर्ध्य को चुनने के लिए तर्क की एक तरंग दैर्ध्य का चयन करना था जिसके लिए bacteriएक और एंटीबायोटिक दवाओं पारदर्शी हैं. इस चित्रा 4 में प्रदर्शन किया है. 532 एनएम तरंगदैर्ध्य लेजर का उपयोग करने के लिए अतिरिक्त प्रेरणा हमारी प्रयोगशाला में इसकी उपलब्धता के कारण और यह उच्च रोशनी शक्ति (वर्णक्रमीय फिल्टर के साथ नियमित रूप से सफेद प्रकाश स्रोत की तुलना में) के रूप में भी के लिए ट्यूनिंग क्षमता प्राप्त करने के लिए हमें भी अनुमति दी है कि इस तथ्य के कारण था बिजली और रोशनी के लौकिक व्यवहार के लिए.
चित्रा 1. . बैक्टीरिया रोशनी सेटअप लेजर स.ग. एन डी या तो था: YAG लेजर या क्यू स्विच एन डी स्पंदित: YAG लेजर. बाईं तरफ एक समान स्थितियों में उन दोनों को रोशन करने के लिए आदेश में, लेजर दो ट्यूबों, एंटीबायोटिक दवाओं के साथ एक और इसके बिना एक के बीच विभाजित है, जिसमें प्रयोगात्मक स्थापना की छवि देख सकते हैं. दोनों ट्यूबों स्थिति हैं एक दोषी पर एड. प्रयोगात्मक स्थापना के योजनाबद्ध स्केच आंकड़े के सही भाग में देखा जाता है.
चित्रा 2. (एक). पी. पर स.ग. लेजर और gentamycin का प्रभाव aeruginosa. नमूने एक स.ग. लेजर प्रकाश (100 मेगावाट की बिजली) के साथ साथ और gentamycin (50 माइक्रोग्राम / एमएल) के बिना प्रकाशित किया गया. 3 प्रयोगों का औसत प्रस्तुत किया है. (ख). पी. aeruginosa पर क्यू स्विच लेजर और gentamycin का प्रभाव. नमूने पी. पर साथ और gentamycin (50 माइक्रोग्राम / एमएल) के बिना क्यू स्विच लेजर प्रकाश (1.65 मेगावाट) के साथ प्रकाशित किए गए थे aeruginosa व्यवहार्यता. 3 प्रयोगों का औसत प्रस्तुत किया है.
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चित्रा 3. पी. के खिलाफ जैव चिकित्सा उपचार के लिए प्रस्तावित कैथेटर आधारित उपकरण aeruginosa. आंकड़ा में डॉट्स प्रकाश इलाज ऊतक में विसरित होने के कारण प्रकाश बिखरने अंक का प्रतिनिधित्व करते हैं.
चित्रा 4 के लिए 532 एनएम के तरंग दैर्ध्य के आसपास अवशोषण स्पेक्ट्रम (ऑ में):. (एक). बैक्टीरिया, (ख). gentamycin. बड़ा आंकड़ा देखने के लिए यहां क्लिक करें .
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Discussion
Phototherapy इलाज कई बीमारियों के लिए एक आशाजनक दृष्टिकोण के रूप में उभर हाल के वर्षों में उन्नत इन दोनों क्षेत्रों की अनुसंधान का एक क्षेत्र कर दिया गया है. इस संदर्भ में दिखाई रेंज में प्रकाश का उपयोग बड़े पैमाने पर अध्ययन किया गया है. उदाहरण के लिए, यह संक्रमित घावों नसबंदी प्रयोजनों के लिए तीव्र दृश्य प्रकाश के लिए उन्हें उजागर करके अधिक प्रभावी रूप से ठीक किया जा सकता है कि पाया गया है. इस दृष्टिकोण के लिए कार्रवाई की व्यवस्था बैक्टीरिया 11 को मारने के जो प्रकाश प्रेरित ऑक्सीजन कण की प्रेरण (आरओएस) के माध्यम से होना सिद्ध किया गया था.
6 पिछले अध्ययनों लाल और पास बुनियादी लाल प्रकाश द्वारा प्रेरित किया उन लोगों की तुलना में नीले रंग की रोशनी के साथ प्रबुद्ध बैक्टीरिया में आरओएस के बहुत अधिक मात्रा का प्रदर्शन किया है. साहित्य में सबसे सबूत हल्के नीले रंग की जीवाणुनाशक प्रभाव पर केंद्रित है इस वजह.
प्रतिरोधी बैक्टीरिया से लड़ने के लिए लेजर प्रकाश के इस्तेमाल के लिए एक और उदाहरण हाल ही में Kresp द्वारा प्रदर्शन किया गयामैं एट अल. 12. अध्ययन है कि लेजर में उत्पन्न शॉकवेव प्रौद्योगिकी biofilms के उन्मूलन के लिए उपयोग किया गया था. YAG लेजर और पतली फाइबर, शॉकवेव प्रभाव का उत्पादन किया जो प्लाज्मा गठन उत्पन्न विशेष जांच: एक लघु क्यू स्विच एन डी का उपयोग करके. लेखकों ने इस पद्धति को प्रभावी ढंग पी. बाधित करने के लिए कर रहा था कि पता चला इन विट्रो में aeruginosa biofilms.
हम लेजर प्रकाश का उपयोग गैर photosensitizer रोगाणुरोधी एजेंट की प्रभावकारिता में वृद्धि करने का प्रयास के रूप में हम इस अध्ययन में प्रस्तुत किया है दृष्टिकोण कुछ अलग 13 थी. हमारे परिणाम रोशनी के साथ एंटीबायोटिक उपचार के संयोजन से, रोगाणुरोधी गतिविधि नाटकीय रूप से वृद्धि की जा सकती है कि सुझाव.
वास्तव में, अकेले एंटीबायोटिक में मनाया एक पूरी तरह से प्रतिरोधी फेनोटाइप, से बैक्टीरिया एंटीबायोटिक और प्रकाश उपचार की उपस्थिति में संवेदनशील बन गया. इस आशय की कार्रवाई के तंत्र स्पष्ट नहीं है और आगे जांच की आवश्यकता होगीआयन. हालांकि, हम आरओएस उपचार के दौरान उत्पन्न कर रहे हैं कि क्या जांच करने के लिए प्रदर्शन किया है कि इलेक्ट्रॉन paramagnetic अनुनाद (EPR) के माप में, विभिन्न उपचार के बीच कोई महत्वपूर्ण अंतर 13 प्राप्त हुई थी. इन परिणामों के संयुक्त उपचार के प्रभाव आरओएस उत्पादन शामिल नहीं करता है और अलग तंत्र पर विचार करना होगा कि सुझाव. यह प्रकाश उपचार झिल्ली पारगम्यता में परिवर्तन और अंततः एंटीबायोटिक्स अपनी हत्या से बेदखल बैक्टीरिया कोशिका में प्रवेश करने की अनुमति देता है कि परिकल्पना की जा सकती है.
आपरेशन की व्यवस्था पूरी तरह से नहीं पता लगाया जाता है, हमारे दृष्टिकोण के इस संयोजन को लागू करने से अब क्लीनिक में प्रभावी रूप से पुन: उपयोग किया जा सकता है, जबकि रोगाणुरोधी प्रतिरोध के कारण खारिज कर दिया गया हो सकता है कि वाणिज्यिक एंटीबायोटिक के साथ प्रकाश की संयुक्त चिकित्सा की क्षमता पर प्रकाश डाला.
जाहिर है के रूप में पांडुलिपि में बताया गया है, कई घंटे की रोशनी एन के क्रम में की जरूरत है एंटीबायोटिक दवाओं की प्रभावकारिता hance. यह वास्तव में प्रस्तावित दृष्टिकोण की एक खामी है. इस तरह एक रोशनी का अहसास कैथेटर के अंदर रोशनी के स्रोत के रूप में (चित्रा 3 द्वारा प्रस्तावित) स्थापित करके जैसे प्राप्त किया जा सकता है. घाव बाहरी है तो उस के अलावा, रोशनी के स्रोत के साथ प्लास्टर के रूप में बैंडिंग विशेष घाव के शीर्ष पर रखा जा सकता है और मरीज को रात में सो रही है जबकि जैसे कई घंटे के लिए रोशन. संक्रमण आंतरिक है और कुछ अंगों के लिए, कई घंटे के लिए रोगी अस्पताल में भर्ती है और वह / वह आसव बैग से जुड़ा है तो इस तरह के एक एंडोस्कोप या एक विशेष फाइबर के रूप में एक रोशनी चैनल अंग को संपर्क किया और लगातार (साथ इसे रोशन किया जा सकता है रोगी (अर्क बैग कई घंटे के लिए रोगी से जुड़ा है बिल्कुल के रूप में) अस्पताल में भर्ती है, जबकि) एंटीबायोटिक उपचार लागू. हम पूरी तरह से दृष्टिकोण आम तौर पर संक्रमित अंगों के इलाज के लिए अच्छा नहीं है सहमत हैं.
NT के "इस पांडुलिपि में हम तेजी से और व्यावहारिक आवेदन के लिए प्रस्तावित तकनीक का लाभ बताते हैं कि लेकिन यह अन्य अध्ययनों से इस तरह के vivo प्रयोगों में आवश्यक के रूप में कर रहे हैं प्राप्त करने के लिए.> नोट तंतुप्रसू या उपकला कोशिकाओं पर विषाक्तता अध्ययन के रूप में अच्छी तरह से उपयोगी हो जाएगा बैक्टीरियल कोशिकाओं में प्रस्तावित चिकित्सा की व्यवस्था का प्रदर्शन होगा कि पढ़ाई आवश्यक हैं. इस पत्र में इसके अलावा हम एंटीबायोटिक के लिए इसे और अधिक पारगम्य किया है कि बैक्टीरियल झिल्ली के प्रकाश प्रेरित परिवर्तन. जाहिर है चीजें एक में अलग हो जाएगा कि धारणा है . जीवाणु संक्रमण biofilms के कारण कर रहे हैं जहां नैदानिक सेटिंग फिर दो प्रमुख समस्याएं हैं:. Biofilm बैक्टीरिया सीमित हो जाएगा बायोफिल्म मास में antimicrobials की उनकी planktonic समकक्षों और पैठ के साथ तुलना में अधिक प्रतिरोधी हो जाएगा इसलिए, पर प्रकाश और gentamycin के प्रभाव की खोज एक पी. aeruginosa biofilm मॉडल हमारे भविष्य के अध्ययन का उद्देश्य है.Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
ब्याज की कोई संघर्ष की घोषणा की.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Lauria Broth | Difco | 241420 | |
| Gentamycin | Sigma | G1914 | |
| Bacto Agar | Difco | 231710 |
References
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